Page 51 - 《中国药房》2022年21期
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法制成黄芩阴性对照溶液。参照 2020 年版《中国药典》                       出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃下加热至斑
                                     [9]
         （四部）通则 0502“薄层色谱法”试验，吸取上述 3 种溶                      点显色清晰，日光下检视。结果显示，供试品色谱中，在
          液 2～5 μL，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以甲苯-乙                       与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；阴性
          酸乙酯-甲醇-甲酸（10∶7∶3∶2，V/V/V/V）为展开剂，展开，                对照无干扰，详见图 6A。再置紫外光灯（365 nm）下检
          取出，晾干，喷以三氯化铁试液，在日光下检视。结果显                          视，结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的
          示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显                          位置上，显相同颜色的荧光斑点；阴性对照无干扰，详见
          相同颜色的斑点；阴性对照无干扰，详见图4。                              图6B。
          2.2.4  枇杷叶的TLC鉴别        取桔贝合剂20 mL，用乙醚             2.3  苦杏仁苷、黄芩苷、汉黄芩苷和甘草酸铵的含量
          振摇提取 2 次，每次 20 mL，弃去乙醚液，水层用水饱和                     测定
          的正丁醇溶液振摇萃取 2 次，每次 20 mL，合并正丁醇                      2.3.1  色谱条件      色谱柱为 Agient 5TC-C18 （4.6 mm×
          层，再用正丁醇饱和的氨试液洗涤 2 次，每次 20 mL，再                     250 mm，5 µm）；以甲醇（A）-0.1% 磷酸溶液（B）为流动
          将正丁醇层蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品                         相 进 行 梯 度 洗 脱（0～90 min，25%A→77%A；90～95
          溶液。取枇杷叶对照药材 1 g，加水 50 mL，煎煮 1 h，滤                  min，77%A）；检测波长按时间切换（0～20 min，210 nm；
          过，滤液浓缩至20 mL，同法制成对照药材溶液。取缺枇                        20～95 min，252 nm）；流速为1.0 mL/min；柱温为30 ℃；
          杷叶的其他药材按桔贝合剂处方工艺制备阴性样品，再                           进样量为10 μL。
          按本项下供试品溶液制备方法制成枇杷叶阴性对照溶                            2.3.2  溶液的制备 （1）混合对照品溶液：分别精密称
          液。参照 2020 年版《中国药典》（四部）通则 0502“薄层                   取苦杏仁苷、黄芩苷、汉黄芩苷和甘草酸铵对照品适量，
                 [9]
          色谱法”试验，吸取上述 3 种溶液各 5 μL，分别点于同                      加甲醇制成每 1 mL 含上述成分分别为 60、200、60、40
          一自制硅胶 G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2，                    μg的混合对照品溶液。（2）供试品溶液：精密量取桔贝合
          V/V/V）在10 ℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取                      剂 2 mL，置 50 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤
          出，晾干，喷以 5% 香草醛硫酸溶液，在 105 ℃下加热至                     过，即得。（3）阴性对照溶液：分别取缺苦杏仁、黄芩、甘
          斑点显色清晰，日光下检视。结果显示，供试品色谱中，                          草的其他药材，按桔贝合剂处方工艺分别制备缺苦杏
          在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；阴                           仁、黄芩、甘草的阴性样品，再按本项下供试品溶液的制
          性对照无干扰，详见图5。                                       备方法制成缺苦杏仁、黄芩、甘草的阴性对照溶液。
          2.2.5  甘草的TLC鉴别       取桔贝合剂10 mL，用乙酸乙              2.3.3  系统适用性试验        分别精密吸取“2.3.2”项下的3
          酯振摇提取 3 次，每次 20 mL，乙酸乙酯层蒸干，残渣加                     种溶液，按“2.3.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。
          甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取甘草对照药材1                         结果显示，色谱峰基线平稳，苦杏仁苷、黄芩苷、汉黄芩
          g，加水 50 mL，煎煮 1 h，滤过，滤液浓缩至约 10 mL，同                苷和甘草酸铵色谱峰与其余成分峰相互无干扰，相邻色
          法制成对照药材溶液。取缺甘草的其他药材按桔贝合                            谱峰之间的分离度均大于 1.5，理论板数按黄芩苷峰计
          剂处方工艺制备阴性样品，再按本项下供试品溶液制成                           算不低于4 000。结果见图7。
          甘草阴性对照溶液。参照2020年版《中国药典》（四部）                        2.3.4  线性关系考察       分别精密称取苦杏仁苷、汉黄芩
                               [9]
          通则 0502“薄层色谱法”试验，吸取上述 3 种溶液各 5                     苷、甘草酸铵对照品12.27、10.64、11.23 mg，分别置于50
          μL，分别点于同一自制硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲                         mL量瓶中；精密称取黄芩苷对照品9.95 mg，置10 mL量
          酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶1.5，V/V/V/V）为展开剂，展开，取               瓶中；分别用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得4种对
















                1  2  3  4  5           1  2  3  4  5             1  2  3  4  5            1  2  3  4  5
             1～3：供试品（批号分别为           1～3：供 试 品（批 号 分 别 为        1：阴性对照；2～4：供试品          1～3：供 试 品（批 号 分 别 为
          190301、23210241、19090030）； 190301、23210241、19090030）；4：浙  （批号分别为 190301、23210241、  190301、23210241、19090030）；4：枇
          4：桔梗对照药材；5：阴性对照         贝母对照药材；5：阴性对照             19090030）；5：黄芩对照药材       杷叶对照药材；5：阴性对照
          图2   桔梗的TLC鉴别图          图3   浙贝母的TLC鉴别图            图4 黄芩的TLC鉴别图            图5 枇杷叶的TLC鉴别图


          中国药房    2022年第33卷第21期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21  ·2605·
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