Page 127 - 《中国药房》2022年23期
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2.4 幼龄大鼠胃酸浓度检测 对照组 模型组 化橘红提取物低剂量组 对照组 模型组 化橘红提取物低剂量组
500 化橘红提取物中 化橘红提取物高 健胃消食片组 40 化橘红提取物中 化橘红提取物高 健胃消食片组
剂量组 剂量组 b 剂量组 剂量组
末次给药后 1 h,异氟烷麻醉大鼠,备皮,常规消毒 400 a a b a b 30 b b b
300
皮肤,于剑突下沿腹白线开2.5 cm切口,提起胃,在幽门 体质量/g 200 摄食量/g 20 a b a
100 10
与十二指肠结合部用缝线结扎,缝合创口后放回笼中, 0 0
第0天 第7天 第14天 第7天 第14天
术后禁食禁水。4 h 后麻醉大鼠并进行腹主动脉取血。 A.体质量 B.摄食量
a:与对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05
处死后取出胃组织,收集胃液于刻度离心管中,以3 000
图1 化橘红提取物对幼龄大鼠体质量和摄食量的影响
r/min离心15 min。吸取2 mL上清液加入二甲基黄和酚
3.2 化橘红提取物对幼龄大鼠胃酸浓度和胃蛋白酶活
酞指示剂各 3 滴,用 0.02 mol/L NaOH 溶液微量滴定,逐
性的影响
滴加入,边滴边摇匀,颜色由樱红色变为橙黄色再变为
与对照组比较,模型组幼龄大鼠胃酸浓度显著降低
微红色时为滴定终点。胃酸浓度(mmol/L)=NaOH 溶
(P<0.05);与模型组比较,化橘红提取物中、高剂量组
液终点量×10。
幼龄大鼠胃酸浓度均显著升高(P<0.05),健胃消食片
2.5 幼龄大鼠胃蛋白酶活性检测
组幼龄大鼠胃酸浓度升高但差异无统计学意义(P>
采用相应试剂盒,取0.1 mL胃液加入0.9 mL试剂盒
0.05)。与对照组比较,模型组幼龄大鼠胃蛋白酶活性显
中的提取液,于 4 ℃下以 10 000 r/min 离心 10 min,取上
著降低(P<0.05);与模型组比较,化橘红提取物中、高
清液稀释 2 倍,按照说明书中的方法加样于 96 孔板中,
剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠胃蛋白酶活性均显著
用酶标仪在275 nm波长处测得吸光度,再计算胃蛋白酶
升高(P<0.05)。结果见图2。
活性。胃蛋白酶活性(U/mL)=13.1×(测定孔吸光度-
对照孔吸光度)。 ( mmol/L ) 80 b ( U/mL ) 1 200 a b b b
60
800
2.6 幼龄大鼠血清GAS、MTL、GIP水平检测 40 a b 400
20
取“2.4”项下幼龄大鼠血液于常温下静置 2 h 凝固, 胃酸浓度/ 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 胃蛋白酶活性 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
于 4 ℃ 下 以 3 000 r/min 离 心 10 min,吸 取 上 清 液 , A.胃酸浓度 Ⅵ B.胃蛋白酶活性 Ⅵ
于-80 ℃超低温冰箱中备用。检测血清中GAS、MTL、 Ⅰ:对照组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:化橘红提取物低剂量组;Ⅳ:化橘红提
取物中剂量组;Ⅴ:化橘红提取物高剂量组;Ⅵ:健胃消食片组;a:与对
GIP水平,按试剂盒说明书进行操作。 照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05
2.7 幼龄大鼠胃组织病理学观察 图2 化橘红提取物对大鼠胃酸浓度和胃蛋白酶活性的
取“2.4”项下获取胃组织适量,多聚甲醛固定,制得 影响
石蜡切片,HE染色,将切片放入数字玻片图像扫描及分 3.3 化橘红提取物对幼龄大鼠血清 GAS、MTL 和 GIP
析系统进行图像采集并分析。 水平的影响
2.8 统计学方法 与对照组比较,模型组幼龄大鼠血清GAS、MTL水
采用GraphPad Prism 8.4软件进行统计学分析,各组 平均显著降低(P<0.05),GIP水平显著升高(P<0.05);
数据均以x±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,组 与模型组比较,化橘红提取物中、高剂量组幼龄大鼠血
间两两比较采用Tukey法进行分析。检验水准α=0.05。 清 GAS 水平均显著升高(P<0.05),健胃消食片组幼龄
3 结果 大鼠血清 GAS 水平升高但差异无统计学意义(P>
3.1 化橘红提取物对幼龄大鼠体质量和摄食量的影响 0.05);化橘红提取物高剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠
开始给药(第0天)前,与对照组相比,模型组幼龄大 血清MTL水平均显著升高(P<0.05);化橘红提取物低、
鼠的摄食量降低约 50%(P<0.05)、体质量降低 19% 中、高剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠血清GIP水平均
(P<0.05),表明厌食症造模成功。与模型组相比,给药 显著降低(P<0.05)。结果见图3。
第7天时,化橘红提取物中剂量组幼龄大鼠体质量显著 3.4 化橘红提取物对幼龄大鼠胃组织病理学改变的影响
增加(P<0.05);给药第 14 天时,化橘红提取物中剂量 与对照组比较,模型组幼龄大鼠出现明显胃黏膜充
组、健胃消食片组幼龄大鼠体质量均显著增加(P< 血,上皮细胞松解脱落现象;与模型组比较,化橘红提取
0.05)。与模型组相比,给药第7、14天时,化橘红提取物 物中、高剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠胃表层上皮细
高剂量组、健胃消食片组摄食量均显著增加(P<0.05)。 胞未见明显病理改变,偶见胃黏膜轻微充血。结果
结果见图1。 见图4。
中国药房 2022年第33卷第23期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 23 · 2933 ·