Page 132 - 《中国药房》2022年23期

×10 000 显示，样品含量的 RSD 为 5.28%（n＝6），表明该方法重
3.0
复性良好。
intensity 2.0 2.10 加样回收率试验
1.0
称取同一批样品（序号 12），每份约 4 g，精密称定，
0
0 2.5 5.0 7.5 置于具塞离心管中，分别精密加入“2.3”项下展青霉素对
t/min 照品贮备液 12、60、120 μL，每个水平平行 3 份，分别作
A.供试品溶液
×100 000 为低、中、高 3 个浓度水平的加样回收试验样品。按
1.5 “2.4”项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取5 μL，按
intensity 1.0 “2.1”“2.2”项下条件进样测定，计算加样回收率，结果
0.5
见表2。
0 表2 展青霉素的加样回收率试验结果（n＝3）
0 2.5 5.0 7.5
t/min 取样量/g 样品含量/ng 加入量/ng 测得量/ng 加样回收率/% 平均加样回收率/% RSD/%
B.基质对照品溶液（质量浓度为100 ng/mL） 4.009 8 0 120 109.6 91.33 83.90 11.09
图1 化橘红中展青霉素含量测定的总离子流图 4.021 0 0 120 104.3 86.90
4.024 0 0 120 88.2 73.46
2.5 系列基质对照品溶液的制备 3.959 8 0 600 517.3 86.22 92.08 5.53
4.000 1 0 600 572.3 95.38
取空白基质样品（序号 12，由预实验结果得知该样
3.994 6 0 600 567.9 94.64
品不含展青霉素）4 g，按“2.4”项下方法处理至“40 ℃条 3.991 8 0 1 200 1 108.7 92.39 92.21 1.75
件下用氮气吹至近干”，分别精密加入“2.3”项下展青霉 4.020 3 0 1 200 1 124.8 93.73
素对照品溶液5、10、20、50、100、150、200 μL，再用2%乙 3.979 2 0 1 200 1 086.1 90.51
腈溶液（用乙酸调节pH值至2）定容至1 mL，涡旋混匀， 2.11 稳定性试验
用微孔滤膜（0.22 μm）滤过，取续滤液，即得质量浓度分 取“2.10”项下的供试品溶液，分别于制备后0、2、6、

别为 5、10、20、50、100、150、200 ng/mL的系列基质对照 12 h 按“2.1”“2.2”项下条件进样测定，记录峰面积。结
品溶液。其总离子流图见图1B。 果显示，峰面积的 RSD 为 5.82%（n＝4），表明供试品溶
2.6 线性关系考察 液在制备后12 h内稳定性良好。
取“2.5”项下系列基质对照品溶液，按“2.1”“2.2”项 2.12 样品测定
下条件进样测定，记录峰面积。以峰面积（Y）对基质对 取 20 批化橘红样品各适量，分别按“2.4”项下方法
照品的质量浓度（X）进行线性回归，绘制标准曲线，权重 制备供试品溶液，按“2.1”“2.2”项下条件进样分析，记录
系数设为1/x，可得线性回归方程为Y＝9 152.74X－12 285.2 峰面积并以外标法计算样品含量。结果显示，20批样品
（r＝0.999 6）。结果表明，展青霉素的检测质量浓度在 均未检出展青霉素。

5～200 ng/mL范围内与峰面积成良好的线性关系。 3 讨论
2.7 灵敏度试验 3.1 流动相的选择
按“2.5”项下制备不同质量浓度的展青霉素基质对 流动相的种类和比例会对目标化合物的离子化效
照品溶液，按“2.1”“2.2”项下条件进样测定，以信噪比 率产生影响，从而影响测试方法的灵敏度。展青霉素对
（S/N）为 3 时测得的量作为检出限，S/N＝10 时测得的量 热稳定，在酸性条件下化学性质稳定，在碱性条件下易
[13]
作为定量限。结果显示，其定量限为6 μg/kg，检出限为 降解 。本研究考察了不同流动相系统（包括0.1%甲酸
3 μg/kg。 溶液-乙腈、水-乙腈、水-甲醇）对展青霉素质谱响应的影
2.8 精密度试验 响。结果表明，流动相系统中加入甲酸后，可明显降低
精密吸取“2.5”项下基质对照品溶液（质量浓度为 展青霉素的离子化效率，使仪器灵敏度显著下降，故
50 ng/mL）5 μL，按“2.1”“2.2”项下条件连续进样测定 6 0.1% 甲酸溶液-乙腈不适合用于展青霉素的测定；而后
次，记录峰面积。结果显示，峰面积的 RSD 为 1.83% 两种流动相系统均可获得较好的质谱响应，但乙腈相对
（n＝6），表明该方法精密度良好。 于甲醇的黏度更小，相应的系统压力也更小，故本研究
2.9 重复性试验 选择水-乙腈作为流动相。
称取同一批样品（序号 12），每份约 4 g，精密称定， 3.2 色谱柱的选择
平行 6 份，分别置于具塞离心管中，精密加入“2.3”项下 展青霉素易溶于水，极性大 ，在 C18色谱柱上的保
[14]
展青霉素对照品贮备液60 μL，按“2.4”项下方法制备供 留弱。鉴于此，本研究考察了 Aglient ZORBAX Eclipse
试品溶液。分别精密吸取 5 μL，按“2.1”“2.2”项下条件 Plus C18 （2.1 mm×100 mm，1.8 µm）、Phenomenex Kine‐
进样测定，记录峰面积并以外标法计算样品含量。结果 tex C18 （100 mm×2.1 mm，2.6 µm）、岛 津 Shim-pack

· 2938 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 23 中国药房 2022年第33卷第23期