Page 74 - 《中国药房》2022年16期

室温孵育 2 h，用 TBST 缓冲液冲洗 3 次，显影成像。使
用Image J v1.8.0软件分析条带的灰度值，按下式计算目
的蛋白的表达水平：目的蛋白表达水平＝目的蛋白的灰
度值/GAPDH蛋白的灰度值。实验重复3次。
2.6 统计学方法
使用 SPSS 25.0 软件进行统计分析，数据以 x±s 表

示。采用单因素方差分析多组间数据差异，采用SNK-q
检验分析组间两两差异。检验水准α＝0.05。
A.正常对照组 B. Irb低浓度组
3 结果
3.1 Irb对细胞增殖活力的影响
与0 mmol/L比较，Irb浓度为1×10 、1×10 －4 mmol/L
－5
时细胞增殖活力无明显变化（P＞0.05），Irb 浓度为 1×
－3
10 、1×10 、1×10 －1 mmol/L 时细胞增殖活力显著降低
－2
（P＜0.05）。后续试验选择 1×10 －1 mmol/L 为 Irb 高浓度
（OD值为0.66±0.02），1×10 －3 mmol/L为Irb低浓度（OD
值为0.78±0.05）。
C. Irb高浓度组 D. 5-FU组
3.2 Irb 联合 5-FU 对细胞增殖活力和细胞集落形成数
的影响
与正常对照组比较，其余 5 组细胞增殖活力和细胞
集落形成数均显著降低/减少（P＜0.05）。与Irb低、高浓
度组比较，5-FU 组、Irb 低浓度+5-FU 组和 Irb 高浓度+
5-FU组细胞增殖活力和细胞集落形成数均显著降低/减
少（P＜0.05）。与5-FU组比较，Irb低浓度+5-FU组和Irb
高浓度+5-FU组细胞增殖活力和细胞集落形成数均显著
E. Irb低浓度+5-FU组 F. Irb高浓度+5-FU组
降低/减少（P＜0.05）。结果见表1、图1。 图1 Irb联合5-FU对细胞集落形成数的影响
表1 Irb联合5-FU对细胞增殖活力和细胞集落形成数
Irb低浓度+5-FU组和Irb高浓度+5-FU组细胞中PCNA、
的影响（x±±s，n＝3）
p-ERK1/2、PPARγ蛋白表达水平均显著降低，p53蛋白表
组别 OD值 细胞集落形成数
正常对照组 0.96±0.09 387.12±15.26 达水平均显著升高（P＜0.05）。各组细胞中 ERK1/2 蛋
Irb低浓度组 0.80±0.06 a 315.27±21.03 a 白表达水平无明显差异（P＞0.05）。结果见图2、表2。
Irb高浓度组 0.67±0.04 a 244.98±11.23 a
5-FU组 0.56±0.04 abc 182.36±8.26 abc
PCNA 36 kDa
Irb低浓度+5-FU组 0.43±0.02 abcd 141.25±12.02 abcd
Irb高浓度+5-FU组 0.26±0.01 abcd 97.25±9.15 abcd
F 224.088 589.629 p53 53 kDa
P ＜0.05 ＜0.05
44 kDa
p-ERK1/2
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与 Irb 低浓度组比较，P＜0.05； 42 kDa
c：与Irb高浓度组比较，P＜0.05；d：与5-FU组比较，P＜0.05
ERK1/2 44 kDa
42 kDa
3.3 Irb 联 合 5-FU 对 细 胞 中 PCNA、p53、ERK1/2、
p-ERK1/2、PPARγ蛋白表达的影响 PPARγ 54 kDa
与 正 常 对 照 组 比 较 ，其 余 5 组 细 胞 中 PCNA、
GAPDH 37 kDa
p-ERK1/2、PPARγ蛋白表达水平均显著降低，p53蛋白表
A B C D E F
达水平均显著升高（P＜0.05）。与Irb低、高浓度组比较，
A：正常对照组；B：Irb 低浓度组；C：Irb 高浓度组；D：5-FU 组；
5-FU组、Irb低浓度+5-FU组和Irb高浓度+5-FU组细胞中 E：Irb低浓度+5-FU组；F：Irb高浓度+5-FU组
PCNA、p-ERK1/2、PPARγ蛋白表达水平均显著降低，p53 图 2 各 组 细 胞 中 PCNA、p53、ERK1/2、p-ERK1/2、
蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。与 5-FU 组比较， PPARγ蛋白表达的电泳图

·1988 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16 中国药房 2022年第33卷第16期