Page 28 - 《中国药房》2022年21期

文献[25]报道的基本一致，故鉴定化合物 10 为 2-（4-hy‐ J＝8.0 Hz，H-5），6.24/6.23（1H，d，J＝16.0 Hz，H-8），5.08
droxyphenyl）ethanol-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-β- （1H，d，J＝2.4 Hz，H-1″），4.52/4.92（各 0.5H，d，J＝8.0
D-glucopyranoside。
化合物11为淡黄色无定形固体，ESI-MS m/z为493
[M+HCOO] ，分子式为 C19H28O12。 H-NMR（400 MHz，
1
－
CD3OD）δ：6.79（1H，d，J＝2.8 Hz，H-2），6.72（1H，d，J＝
8.8 Hz，H-5），6.58（1H，dd，J＝8.8、2.8 Hz，H-6），5.49
（1H，d，J＝1.6 Hz，H-1″），4.83（1H，d，J＝7.6 Hz，H-1′），
4.13（1H，d，J＝9.6 Hz，H-4″b），3.99（1H，d，J＝1.6 Hz，H-
2″），3.85（3H，s，3－OCH3 ），3.83（3H，s，4－OCH3 ），
3.37～3.93（m，糖质子 H），3.62（2H，s，H-5″）。 C-NMR
13
（100 MHz，CD3OD）δ：152.9（C-1），103.7（C-2），149.4
（C-3），143.0（C-4），116.2（C-5），109.9（C-6），56.9（4－
OCH3 ），56.5（3－OCH3 ），102.5（C-1′），78.9（C-2′），78.7
（C-3′），71.7（C-4′），78.2（C-5′），62.7（C-6′），110.9（C-
1″），78.1（C-2″），80.9（C-3″），75.6（C-4″），66.2（C-5″）。
以上数据与文献[26]报道的基本一致，故鉴定化合物11
为3，4-二甲氧基苯基-1-O-β-D-呋喃芹糖基-（1→2）-β-D-
葡萄糖苷。
化合物 12 为淡黄色糖浆状，ESI-MS m/z 为 331[M-
1
－
H] ，分子式为 C14H20O9。 H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：
6.13（2H，s，H-3，5），4.67（1H，d，J＝7.2 Hz，H-1ʹ），3.79
（6H，s，2，6－OCH3 ），3.73（1H，m，H-2ʹ），3.63（1H，m，H-
3ʹ），3.63（1H，m，H-3ʹ），3.33～3.43（4H，m，H-4ʹ，5ʹ，6ʹ）。
13
C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：129.7（C-1），154.9（C-2，
6），94.6（C-3，5），156.2（C-4），56.9（2，6－OCH3 ），106.3
（C-1ʹ），75.8（C-2ʹ），77.9（C-3ʹ），71.4（C-4ʹ），78.4（C-5ʹ）， 吸光度（OD），按下式计算细胞的增殖抑制率：细胞增殖
62.7（C-6ʹ）。以上数据与文献[27]报道的基本一致，故鉴
定化合物12为2，6-二甲氧基-4-羟苯基-1-O-β-D-吡喃葡
萄糖苷。
－
化合物 13 为白色粉末，ESI-MS m/z 为 266[M-H] ，
1
分子式为 C10H13N5O4。 H-NMR（400 MHz，DMSO-d6 ）δ：
8.33（1H，s，H-2），8.15（1H，s，H-8），7.24（2H，s，－NH2 ），
5.89（1H，d，J＝6.0 Hz，H-1ʹ），5.33（2H，m，2ʹ，5ʹ-OH），
5.09（1H，d，J＝4.0 Hz，3ʹ-OH），4.62（1H，dd，J＝10.8、5.2
Hz，H-2ʹ），4.17（1H，m，H-3ʹ），3.98（1H，dd，J＝6.8、3.6
Hz，H-4ʹ），3.69（1H，dt，J＝12.0、3.6 Hz，H-5ʹa），3.58（1H，
13
m，H-5ʹb）。 C-NMR（100 MHz，DMSO-d6 ）δ：152.3（C-
2），149.1（C-4），119.3（C-5），156.1（C-6），139.8（C-8），
