Page 61 - 《中国药房》2022年18期
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的咳嗽和气喘。固肾定喘丸收载于 2020 年版《中国药                        限公司；乙腈、甲醇均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
                                          [2]
                   [1]
          典》（一部） ，其质量标准及文献报道 仅对君药盐补骨                         2 方法与结果
          脂中补骨脂素进行了定量分析。对于所含化学成分复                            2.1 色谱条件
          杂、临床作用机制不清晰的中药复方制剂来说，检测指                               以 Agilent SB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱
          标过于单一，对体现中药制剂的整体质量、保证其产品                           柱，以乙腈（A）-0.2%冰醋酸溶液（B）为流动相进行梯度
          质量一致性存在一定的局限。                                      洗 脱（0～11 min，25%A；11～20 min，25%A→40%A；
              近 年 来 ，一 测 多 评（quantitative analysis of multi-  20～35 min，40%A→50%A；35～59 min，50%A→75%A；
          components by single marker，QAMS）法的定量分析越来          59～70 min，75%A→25%A）；柱温为 30 ℃；流速为 1.0
                                              [3]
          越多地应用于中成药复方制剂质量评价中 。化学模式                           mL/min；检测波长分别为 290 nm（0～20 min，检测肉桂
          识别分析可通过统计学或数学方法，挖掘复杂数据间存                           酸和桂皮醛） 、330 nm（20～35 min，检测大车前苷、毛
                                                                        [5―6]
          在的内在函数关系，现已广泛应用于中药多维信息的综                           蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和木通苯乙醇苷 B）                   [7―9] 和 246
                  [4]
          合分析中 。本实验参考中药质量标志物确认依据，选                           nm（35～70 min，检测补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂
          取纯度较高、质量稳定、价廉易得的补骨脂素为内参物，                          异黄酮和补骨脂二氢黄酮）           [10―11] ；进样量为10 µL。
          采用 QAMS 法对固肾定喘丸中君药盐补骨脂特征成分                         2.2 溶液的制备
          补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢                           2.2.1  混合对照品溶液         精密称取肉桂酸、桂皮醛、大
          黄酮，臣药肉桂药效成分肉桂酸和桂皮醛，佐药熟地黄                           车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B、补
          和车前子主要成分大车前苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖                           骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄
          苷和木通苯乙醇苷B共10个成分的含量进行检测，建立                          酮对照品适量，用甲醇溶解制成质量浓度分别为0.198、
          固肾定喘丸多指标成分一测多评法，同时利用化学模式                           0.472、0.296、2.130、0.414、0.136、1.408、0.960、0.572、
          识别分析方法对不同批次样品的检测结果进行评价，以                           0.538 mg/mL的混合对照品贮备液。将混合对照品贮备
          期完善并提高固肾定喘丸的质量控制手段，确保产品质                           液用甲醇稀释20倍制得混合对照品溶液（上述成分质量
          量稳定和临床疗效的一致性。                                      浓度分别为 9.9、23.6、14.8、106.5、20.7、6.8、70.4、48.0、
          1 材料                                               28.6、26.9 µg/mL）。
          1.1  主要仪器                                          2.2.2  供试品溶液 取固肾定喘丸适量，研细，取约3 g，
              本 研 究 所 用 主 要 仪 器 有 1200 型 高 效 液 相 色 谱         精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定
         （HPLC）仪（美国 Agilent 公司）、2695 型 HPLC 仪（美国             质量后，水浴回流提取60 min，放冷，用甲醇补足减失质
          Waters 公司）、MS105DU 型电子天平（瑞士 Mettler To‐            量，摇匀，经0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。
          ledo公司）、SB-5200DTDN型超声波清洗机（宁波新芝生                   2.2.3  阴性供试品溶液         取按固肾定喘丸标准处方和
          物科技有限公司）等。                                         制法制备的缺肉桂、缺盐补骨脂、缺熟地黄和车前子的3
          1.2  主要药品与试剂                                       种阴性供试品各适量，按“2.2.2”项下方法制得相应阴性
              固肾定喘丸（水蜜丸，国药准字 Z44020906）购自广                   供试品溶液。
          州 白 云 山 敬 修 堂 药 业 股 份 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为           2.3  方法学考察
          L02008、L03011、L03016、L04018、L06035、L06041、         2.3.1  专属性考察      取混合对照品溶液、供试品溶液和
          L08050、M04001、M12021、M12050、Y04007、Y10010、         阴性供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录
          T12001、F08027 和 H10028，编号依次为 S1～S15。肉桂             色谱图（图 1）。结果显示，供试品溶液中各待测成分与
          酸对照品（批号 110786-201604，纯度 98.8%）、桂皮醛对               相邻色谱峰分离良好（分离度均不小于 1.5），理论板数
          照品（批号 110710-202022，纯度 99.5%）、大车前苷对照               按各成分色谱峰计均不小于 5 500，阴性供试品对测定
          品（批号 111914-202105，纯度 96.0%）、毛蕊花糖苷对照               无干扰。
          品（批号 111530-201914，纯度 95.2%）、木通苯乙醇苷 B              2.3.2  线性关系考察         精密吸取混合对照品贮备液
          对照品（批号 111910-201604，纯度 98.2%）、补骨脂素对               0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mL，置于不同的20 mL量瓶中，
          照品（批号 110739-201918，纯度 99.6%）、异补骨脂素对               用甲醇稀释制得6个系列质量浓度的混合对照品溶液，
          照品（批号 110738-202016，纯度 99.4%）、新补骨脂异黄               按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以各待测
          酮对照品（批号520052-201401，纯度99.6%）和补骨脂二                 成分质量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线
          氢黄酮对照品（批号520053-201401，纯度99.4%）均购自                 性回归，结果见表1。
          中国食品药品检定研究院；异毛蕊花糖苷对照品（批号                           2.3.3  精密度试验       取供试品溶液（编号 S1），按“2.1”
          PRF9010243，纯度 97.0%）购自成都普瑞法科技开发有                   项下色谱条件连续进样6次，记录峰面积。结果显示，肉


          中国药房    2022年第33卷第18期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18  ·2231·
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