Page 56 - 《中国药房》2022年17期
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并未涉及其中挥发性成分的检测。鉴于清眩丸中挥发                             0.021、0.053、0.105、0.264 mg/mL，胡 薄 荷 酮 0.006、
        性成分的重要性，本研究拟建立气相色谱法测定清眩丸                            0.013、0.033、0.065、0.164 mg/mL，胡椒酮 0.006、0.012、
        中5种挥发性成分（薄荷酮、薄荷脑、胡薄荷酮、胡椒酮和                          0.031、0.062、0.156 mg/mL，藁 本 内 酯 0.053、0.107、
        藁本内酯）的含量，旨在更加全面地控制该药的质量。                            0.267、0.534、1.336 mg/mL。
        1 材料                                                2.2.3  清眩丸供试品溶液         取清眩丸（批号20210301），
        1.1 主要仪器                                            剪碎，取约12 g（相当于2丸），精密称定，置于500 mL烧
            Clarus 500 型 气 相 色 谱 仪 、火 焰 离 子 化 检 测 器         瓶中，加水200 mL；连接挥发油测定器，自上端加水至超
        （FID）、TotalChrom 色谱数据工作站均购自美国 Perkin-               过刻度并溢流入烧瓶时为止；再加入乙酸乙酯 4 mL，连
        Elmer 公司；SB-5200DT 型超声波清洗器购自宁波新芝                    接冷凝管，加热回流提取 4 h，放冷；由挥发油测定器上
        生物科技股份有限公司；挥发油测定器购自成都蜀牛科                            端小心吸取乙酸乙酯层，通过铺有少量无水硫酸钠的漏
        技有限公司；AE240 型十万分之一电子天平购自瑞士                          斗滤过，滤液置于 10 mL 量瓶中；再以乙酸乙酯分次洗
        Mettler Toledo 公司；气相色谱柱 DB-5 石英毛细管柱                 涤挥发油测定器和冷凝管，每次约2 mL，洗涤液通过同
        购自美国 Agilent公司。                                     一漏斗并入量瓶中；加乙酸乙酯定容，摇匀，即得清眩丸
        1.2 主要药品与试剂                                         供试品溶液。
                                                            2.2.4  缺薄荷、缺荆芥穗和缺川芎阴性对照溶液                   按处
            7批清眩丸样品分别购自山西华康药业股份有限公
                                                            方比例，分别制备缺薄荷、缺荆芥穗、缺川芎的阴性对照
        司（批号 20210301、20201101）、北京同仁堂制药有限公
                                                            样品药材粉末；取上述粉末适量，按处方比例加入蜂蜜
        司同仁堂制药厂（批号18013630、20010024、20010707）和
                                                            辅料，混匀；按“2.2.3”项下方法处理，即得缺薄荷、缺荆
        河南润弘本草制药有限公司（批号200702、201103），规格
                                                            芥穗和缺川芎阴性对照溶液。
        均为每丸重6 g。薄荷、荆芥穗、川芎、白芷和石膏饮片均
                                                            2.3  测定方法及系统适用性考察
        购自张仲景大药房郑州顺河路店，由笔者鉴定均为真
                                                                按“2.1”项下色谱条件，精密量取混合对照品溶液
        品；薄荷脑对照品（批号 110728-201707，纯度 99.80％）
                                                           （薄荷酮、薄荷脑、胡薄荷酮、胡椒酮、藁本内酯的质量浓
        购自中国食品药品检定研究院；薄荷酮对照品（批号
                                                            度依次为0.194、0.264、0.164、0.156、1.336 mg/mL）、清眩
        PS020152，纯 度 94.44％）、胡 薄 荷 酮 对 照 品（批 号
                                                            丸供试品溶液、缺薄荷阴性对照溶液、缺荆芥穗阴性对
        PS012550，纯度99.50％）、胡椒酮对照品（批号PS020565，
                                                            照溶液、缺川芎阴性对照溶液各 1 μL，依次注入气相色
        纯度 95.00％）、藁本内酯对照品（批号 PS011687，纯度
                                                            谱仪测定。结果显示，在该色谱条件下，各待测成分峰
        98.00％）均购自成都普思生物科技股份有限公司。其余
                                                            与相邻峰之间的分离度均大于1.5，5种待测成分的理论
        试剂均为分析纯。
                                                            板数均大于 10 000，色谱图见图 1。由图 1 所示，混合对
        2 方法与结果                                             照品溶液色谱图和清眩丸供试品溶液色谱图中均可见5
        2.1  色谱条件
                                                            种待测成分的色谱峰，而在3种缺味阴性对照溶液色谱
            色谱柱为 DB-5 石英毛细管柱（30 m×0.32 mm，                  图中，则分别缺失相应成分的色谱峰（薄荷酮除外），表
        0.25 μm）；载气为氮气（纯度 99.999％）；进样口温度为                   明其他成分对待测成分无干扰。
        200 ℃；分流进样，分流比为 10 ∶ 1，进样量为 1 μL；程序                 2.4  线性关系考察
        升温：初始温度为 100 ℃保持 2 min，然后以 5 ℃/min 升                    按“2.1”项下色谱条件，分别精密量取线性关系考察
        温至220 ℃并保持2 min；FID温度为250 ℃；氢气流速为                   用混合对照品溶液及混合对照品贮备液各 1 μL 进样测
        45 mL/min，空气流速为450 mL/min。                          定，以成分质量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）
        2.2  溶液的制备                                          进行线性回归，结果见表1。结果表明，5种成分在各自
        2.2.1  混合对照品贮备液          分别精密称取对照品薄荷                的质量浓度范围内均与其峰面积成良好的线性关系（r
        酮 9.70 mg、薄荷脑 13.18 mg、胡薄荷酮 8.17 mg、胡椒酮             均大于0.999 0）。
        7.80 mg、藁本内酯66.79 mg，置于同一25 mL量瓶中，加                 2.5 定量限和检测限测定
        乙酸乙酯使溶解并定容，摇匀，即得混合对照品贮备液，                               取线性关系考察用最低浓度的混合对照品溶液，逐
        其中薄荷酮、薄荷脑、胡薄荷酮、胡椒酮、藁本内酯的质                           级稀释并进样测定，以信噪比10 ∶ 1和3 ∶ 1时的质量浓度
        量浓度依次为0.388、0.527、0.327、0.312、2.672 mg/mL。          计为各待测成分的定量限和检测限。结果见表1。
        2.2.2  线性关系考察用混合对照品溶液                 分别精密量         2.6 精密度试验
        取上述混合对照品贮备液1、1、1、2、5 mL，分别置于50、                         取清眩丸（批号 20210301）供试品溶液，按“2.1”项
        25、10、10、10 mL量瓶中，加乙酸乙酯定容，摇匀，即得线                    下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果显示，
        性关系考察用混合对照品溶液。5 种混合对照品溶液                            薄荷酮、薄荷脑、胡薄荷酮、胡椒酮、藁本内酯色谱峰面
        中，各待测成分的质量浓度由低到高依次为：薄荷酮                             积的 RSD 依次为 1.21％、1.23％、0.77％、0.73％、1.16％
        0.008、0.016、0.039、0.078、0.194 mg/mL，薄荷脑 0.010、     （n＝6），表明方法精密度良好。


        ·2098 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 17                                 中国药房    2022年第33卷第17期
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