Page 76 - 《中国药房》2022年23期

负电性，故使其Zeta电位略有降低，这提示CLMSNs-SS-
NH2@DOX/siRNA 可与静息状态下呈负电性的细胞相
互吸引，以提高细胞摄取效率。 （ W/g ） c 强度 c
2.2.2 微观形态分析 分别取 MSNs-SS-NH2@DOX、 热流/ b
b
CLs@DOX、CLMSNs-SS-NH2@DOX 和 CLMSNs-SS-NH2@ a a
DOX/siRNA 适量分散于 95% 乙醇中，然后分别滴于铜 0 30 60 90 120 5 10 15 20 25 30 35
温度/℃ 扫描角度/°
网上，经充分干燥后，采用透射电子显微镜进行观察。 A. 差示扫描量热图 B. X射线衍射图
结果显示，MSNs-SS-NH2@DOX 的介孔结构清晰，粒径 400
c 350 MSNs-SS-NH 2
均一，分散性较好；其经 CLs 包覆后，所得 CLMSNs-SS- 200
CLMSNs-SS-NH 2
NH2@DOX 表面出现一层透明脂膜；进一步负载 siRNA b （ cm 2 /g ） 250
200
后，CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA结构清晰，表面脂膜 透光率/% a 吸附量/ 150
层明显，这说明该纳米载体构建成功。结果见图1。 100
50
0
4 000 3 000 2 000 1 000 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
波长/cm －1 相对压强
C. 傅里叶红外光谱图 D. 物理吸附-脱附曲线
a：MSNs-SS-NH 2@DOX； b：CLs@DOX； c：CLMSNs-SS-NH 2@
DOX/siRNA
图2 不同修饰型纳米载体的差示扫描量热图、X 射线
衍射图、傅里叶红外光谱图及物理吸附-脱附曲线
100 nm 100 nm
A. MSNS-SS-NH 2@DOX B. CLs@DOX
末适量与溴化钾粉末混合，充分研磨均匀后，置于傅里
叶红外光谱仪上检测。结果显示，MSNs-SS-NH2@DOX
－1
在 1 680 cm 处出现－SS－特征吸收峰，这表明－SS－
－1
成功连接至 MSNs 表面。CLs 在 2 930 、2 850 cm 处均
出现长链脂肪酸 C－H 伸缩振动峰。经 CLs 包埋后，
CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 在1 240 cm 处的P＝O
－1
200 nm 200 nm
伸缩振动峰变宽，且位于 3 500 cm 处的硅醇基团的伸
－1
C. CLMSNs-SS-NH 2 @DOX D. CLMSNs-SS-NH 2@DOX/siRNA
缩 峰 有 所 减 弱 ，这 表 明 CLs 可 包 覆 于 MSNs-SS-
图1 不同修饰型纳米载体的透射电子显微图
NH2@DOX表面。结果见图2C。
2.2.3 差示扫描量热分析 分别取 MSNs-SS-NH2@ 2.2.6 物 理 吸 附 分 析 分 别 取 MSNs-SS-NH2、
DOX、CLs@DOX、CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 适量 CLMSNs-SS-NH2的干燥粉末适量，于氮气环境中置于
置于差示扫描量热仪中，设置升温速率为 7 ℃/min，在 物理吸附仪上进行检测。结果显示，MSNs-SS-NH2的物
N2保护条件下检测各样品在－50～300 ℃范围内的吸 理吸附-脱附曲线下面积最大。经CLs包覆后，CLMSNs-
放热峰形。结果显示，MSNs-SS-NH2@DOX 在 60 ℃处 SS-NH2的物理吸附-脱附曲线下面积减小，这表明 CLs
有一明显吸热峰，表明其在该温度下可由不定形状态转 已成功包裹于MSNs-SS-NH2表面。结果见图2D。
变为结晶态。CLs@DOX在90 ℃处有一明显吸热峰，表 2.3 CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA的体外释放度测定
明其可由固态转变为凝胶态。MSNs-SS-NH2@DOX 经 采 用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 CLMSNs-SS-NH2@
[11]
CLs包埋后相变温度约为75 ℃，相较于原始相变温度有 DOX/siRNA 在不同 pH 条件下（pH5.0、pH7.4）及不同
所提高，表明以 CLs 包埋可提高 MSNs-SS-NH2@DOX/ GSH浓度下（0、2、5、10 mmol/L）DOX的体外释放度。结果
siRNA的热稳定性。结果见图2A。 显示，在同一pH条件下，CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA
2.2.4 X射线衍射分析 分别取MSNs-SS-NH2@DOX、 中 DOX 的释放度与 GSH 的浓度成正比，且在 pH5.0 条
CLs@DOX、CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 的 干 燥 粉 件 下 DOX 的 释 放 度 均 高 于 pH7.4 条 件 下 ，这 表 明
末适量，置于 X 射线衍射光谱仪中检测。结果显示， CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 具有良好的 pH/还原双
MSNs-SS-NH2@DOX 在 22° 处 有 一 个 特 征 吸 收 峰 ， 重响应释药特性。结果见图3。
CLs@DOX 在 32°处有一个特征吸收峰，CLMSNs-SS- 2.4 CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA的细胞实验考察
NH2@DOX/siRNA在22°和32°处均有特征吸收峰，这表 2.4.1 细胞摄取的考察 将对数生长期的MCF-7/ADR
4
明CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA已成功构建。结果见 细胞以 1×10 个/孔接种于 12 孔板中，于 37 ℃、5%CO2
图2B。 条件下培养 24 h 后，弃去培养基，然后分为 DOX 组、
2.2.5 红外光谱分析 分别取 MSNs-SS-NH2@DOX、 MSNs-SS-NH2@DOX 组 、CLs@DOX 组 、CLMSNs-SS-
CLs@DOX、CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 的 干 燥 粉 NH2@DOX 组和 CLMSNs-SS-NH2@DOX/siRNA 组，各

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