Page 46 - 《中国药房》2022年17期
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挥发油类、多酚类、黄酮类等多种化学成分 [3-4] ,同时具 硝酸铝、氢氧化钠(西陇科学股份有限公司,批号分别为
有抗炎镇痛、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性 [2,5] 。 211012、211001),福林酚(上海麦克林生化科技有限公
土壤、降雨、光照等对草果质量有着较大的影响,不同产 司,批号C12886448)等。
地、采收期的草果质量可能存在差异,而目前对草果质 表1 草果药材的样品信息
量的评价往往是单因素的,如定量分析草果中黄酮类成 编号 产地 采收期 编号 产地 采收期
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分 、酚酸类成分 、挥发油类成分 含量等。这些方法存 S1 云南红河 10月 S9 云南文山 9月
[6]
S2 云南红河 11月 S10 云南文山 10月
在一定的局限性,难以对草果整体质量进行评价。因 S3 云南红河 12月 S11 云南文山 11月
此,有必要建立一种多因素综合评价草果质量的方法。 S4 云南怒江 8月 S12 云南保山 7月
熵权TOPSIS法也称熵权-逼近理想解排序法,主要 S5 云南怒江 9月 S13 云南保山 9月
S6 云南怒江 10月 S14 云南德宏 9月
用于多指标综合评价。其在计算过程中先以熵权法客
S7 云南文山 6月 S15 云南德宏 11月
观确定各指标所占权重,将多个指标转化为单一指标 S8 云南文山 8月 S16 云南德宏 12月
后,依据各样品与理想解及负理想解的综合距离进行评 2 方法与结果
价,目前已被广泛用于多种中药材的质量评价 [9-10] 。本 2.1 草果总挥发油的含量测定
课题组前期建立了不同产地、采收期的草果挥发油气相 称取草果粉末(过三号筛)120 g,加入12倍量(mL/g)
色谱-串联质谱(GC-MS)指纹图谱,发现α-蒎烯、β-蒎烯、 水,浸泡 3 h;以水蒸气蒸馏法提取 4 h,静置 1 h,加入适
1,8-桉叶素、α-松油醇、香叶醇、反式橙花叔醇为草果挥 量无水硫酸钠,以 6 000 r/min 离心 10 min,即得淡黄色
发油中含量相对较高的成分,但未能综合评价草果的质 草果总挥发油。按2020版《中国药典》(四部)中挥发油
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量 。此外,草果多酚中的代表性成分原儿茶酸、香草 测定甲法测定总挥发油含量 。每批样品平行操作 2
[13]
酸具有较强的抗氧化、抗炎等多种药理作用,是草果质 次,取平均值。结果见表2。
量评价的重要指标 。故本研究采用气相色谱(GC)法 2.2 草果总黄酮、总多酚的含量测定
[12]
测定草果挥发油中α-蒎烯、β-蒎烯、1,8-桉叶素、α-松油 2.2.1 草果总黄酮、总多酚的提取及待测样品的制备
醇、香叶醇、反式橙花叔醇的含量,采用超高效液相色谱 参照文献[14]方法提取草果中的总黄酮、总多酚。称
(UPLC)法测定草果中原儿茶酸、香草酸的含量,并结合 取草果粉末(过三号筛)10 g,加入10倍量(mL/g)70%乙
总挥发油、总黄酮、总多酚的含量,使用熵权 TOPSIS 法 醇,于50 ℃下超声(功率100 W,频率37 kHz)45 min,再
建立综合评价模型来评价不同产地、采收期的草果质 于80 ℃水浴回流提取3次(每次1 h),过滤,取滤液。合
量,以期为草果质量控制提供参考。 并 3 次滤液,加入 70%乙醇稀释至 1 000 mL,以 6 000
1 材料 r/min离心10 min,取上清液即得待测样品。
1.1 主要仪器 2.2.2 草果总黄酮、总多酚的含量测定 参照文献[4]方
本 研 究 所 用 主 要 仪 器 有 Agilent 1290 Series 型 法,以芦丁为参照,采用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定草
UPLC 仪、Aglient 7820A 型 GC 仪(美国 Agilent 公司), 果中的总黄酮含量。精密称取芦丁对照品 5.22 mg,加
UV-1800 型紫外分光光度计[翱艺仪器(上海)有限公 入70%乙醇定容至25 mL,即得芦丁对照品溶液。分别
@
司],DHAUS 型分析天平[奥豪斯仪器(上海)有限公 吸取芦丁对照品溶液 0.6、1.2、1.5、1.8、2.4、3.0 mL,加入
司]等。 70%乙醇至3 mL,再加入5%亚硝酸钠溶液0.4 mL,摇匀,
1.2 主要药品与试剂 静置 6 min;加入 10%硝酸铝溶液 0.4 mL,摇匀,静置 6
草果药材均购自昆明市官渡区德阳远知药材经营 min;依次加入1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL、甲醇1.2 mL,
部(具体样品信息见表 1),经云南中医药大学中药学院 摇匀,放置 15 min,采用紫外分光光度计于 510 nm 波长
张洁副教授鉴定为姜科植物草果 A. tsao-ko Crevost et 处测定吸光度,并以芦丁质量浓度为横坐标(x)、吸光度
Lemaire 的干燥成熟果实。其他药品与试剂有原儿茶 为纵坐标(y)绘制标准曲线。结果显示,芦丁的线性方
酸、香草酸、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油醇、1,8-桉叶素、香 程为 y=10.428 7x+0.023 4(r=0.999 7),其在 13.92~
叶醇、没食子酸、芦丁对照品(中国食品药品检定研究院, 69.60 μg/mL 范围内线性关系良好。取“2.2.1”项下待测
批 号 分 别 为 110809-201906、110776-201503、110897- 样品,按芦丁对照品溶液的操作同法测定吸光度,再代
201803、111827-201202、111859-201804、110788-202108、 入上述线性方程中计算,即得草果中总黄酮的含量。每
111643-200602、110831-201906、100080-202012,纯度均 批样品平行操作2次,取平均值。结果见表2。
大于91.5%),反式橙花叔醇对照品(上海源叶生物技术 参照文献[4]方法,以没食子酸为参照,采用福林酚
有限公司,批号M27N11LB0158,纯度大于98%),无水乙 法测定草果中的总多酚含量。精密称取没食子酸对照
醇、甲醇、无水碳酸钠(天津市致远化学试剂有限公司, 品 4.08 mg,加入 70%乙醇定容至 25 mL,即得没食子酸
批号分别为20211001321、20210901308、20210901312), 对照品溶液。分别吸取没食子酸对照品溶液 0.1、0.2、
·2088 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 17 中国药房 2022年第33卷第17期