Page 58 - 《中国药房》2022年18期

TLR4 69kDa

MyD88 33kDa

p-NF-κBp65 65kDa

NF-κBp65 65kDa
A.空白组 B.模型组

GAPDH 36kDa
空白组 模型组 阳性组 SYF高剂量组 SYF低剂量组
图5 各组兔滑膜组织中TLR4、MyD88、NF-ккB p65、p-
NF-ккB p65蛋白表达电泳图
1.6
空白组
1.4 模型组
C.阳性组 D.SYF高剂量组
阳性组
1.2
SYF高剂量组
蛋白相对表达水平 1.0 a b b b b a b b
a
SYF低剂量组
0.8
0.6
0.4
0.2 b b
0
TLR4/GAPDH MyD88/GAPDH NF-κBp65/GAPDH p-NF-κBp65/GAPDH
E.SYF低剂量组 a：与空白组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05
：炎症细胞 图6 各组兔滑膜组织中 TLR4、MyD88、NF-ккB p65、
图3 各组兔滑膜组织HE染色图（×200） p-NF-ккB p65蛋白相对表达水平的检测结果（x±s，
空白组 n＝3）
9
模型组
8 a a 阳性组 2% 木瓜蛋白酶与 0.03 mol/L L-半胱氨酸）复制 KOA 模
SYF高剂量组
7
SYF低剂量组 型。木瓜蛋白酶是一类蛋白水解酶，可分解软骨基质中
m R N A 相对表达水平 5 b b b 骨在缺乏基质的保护后，易退变降解，降解后产生的软
6
的蛋白多糖，导致关节软骨缺乏弹性和抗压性；关节软
4
[16]
骨碎屑刺激滑膜而发生炎症反应 。此方法造模时间
3
a b 较快，剂量容易控制，不易损伤关节腔内稳定结构，操作
2 b b
b
b 简便且不易感染，能够较好模拟膝关节部位局部炎症、
1 b
滑膜组织破坏等一系列的病理变化。本实验结果表明，
0
TLR4 MyD88 NF-кBp65 兔右后肢膝关节注射木瓜蛋白酶混合液后，模型组兔右
a：与空白组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05 后肢膝关节均出现红肿，伴有关节活动功能障碍，右后
图4 各组兔滑膜组织中 TLR4、MyD88、NF-ккB p65 肢膝关节脂肪垫糜烂，关节液黄浊，滑膜前段水肿充血
mRNA相对表达水平的检测结果（x±s，n＝3） 带有炎性损伤；病理切片结果显示，滑膜细胞排列紊乱，
3.6 滑膜组织中 TLR4、MyD88、NF-ккB p65、p-NF-ккB 组织明显增厚，全层均有大量炎症细胞分布，而阳性组
p65蛋白相对表达水平的检测结果 和SYF高、低剂量组中相应症状均有显著缓解。
与空白组比较，模型组兔滑膜组织中TLR4、MyD88、 KOA是关节软骨组织发生退行性病变，继而导致软
[17]
p-NF-кB p65 蛋白相对表达水平均显著升高（P＜0.05）； 骨下骨硬化，关节周缘骨质增生、骨赘形成 。膝关节
与模型组比较，阳性组和 SYF 高剂量组兔滑膜组织中 滑膜炎症与KOA的发生发展密不可分——KOA发展过
TLR4、MyD88、p-NF-кB p65 蛋白相对表达水平及 SYF 程中，关节软骨降解物质可随关节液进入滑膜部位，刺
低剂量组兔滑膜组织中TLR4、p-NF-кB p65蛋白相对表 激滑膜产生免疫应答反应，滑膜组织中巨噬样滑膜细胞
达水平均显著降低（P＜0.05）。结果见图5、图6。 会分泌 TNF-α、IL-1β 等多种炎症因子，其中 IL-1β 可介
4 讨论 导前列腺素生成，诱导基质金属蛋白酶合成，促进软骨
[18]
KOA动物模型的常用造模方法有手术法 、关节制 凋亡 ；TNF-α同样可促进前列腺素生成，并可通过抑制
[11]
动法 [12―13] 、关节腔药物注射法 [14―15] 等。本实验通过多次 糖蛋白聚糖合成、产生胶原酶以及刺激成骨细胞、破骨
向兔右后肢膝关节腔注射0.5 mL木瓜蛋白酶混合液（含 细胞作用等方式破坏软骨组织生成 。因此，滑膜炎症
[19]

·2228· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 中国药房 2022年第33卷第18期