Page 33 - 《中国药房》2022年21期

7 6 表3 各组酿酒酵母细胞内ATP含量及MMP的测定结
吸光度值×稀释倍数 5 4 3 2 组别 果（x±s，n＝3） ATP/（nmoL/mg） MMP/Hz

367.30±18.90
863.32±23.59
人参-茯苓药对1∶4提取物组
0 1 空白对照组 153.41±15.78 a 165.98±10.08 a
0 8 16 24 32 40 48 56 64 72 80 88 96 b
时间/h 人参单药组 746.52±18.13 223.40±8.87
茯苓单药组 689.37±11.19 b 226.48±9.99
图1 酿酒酵母的生长曲线
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05
3.2 人参-茯苓药对最佳配伍比例和给药条件
1.2 1.2
3.2.1 最佳配伍比例 与空白对照组（0.46±0.02）比
较，人参-茯苓药对2∶1提取物组（0.58±0.06）和人参-茯 0.9 0.9
苓药对 1∶4 提取物组（0.78±0.03）的吸光度值均显著升 标准化频率/Hz 0.6 标准化频率/Hz 0.6
高（P＜0.05 或 P＜0.01），且后者的吸光度值更大，提示 0.3 0.3
酿酒酵母细胞的存活率更高。由此可知，人参、茯苓的
0 0
最佳配伍比例为1∶4。 －100 0 100 1 000 10 000 －100 0 100 1 000 10 000
3.2.2 最佳给药浓度 与空白对照组（5.36±0.12）比 强度 强度
A.空白对照组 B.人参-茯苓药对1∶4提取物组
较，人参-茯苓药对 1∶4 提取物 220 μg/mL 组（7.61±
0.13）和人参-茯苓药对1∶4提取物300 μg/mL组（6.52± 1.2 1.2
0.17）的吸光度值均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），且前 0.9 0.9
者的吸光度值更大（即酿酒酵母细胞的存活率更高）、给 0.6 0.6
药浓度更小。由此可知，人参-茯苓药对1∶4提取物的最 标准化频率/Hz 标准化频率/Hz
佳给药浓度为220 μg/mL。 0.3 0.3
3.2.3 最佳给药时间点 与空白对照组（8.22±0.24）比 0 0
－100 0 100 1 000 10 000 －100 0 100 1 000 10 000
较，第 28 h 组（10.55±0.08）和第 64 h 组（8.71±0.06）的 强度 强度
吸光度值均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），且前者吸光 C.人参单药组 D.茯苓单药组
图2 各组酿酒酵母细胞内MMP的荧光强度图
度值更大，提示酿酒酵母细胞的存活率更高。由此可
知，最佳给药时间点为第28 h。 3.5 酿酒酵母细胞内氧化应激与能量代谢相关基因
3.3 酿酒酵母细胞内抗氧化酶活性及MDA、ROS水平 mRNA表达水平的测定结果
与空白对照组比较，人参-茯苓药对1∶4提取物组酿 与空白对照组比较，人参-茯苓药对1∶4提取物组酿
酒酵母细胞内抗氧化酶 SOD、POD、CAT 活性均显著升 酒酵母细胞内 SOD1、ATP1、CDC19 mRNA 的表达水平
高（P＜0.01），MDA、ROS 水平均显著降低（P＜0.05 或 均显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01），CTT1、GSH1、MRS1
P＜0.01）；人参单药组酿酒酵母细胞内 POD、CAT 活性 mRNA 的表达水平均显著升高（P＜0.01）；人参单药组
显著升高（P＜0.05）；茯苓单药组酿酒酵母细胞内SOD、 和茯苓单药组酿酒酵母细胞内 SOD1（茯苓单药组除
POD、CAT活性均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。结果
外）、ATP1 mRNA 的表达水平均显著降低（P＜0.05 或
见表2。
P＜0.01）。结果见表4。
表2 各组酿酒酵母细胞内抗氧化酶活性及MDA、ROS
表4 各组酿酒酵母细胞内氧化应激与能量代谢相关基
水平的测定结果（x±s，n＝3）
因mRNA表达水平的测定结果（x±s，n＝3）
SOD/ POD/ CAT/ MDA/
组别 ROS 组别 SOD1mRNA CTT1mRNA GSH1mRNA ATP1mRNA MRS1mRNACDC19mRNA
（U/mg prot） （U/mg prot） （U/mg prot）（μmol/mg prot）
空白对照组 63.70±1.42 4.97±0.07 0.65±0.03 0.88±0.01 4 155.77±137.73 空白对照组 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 b
a
a
a
a
a
a
人参-茯苓药对1∶4提取物组 96.22±1.29 14.09±0.12 8.12±0.17 a 0.50±0.08 a 3 553.84±261.97 b 人参-茯苓药对1∶4提取物组 0.61±0.01 2.50±0.12 1.71±0.18 0.31±0.01 1.40±0.05 0.49±0.01
a
a
b
人参单药组 72.21±2.57 10.21±0.12 4.38±0.19 b 0.55±0.06 3 992.93±246.53 人参单药组 0.63±0.01 0.97±0.01 1.40±0.05 0.37±0.06 1.09±0.11 0.74±0.04
b
a
b
茯苓单药组 78.83±0.84 13.06±0.08 2.97±0.08 a 0.74±0.03 4 082.47±47.66 茯苓单药组 0.91±0.02 1.41±0.39 1.15±0.09 0.68±0.02 0.82±0.01 0.95±0.02
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05
3.4 酿酒酵母细胞内 ATP 含量及 MMP 水平的测定 4 讨论
结果 人参和茯苓均具有抗衰老作用，在古代许多方剂中
与空白对照组比较，人参-茯苓药对1∶4提取物组酿 均有应用，且人参-茯苓药对是抗衰老最常见的配伍。
酒酵母细胞内ATP含量及MMP均显著升高（P＜0.01）； 目前，大多数学者研究的是人参或茯苓中某种化学成分
人参单药组和茯苓单药组酿酒酵母细胞内 ATP 含量显 的抗衰老作用，如：人参总皂苷对果蝇有抗衰老作用；人
著升高（P＜0.05）。结果见表3、图2。 参皂苷 Rg1可在造血干/祖细胞连续移植中延缓细胞衰
中国药房 2022年第33卷第21期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 21 ·2587·