87.9（C-1ʹ），73.4（C-2ʹ），70.5（C-3ʹ），85.8（C-4ʹ），61.6（C- 性，其中化合物 2 抑制 MCF-7、A549 和 HepG2 细胞增殖
5ʹ）。以上数据与文献[28]报道的基本一致，故鉴定化合
物13为腺苷。
－
化合物 14 为白色固体，ESI-MS m/z 为 487[M-H] ，
1
分子式为 C21H28O13。 H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：7.55
（1H，d，J＝16.0 Hz，H-7），7.02/7.01（1H，d，J＝2.0 Hz，H-
2），6.90/6.91（1H，dd，J＝8.0、2.4 Hz，H-6），6.73（1H，d，
·2582· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21
Hz，H-1′），3.23～4.03（m，糖质子 H，H-2，3，5，6），1.05
13
（3H，d，J＝6.4 Hz，H-6″）。 C-NMR（100 MHz，CD3OD）
δ：127.7（C-1），115.3（C-2），146.9（C-3），149.8/149.9（C-
4），116.6（C-5），123.4（C-6），148.0/148.1（C-7），114.7/
114.9（C-8），168.5/168.4（C-9），94.1/98.2（C-1′），76.1/
77.4（C-2′），79.3/81.8（C-3′），70.7/70.8（C-4′），74.7（C-
5′），62.4/62.5（C-6′），103.1/103.2（C-1″），72.1/72.4（C-
2″），71.3（C-3″），73.8（C-4″），70.5（C-5″），18.6（C-6″）。
以上数据与文献[29]报道的基本一致，故鉴定化合物14
为肉苁蓉苷F。
2.4 海州常山茎化学成分的体外抗肿瘤活性研究
采用MTT法检测海州常山茎中分离所得化合物对
4 种人源肿瘤细胞（K562、MCF-7、A549 和 HepG2）的增
殖抑制作用。实验设置空白组、阳性对照组（以阿霉素
为阳性药物）和化合物 1～14 给药组。取对数生长期的
各细胞株，用培养基培养成密度为 4×10 个/mL 的细胞
4
悬液，按100 μL/孔加入96孔板中，在5%CO2、37 ℃条件
下培养24 h，然后加入相应药物[化合物1～14给药组的
浓度均为 0（空白）、2、4、8、16、32、64 μmol/L，阳性对照
组阿霉素的浓度为0（空白）、0.25、0.5、1、2、4、8 μmol/L，浓
度均依据细胞增殖抑制预实验结果设置]，每个浓度设3
个复孔。在培养箱内培养48 h后，每孔加20 μL MTT试
剂，继续培养 4 h；弃上层培养液，每孔加入 150 μL 二甲
基亚砜，振荡 10 min，在酶标仪 490 nm 波长下检测各孔
抑 制 率（%）＝（OD 值空白组 －OD 值给药组）/OD 值空白组 ×
100%。采用 Graphpad Prism 5.0 软件计算化合物 1～14
对 4 种肿瘤细胞的半数抑制浓度（half inhibit concentra‐
tion，IC50 ）。实验重复3次。结果见表1。
表1 化合物11～33对4种肿瘤细胞的IC50测定结果（x±
s，n＝3，µmol/L）
化合物 a K562细胞 MCF-7细胞 A549细胞 HepG2细胞
1 ＞100.00 43.18±3.23 ＞100.00 29.74±2.07
2 ＞100.00 25.00±0.44 22.34±1.37 12.50±0.45
3 28.41±3.15 ＞100.00 ＞100.00 31.35±1.22
阿霉素 5.56±0.19 0.45±0.02 4.37±0.28 0.24±0.00
a：化合物4～14未显示出细胞增殖抑制活性，故数据未展示
由表1所示，化合物1～3均表现出一定的抗肿瘤活
的活性最强，IC50分别为25.00、22.34、12.50 μmol/L；仅有
化合物 3 对 K562 细胞的增殖具有抑制活性，IC50 为
28.41 μmol/L；化合物 1 对 MCF-7 和 HepG2 细胞有一定
的增殖抑制活性，IC50分别为 43.18、29.74 μmol/L；其余
化合物（包括苯丙素类及所有苷类）对4种测试细胞株均
未显示出增殖抑制活性（IC50＞100.00 μmol/L）。
中国药房 2022年第33卷第21期