Page 93 - 《中国药房》2022年18期

2.4.6 残留考察 取“2.2.3”项下伊马替尼及其代谢物 2.5.3 不同质量浓度伊马替尼及其代谢物与空白血浆
质量浓度分别为 5 000、2 500 ng/mL 的标准曲线血浆样 蛋白结合率的测定 取“2.2.3”项下质控血浆样品溶液
品溶液，按“2.3”项下方法预处理，配制定量上限血浆样 （伊马替尼低、中、高质量浓度分别为 120、750、4 000
本溶液；另取空白血浆50 μL，按“2.3”项下方法预处理， ng/mL，代谢物质量浓度分别为 60、375、2 000 ng/mL），
配制空白血浆样本；再按“2.1”项下色谱与质谱条件进样 按“2.5.2”项下方法检测蛋白结合率并进行统计学分析。
分析，考察残留效应，重复循环5次。结果显示，方法无
结果显示，中浓度伊马替尼及其代谢物的血浆蛋白结合
残留，不影响后续样本的测定。
率与低浓度比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；高浓度
2.5 平衡透析实验
伊马替尼及其代谢物的血浆蛋白结合率显著低于低、中
2.5.1 蛋白结合率检测样本的制备 取“2.2.1”项下伊
浓度（P＜0.01）。结果见表2。
马替尼对照品溶液及其代谢物溶液适量，用甲醇稀释，
表2 不同质量浓度伊马替尼及其代谢物与空白血浆的
得伊马替尼质量浓度分别为120、4 000 ng/mL，代谢物质
蛋白结合率测定结果（n＝3）
量浓度分别为60、2 000 ng/mL的蛋白结合率工作溶液。
待测成分 浓度/（ng/mL） 蛋白结合率（x±s）/%
同时将 ALB（200 g/L）用 PBS 稀释至 45.0 g/L；将 AGP 伊马替尼 120 98.6±0.4
（10.0 g/L）用 PBS 稀释至 0.100 g/L；将 GLB（50.0 g/L） 750 98.4±0.2
4 000 97.4±0.4 a
用PBS稀释至25.0 g/L。取上述不同质量浓度的蛋白溶
N-去甲基伊马替尼 60 98.4±0.4
液 50 µL 和不同质量浓度的蛋白结合率工作溶液 2.5 375 98.3±0.4
µL，置于1.5 mL塑料离心管中，混匀，制成3种不同蛋白 2 000 97.0±0.3 a
a：与伊马替尼及其代谢物低（120、60 ng/mL）、中（750、375 ng/mL）
结合率检测样本。
浓度比较，P＜0.01
2.5.2 不同蛋白溶液结合率的测定 在一次性平衡透
2.6 患者血浆中的蛋白结合率测定
析板的红色和白色孔中分别加入蛋白结合率检测样本
2.6.1 纳入与排除标准 本研究的纳入标准为：（1）经
或待测血浆样本 200 µL、PBS 350 µL，用密封带覆盖装
病理组织学证实为GIST；（2）接受肿瘤完整切除术且病
置，以 800 r/min 室温涡旋 2 h，分别从两孔中吸出样本，
理证实切缘阴性；（3）之前未服用过伊马替尼；（4）GIST
进行如下检测：取“2.5.1”项下蛋白结合率检测样本，按
切除术后风险分级为中高度复发风险；（5）美国东部肿
“2.3”项下方法处理，再按“2.1”项下色谱与质谱条件进
样分析，计算样本浓度和蛋白结合率：蛋白结合率＝（样 瘤协作组评分为 0～2，重要脏器功能正常；（6）年龄为
本浓度－PBS 浓度）/样本浓度×100%。测定 3 次，取平 18～75 岁；（7）所有患者均知情同意且签署了知情同意
均值。使用SPSS 26.0软件，采用t检验进行统计学分析 书。本研究的排除标准为：（1）活动性感染者；（2）妊娠期
（下同）。结果显示，与低浓度伊马替尼（120 ng/mL）及 或哺乳期妇女；（3）严重脏器功能不全或丙氨酸转氨酶/
其代谢物（60 ng/mL）比较，高浓度伊马替尼（4 000 天冬氨酸转氨酶超过正常值上限3倍者；（4）本研究开始
ng/mL）及其代谢物（2 000 ng/mL）与 AGP、GLB 的血浆 前4周或参加本研究的同时又参加了其他临床研究者。
蛋白结合率显著提高（P＜0.05），但与 ALB 的血浆蛋白 2.6.2 资料来源 本研究方案经南京医科大学第一附
结合率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结果见表1。 属医院医学伦理委员会审查批准，审查号为2013-SR-142。
表1 伊马替尼及其代谢物与不同蛋白的结合率测定结
选择该院 2014 年 12 月－2017 年 9 月收治的 GIST 患者
果（n＝3）
64例，其中男性33例、女性31例，平均年龄（54.3±11.8）
蛋白种类 待测成分 浓度/（ng/mL） 蛋白结合率（x±s）/%
ALB 伊马替尼 120 92.5±1.0 岁。所有患者均接受伊马替尼400 mg/d治疗至少4周。
4 000 91.7±0.4 2.6.3 患者血浆中蛋白结合率的测定 采集所有患者
N-去甲基伊马替尼 60 90.6±3.5
2 000 91.3±1.5 处于稳态时的谷浓度血浆样本，按“2.5.2”项下方法检测
AGP 伊马替尼 120 56.6±2.0 血浆蛋白结合率。结果显示，伊马替尼及其代谢物的平
4 000 62.6±2.6 a
N-去甲基伊马替尼 60 54.1±5.1 均血浆蛋白结合率分别为（99.0±0.3）%、（99.2±0.3）%。
2 000 63.7±1.3 a 使用SPSS 26.0软件，经Pearson相关性分析，结果显示，
GLB 伊马替尼 120 56.3±3.1
4 000 68.0±8.6 a 伊马替尼及其代谢物的总浓度越大，其游离浓度越大（r
N-去甲基伊马替尼 60 56.2±7.6 分别为0.800 4、0.682 0，P均小于0.05），血浆蛋白结合率
2 000 67.5±7.3 a
越低（r 分别为－0.298 5、－3.332 3，P 均小于 0.05）。结
a：与低浓度伊马替尼（120 ng/mL）及其代谢物（60 ng/mL）比较，
P＜0.05 果见图2。

中国药房 2022年第33卷第18期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 ·2259·