Page 70 - 《中国药房》2022年16期

2.3.3 稳定性试验 精密量取“2.1.2”项下供试品溶液 2.3.6 样品含量测定 精密量取 10 批次健脾益肺鼻炎
（编号 S1），分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按 方标准汤剂，按“2.1.2”项下方法制备 10 批供试品溶
“2.1.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显 液，再按“2.1.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并
示，升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素和5-O-甲基 按外标法计算样品含量。每个样品平行测定 3 次，
维斯阿米醇苷峰面积的 RSD 分别为 0.21％、1.34％、 取平均值。结果见表 5。
1.00％、0.18％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置 表5 4种成分的含量测定结果（n＝3，μg/mL）
24 h内稳定性良好。 批号 升麻素苷 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 升麻素 5-O-甲基维斯阿米醇苷
S1 12.12 3.86 3.81 11.19
2.3.4 重复性试验 精密量取“2.1.1”项下健脾益肺鼻
S2 15.73 4.88 3.80 14.81
炎方标准汤剂（编号S1），按“2.1.2”项下条件平行制备6 S3 18.24 6.40 3.54 11.17
份供试品溶液，再按“2.1.4”项下色谱条件进样测定，记 S4 18.34 5.65 4.05 11.60
S5 16.64 4.48 3.10 11.43
录峰面积，采用外标法计算样品含量。结果显示，升麻
S6 18.87 5.48 3.83 11.68
素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素和 5-O-甲基维斯阿 S7 15.69 3.99 3.92 11.76
米 醇 苷 含 量 的 RSD 分 别 为 0.17％ 、0.38％ 、0.36％ 、 S8 16.63 6.19 4.20 15.79
S9 15.49 4.63 3.82 13.47
0.13％（n＝6），表明方法重复性良好。 S10 17.14 4.08 4.27 11.50
2.3.5 加样回收率试验 取升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄 3 讨论
糖苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品各适量，分
3.1 色谱条件的选择
别加甲醇溶解并定容至10 mL，配制成质量浓度为 163、
本研究在建立特征图谱时，分别考察了 Agilent
107、103、120 μg/mL 的对照品溶液。精密量取健脾益
ZORBAX Eclipes Plus C18、YMC Hydrosphere C18、Kro-
肺鼻炎方标准汤剂（编号S5）1 mL，共6份，按质量比1∶1
masil C18 3 种色谱柱，结果发现 YMC Hydrosphere C18分
精密加入各对照品溶液，按“2.1.2”项下方法制备供试品
离效果最好，出峰多且峰形较佳。又分别考察了甲醇-
溶液，再按“2.1.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积
水、乙腈-水为流动相时的分离效果，结果发现，乙腈-水
并计算加样回收率。结果显示，4 种成分的平均加样回
为流动相时色谱峰分离效果较优。为改善峰形及基线，
收率分别为 105.98％、98.06％、96.38％、104.17％，RSD
分别考察了不同体积分数的磷酸溶液（0.02％、0.05％、
分别为 1.75％、3.87％、4.03％、1.27％，表明方法准确度
0.1％），结果表明，0.05％磷酸溶液可较好地改善峰形
良好，结果见表4。 和分离度，且色谱峰基线平稳。因此，选择乙腈-0.05％
表4 4种成分加样回收率试验结果（n＝6）
磷酸溶液作为流动相。又分别对不同流速（0.8、1.0、
已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收率/ 平均加样回收率/ RSD/ 1.2 mL/min）进行了考察，结果表明，在 1.0 mL/min 的流
待测成分
μg μg μg ％ ％ ％
升麻素苷 17.45 17.50 35.65 104.00 105.98 1.75 速下，色谱峰之间的分离度更优。本研究还考察了
17.45 17.50 36.03 106.17 200～400 nm 波长范围内的色谱峰效果，结果发现在
17.45 17.50 36.06 106.34 230 nm下，各峰之间分离度较好，吸收峰多且基线平稳，
17.45 17.50 35.58 103.60
17.45 17.50 36.28 107.60 故选择230 nm作为检测波长。
17.45 17.50 36.38 108.17 3.2 健脾益肺鼻炎方标准汤剂特征图谱的建立及定量
毛蕊异黄酮葡萄糖苷 4.75 4.80 9.26 93.96 98.06 3.87 指标的选择
4.75 4.80 9.73 103.75
4.75 4.80 9.35 95.83 中药复方标准汤剂为中医临床用药的主要形式，其
4.75 4.80 9.40 96.88 作为一种标准物质和标准体系，可保障临床药效和质量
4.75 4.80 9.63 101.67 [8－9]
4.75 4.80 9.37 96.25 的一致性 。本研究收集了临床在用的 10 批处方饮
升麻素 2.86 2.90 5.71 98.28 96.38 4.03 片，以复方标准水煎液为模式标准，建立了化学特征图
2.86 2.90 5.49 90.69 谱和对照标准色谱图，共确定了24个共有特征峰，相似
2.86 2.90 5.55 92.76
2.86 2.90 5.66 96.55 度均大于0.960。通过与对照品比对，共指认出8个色谱
2.86 2.90 5.75 99.66 峰。化学计量法 CA、PCA 和 OPLS-DA 评价结果显示，
2.86 2.90 5.77 100.34
5-O-甲基维斯阿米醇苷 11.79 11.80 23.93 102.88 104.17 1.27 10批样品可分为3类，S1、S2和S10聚为一类，S3～S7聚
11.79 11.80 24.10 104.32 为一类，S8、S9聚为一类；VIP值＞1.5的色谱峰主要有3
11.79 11.80 24.06 103.98 个，依次为升麻素苷（2号峰）、毛蕊异黄酮葡萄糖苷（4号
11.79 11.80 23.96 103.14
11.79 11.80 24.07 104.07 峰）、5-O-甲基维斯阿米醇苷（6号峰），推测以上3个成分
11.79 11.80 24.37 106.61 可能是影响样品质量差异的主要化学成分。

·1984 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16 中国药房 2022年第33卷第16期