Page 127 - 《中国药房》2022年23期
P. 127

2.4 幼龄大鼠胃酸浓度检测                                           对照组  模型组   化橘红提取物低剂量组   对照组   模型组   化橘红提取物低剂量组
                                                               500  化橘红提取物中  化橘红提取物高  健胃消食片组  40  化橘红提取物中  化橘红提取物高  健胃消食片组
                                                                   剂量组  剂量组      b         剂量组   剂量组
              末次给药后 1 h,异氟烷麻醉大鼠,备皮,常规消毒                        400  a    a  b  a   b    30        b       b  b
                                                               300
          皮肤,于剑突下沿腹白线开2.5 cm切口,提起胃,在幽门                        体质量/g  200               摄食量/g  20  a  b  a
                                                               100                      10
          与十二指肠结合部用缝线结扎,缝合创口后放回笼中,                              0                        0
                                                                   第0天   第7天   第14天          第7天      第14天
          术后禁食禁水。4 h 后麻醉大鼠并进行腹主动脉取血。                                    A.体质量                   B.摄食量
                                                                a:与对照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05
          处死后取出胃组织,收集胃液于刻度离心管中,以3 000
                                                             图1 化橘红提取物对幼龄大鼠体质量和摄食量的影响
          r/min离心15 min。吸取2 mL上清液加入二甲基黄和酚
                                                             3.2 化橘红提取物对幼龄大鼠胃酸浓度和胃蛋白酶活
          酞指示剂各 3 滴,用 0.02 mol/L NaOH 溶液微量滴定,逐
                                                             性的影响
          滴加入,边滴边摇匀,颜色由樱红色变为橙黄色再变为
                                                                 与对照组比较,模型组幼龄大鼠胃酸浓度显著降低
          微红色时为滴定终点。胃酸浓度(mmol/L)=NaOH 溶
                                                            (P<0.05);与模型组比较,化橘红提取物中、高剂量组
          液终点量×10。
                                                             幼龄大鼠胃酸浓度均显著升高(P<0.05),健胃消食片
          2.5 幼龄大鼠胃蛋白酶活性检测
                                                             组幼龄大鼠胃酸浓度升高但差异无统计学意义(P>
              采用相应试剂盒,取0.1 mL胃液加入0.9 mL试剂盒
                                                             0.05)。与对照组比较,模型组幼龄大鼠胃蛋白酶活性显
          中的提取液,于 4 ℃下以 10 000 r/min 离心 10 min,取上
                                                             著降低(P<0.05);与模型组比较,化橘红提取物中、高
          清液稀释 2 倍,按照说明书中的方法加样于 96 孔板中,
                                                             剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠胃蛋白酶活性均显著
          用酶标仪在275 nm波长处测得吸光度,再计算胃蛋白酶
                                                             升高(P<0.05)。结果见图2。
          活性。胃蛋白酶活性(U/mL)=13.1×(测定孔吸光度-
          对照孔吸光度)。                                             ( mmol/L )  80  b       ( U/mL )  1 200  a  b  b  b
                                                               60
                                                                                        800
          2.6 幼龄大鼠血清GAS、MTL、GIP水平检测                            40    a     b            400
                                                               20
              取“2.4”项下幼龄大鼠血液于常温下静置 2 h 凝固,                     胃酸浓度/  0  Ⅰ   Ⅱ   Ⅲ   Ⅳ   Ⅴ   胃蛋白酶活性  0  Ⅰ   Ⅱ   Ⅲ   Ⅳ   Ⅴ
          于 4  ℃ 下 以 3  000  r/min 离 心 10  min,吸 取 上 清 液 ,            A.胃酸浓度    Ⅵ             B.胃蛋白酶活性    Ⅵ
          于-80 ℃超低温冰箱中备用。检测血清中GAS、MTL、                          Ⅰ:对照组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:化橘红提取物低剂量组;Ⅳ:化橘红提
                                                             取物中剂量组;Ⅴ:化橘红提取物高剂量组;Ⅵ:健胃消食片组;a:与对
          GIP水平,按试剂盒说明书进行操作。                                 照组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05
          2.7 幼龄大鼠胃组织病理学观察                                   图2 化橘红提取物对大鼠胃酸浓度和胃蛋白酶活性的
              取“2.4”项下获取胃组织适量,多聚甲醛固定,制得                           影响
          石蜡切片,HE染色,将切片放入数字玻片图像扫描及分                          3.3 化橘红提取物对幼龄大鼠血清 GAS、MTL 和 GIP
          析系统进行图像采集并分析。                                      水平的影响
          2.8 统计学方法                                              与对照组比较,模型组幼龄大鼠血清GAS、MTL水
              采用GraphPad Prism 8.4软件进行统计学分析,各组               平均显著降低(P<0.05),GIP水平显著升高(P<0.05);
          数据均以x±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,组                         与模型组比较,化橘红提取物中、高剂量组幼龄大鼠血

          间两两比较采用Tukey法进行分析。检验水准α=0.05。                      清 GAS 水平均显著升高(P<0.05),健胃消食片组幼龄
          3 结果                                               大鼠血清 GAS 水平升高但差异无统计学意义(P>
          3.1 化橘红提取物对幼龄大鼠体质量和摄食量的影响                          0.05);化橘红提取物高剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠
              开始给药(第0天)前,与对照组相比,模型组幼龄大                       血清MTL水平均显著升高(P<0.05);化橘红提取物低、
          鼠的摄食量降低约 50%(P<0.05)、体质量降低 19%                     中、高剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠血清GIP水平均
         (P<0.05),表明厌食症造模成功。与模型组相比,给药                        显著降低(P<0.05)。结果见图3。
          第7天时,化橘红提取物中剂量组幼龄大鼠体质量显著                           3.4 化橘红提取物对幼龄大鼠胃组织病理学改变的影响
          增加(P<0.05);给药第 14 天时,化橘红提取物中剂量                         与对照组比较,模型组幼龄大鼠出现明显胃黏膜充

          组、健胃消食片组幼龄大鼠体质量均显著增加(P<                            血,上皮细胞松解脱落现象;与模型组比较,化橘红提取
          0.05)。与模型组相比,给药第7、14天时,化橘红提取物                      物中、高剂量组和健胃消食片组幼龄大鼠胃表层上皮细
          高剂量组、健胃消食片组摄食量均显著增加(P<0.05)。                       胞未见明显病理改变,偶见胃黏膜轻微充血。结果
          结果见图1。                                             见图4。


          中国药房  2022年第33卷第23期                                              China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 23    · 2933 ·
   122   123   124   125   126   127   128   129   130   131   132