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GIST（100  mm×2.1  mm，2  μm）、岛 津 Shim-pack  XR-     术处理的药材饮片（序号1～5），还是采用传统闷润法炮
          ODS（3.0 mm×75 mm，2.2 μm）几种色谱柱对展青霉素                 制的药材饮片（序号 6～20），均不会造成化橘红在加工
          的分离效果。结果表明，岛津 Shim-pack XR-ODS 色谱                  过程中受到展青霉素污染。本研究所建方法可实现对
          柱的碳载量高，可以增强展青霉素在色谱柱上的保留，                           化橘红中展青霉素的快速筛查和准确定量，为化橘红的
          延迟其出峰时间，使其与其他大极性杂质有效分离，避                           安全性研究和质量控制提供实验依据和方法。
          免杂质对测定的干扰和共流出峰的抑制效应，故本研究                           参考文献
          最终选择岛津Shim-pack XR-ODS色谱柱。                         [ 1 ]  周玉春，杨美华，许军 . 展青霉素的研究进展[J]. 贵州农
          3.3 前处理方法的优化                                            业科学，2010，38（2）：112-116.
              孟瑾等 研究发现，对山楂样品进行果胶酶酶解处                         [ 2 ]  GLASER  N，STOPPER  H.  Patulin：mechanism  of  geno‐
                    [15]
          理可明显提高方法的回收率。这是由于大分子果胶质                                 toxicity[J]. Food Chem Toxicol，2012，50（5）：1796-1801.
                              [1]
          对展青霉素有包裹作用 ，仅采用物理和化学提取方式                           [ 3 ]  AYED-BOUSSEMA  I，ABASSI  H，BOUAZIZ  C，et  al.
          不能完全把展青霉素提取出来，还需同时采用生物提取                                Antioxidative  and  antigenotoxic  effect  of  vitamin  E
          法，以提高提取和测定方法的准确度。同理，化橘红中                                against  patulin  cytotoxicity  and  genotoxicity  in  HepG2
                                                                  cells[J]. Environ Toxicol，2013，28（6）：299-306.
          含有大量果胶，因此本研究在化橘红样品粉末加水溶散
                                                             [ 4 ]  HAN N F，LUO R L，LIU J Y，et al. Transcriptomic and
          后，进行了果胶酶酶解处理，以尽可能多地提取出展青
                                                                  proteomic analysis reveals mechanisms of patulin-induced
          霉素。
                                                                  cell  toxicity  in  human  embryonic  kidney  cells[J]. Toxins
              本研究对提取溶剂也进行了考察，比较了乙腈和甲
                                                                 （Basel），2020，12（11）：E681.
          醇的提取效果。结果表明，酶解后的样品经甲醇提取后
                                                             [ 5 ]  IWAHASHI H，KITAGAWA E，SUZUKI Y，et al. Evalua‐
          的溶液颜色明显深于乙腈提取液，同时甲醇提取液在加                                tion of toxicity of the mycotoxin citrinin using yeast ORF
          入无水硫酸镁-无水醋酸钠（4∶1，m/m）混合粉末固相分                            DNA microarray and Oligo DNA microarray[J]. BMC Ge‐
          散萃取后不分层，无法达到除去大量色素及大极性化合                                nomics，2007，8：95.
          物的目的，最后得到的供试品溶液对展青霉素会产生明                           [ 6 ]  WU T S，LIAO Y C，YU F Y，et al. Mechanism of patulin-
          显的基质抑制效应，影响测定的准确性和灵敏度，故本                                induced  apoptosis  in  human  leukemia  cells （HL-60）[J].
          研究采用乙腈作为提取溶剂。同时，本研究还考察了无                                Toxicol Lett，2008，183（1/2/3）：105-111.
          水硫酸镁-无水醋酸钠（4∶1，m/m）混合粉末在 1.5 g 和                   [ 7 ]  ZHANG B G，LIANG H R，HUANG K，et al. Cardiotoxi-
          3.0 g 不同加入量条件下对净化效果和实验准确度的影                             city of patulin was found in H9c2 cells[J]. Toxicon，2022，
          响，结果表明没有明显差异，故本研究选择无水硫酸镁-                               207：21-30.
                                                             [ 8 ]  俞世荣，刘江，孟昭赫 . 展青霉素研究进展[M]. 国外医
          无水醋酸钠（4∶1，m/m）混合粉末的加入量为1.5 g。
                                                                  学：卫生学分册，1996，23（1）：40-45.
              展青霉素固相净化柱是一种直接通过式的杂质吸
                                                             [ 9 ]  黄莉，张浩，丁伟琴，等.中药中真菌毒素污染问题[J].海
          附型固相萃取柱。样品溶液直接上样后，该净化柱可将
                                                                  峡药学，2009，21（6）：95-99.
          杂质吸附于柱体上，从而降低基质杂质对测定结果的影
                                                             [10]  李峻媛，万丽，杨美华.真菌毒素限量标准及其在中药中
          响。随着杂质斑带在柱体上的延伸，后续溶液的颜色逐                                的研究进展[J].中草药，2011，42（3）：602-609.
          渐变深而最终对样品的净化效果产生影响，因此除杂时                           [11]  王亚楠，王志青，祖琳，等 . 食品中展青霉素的研究进展
          应避免上样体积过大而出现过载现象；同时，由于溶液                                [J].食品安全质量检测学报，2021，12（18）：7410-7416.
          在柱体上有部分的吸附损失，经综合考虑，本研究最终                           [12]  国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部[S]. 2020
          确定上柱溶液的体积为9 mL。此外，展青霉素在酸性环                              年版.北京：中国医药科技出版社，2020：76-77.
          境中的稳定性较好，而其溶液蒸干后形成的薄膜则不稳                           [13]  何绍映，李如栋，陈宁周，等.液相色谱法及液相色谱-串
            [1]
          定 。本研究将通过展青霉素固相净化柱后的净化液在                                联质谱法测定山楂及其制品中展青霉素的结果比较与
          40 ℃条件下用氮气吹至近干，并在使用氮气前加入50 μL                           建议[J]. 食品安全质量检测学报，2020，11（19）：6879-
          乙酸溶液，可增强展青霉素在整个浓缩过程中的稳定                                 6885.
                                                             [14]  李金宝.高效液相色谱和液相色谱串联质谱技术在检测
          性，同时使溶液在近干状态下不容易被完全吹干，从而
                                                                  苹果制品中展青霉素的研究进展[J].食品安全质量检测
          提高实验的可操作性。但由于化橘红中展青霉素的含
                                                                  学报，2020，11（5）：1347-1353.
          量测定为痕量残留分析，且样品的前处理过程比较复
                                                             [15]  孟瑾，黄菲菲，吴榕，等 . 高效液相色谱法测定苹果及山
          杂，这造成了在低浓度加样水平的回收率差异较大。
                                                                  楂制品中的展青霉素[J]. 上海农业学报，2009，25（1）：
          4 结语                                                    27-31.
              本研究所收集的 20 批化橘红药材饮片均未检出展                                      （收稿日期：2022-04-06  修回日期：2022-11-18）
          青霉素，提示不管是采用产地趁鲜加工与炮制一体化技                                                                （编辑：胡晓霖）



          中国药房  2022年第33卷第23期                                              China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 23    · 2939 ·
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