Page 20 - 《中国药房》2022年20期

表2 不同时间点了哥王提取物对斑马鱼急性毒性作用

的线性回归方程和LC50
时间点 线性回归方程 LC 50/（μg/mL）
24 h y＝－8.209+5.129x 39.850
48 h y＝－5.811+4.001x 28.300
72 h y＝－5.693+4.273x 21.490
3.3 了哥王提取物对斑马鱼肝脏毒性影响的测定结果
A.空白组 B.了哥王提取物低质量浓度组
3.3.1 肝脏表型 空白组斑马鱼肝脏表型正常，肝脏形
态完整、清晰，卵黄囊基本吸收完全，不存在肝脏变性。
与空白组比较，了哥王提取物低、中、高质量浓度组斑马
鱼的肝脏区域均有不同程度的透明度降低、形态膨大现
象，且有随药物暴露质量浓度增加而肝脏区域逐渐模糊的
趋势；当药物暴露质量浓度为51 μg/mL时，斑马鱼卵黄囊
吸收不完全，且部分鱼体肝脏轮廓模糊。结果见图1。 C.了哥王提取物中质量浓度组 D.了哥王提取物高质量浓度组
：肝脏区域
图2 不同质量浓度了哥王提取物对斑马鱼肝脏区域细
胞凋亡的影响（吖啶橙染色，×3.2）

A.空白组 B.了哥王提取物低质量浓度组

A.空白组 B.了哥王提取物高质量浓度组
：肝脏区域
图3 不同质量浓度了哥王提取物对斑马鱼肝脏脂质沉
积的影响（油红OO染色，×3.2）

C.了哥王提取物中质量浓度组 D.了哥王提取物高质量浓度组 表3 不同质量浓度了哥王提取物对斑马鱼肝组织中
：肝脏区域 ALT、AST、LDH 活性影响的测定结果（x±s，n＝
图1 不同质量浓度了哥王提取物对斑马鱼肝脏表型的 10）
影响（×3.2） 组别 ALT/（U/g prot） AST/（U/g prot） LDH/（U/g prot）
空白组 14.98±3.11 37.28±1.98 37.67±3.37
3.3.2 肝脏区域细胞凋亡情况 吖啶橙染色结果显示，
了哥王提取物低质量浓度组 32.51±5.45 a 55.41±3.78 a 48.40±2.47 a
空白组斑马鱼肝脏区域未出现黄绿色亮点，提示空白组 了哥王提取物中质量浓度组 36.17±4.73 a 66.17±4.68 a 52.31±3.86 a
斑马鱼肝脏基本无细胞凋亡；而了哥王提取物中、高质 了哥王提取物高质量浓度组 49.89±4.72 a 90.56±4.60 a 71.18±6.75 a
a：与空白组比较，P＜0.05
量浓度组斑马鱼的肝脏区域均可见致密透亮的黄绿色
4 讨论
亮点，且有药物暴露质量浓度越高、荧光强度越强的趋
了哥王作为一种民族药，具有较大的临床应用价
势。结果见图2。
值，但其毒性限制了该药的后续开发及利用。有研究表
3.3.3 肝脏脂质沉积 经油红O染液染色后，空白组斑
明，了哥王的不同提取物对正常大鼠具有明显的肝毒
马鱼肝脏区域橘红色较浅；而了哥王提取物高质量浓度
[10]
性，其中了哥王乙醇提取物的毒性作用较为明显 。斑
组斑马鱼肝脏区域的颜色明显加深，提示其肝脏存在脂
马鱼的每个发育时间段都有不同的生理生化指标，且易
质沉积。结果见图3（了哥王提取物低、中质量浓度组经 [16]
于体外观察，适用于药物毒性评价 。因此，本实验利用
油O染液染色后，与空白组比较无明显差异，故图略）。 斑马鱼模型，对了哥王提取物的毒性作用进行了初步
3.3.4 肝组织中ALT、AST、LDH活性 与空白组比较， 评价。
了哥王提取物低、中、高质量浓度组斑马鱼肝组织中 为探究了哥王提取物对斑马鱼胚胎发育的毒性作
ALT、AST、LDH活性均显著升高（P＜0.05），且有随药物 用，本研究以 6～8 hpf 斑马鱼胚胎为对象，记录了其 1
暴露质量浓度增加而增强的趋势。结果见表3。 min 内自主抽动次数、10 s 内心率及畸形、死亡发生情

·2446· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 20 中国药房 2022年第33卷第20期