Page 66 - 《中国药房》2022年14期

离体大鼠肝脏灌流法制备氯吡格雷活性巯基代谢物 Δ

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刘 艺 ，陶 婷，刘 云，李艳丽，胡盼盼，姜艳娇，孙增先（徐州医科大学附属连云港医院/连云港市第一人民
＊
医院药学部，江苏 连云港 222002）

中图分类号 R914；R969.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）14-1724-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.14.11

摘 要 目的 建立氯吡格雷活性巯基代谢物（CATM）的制备方法，为顺式CATM的合成提供参考。方法 以（S）-2-氧氯吡格雷为
底物，采用离体大鼠肝脏灌流法和ChromCore 120 C18制备柱制备并分离纯化CATM。采用质谱和核磁共振氢谱鉴定目标产物，对
比人体内活性构型（顺式CATM）保留时间确认目标产物中活性构型的占比。结果 目标产物的转化率为11.71％，质谱和核磁共振
氢谱鉴定目标产物为CATM。CATM的峰2～峰5为4个立体异构体，保留时间分别为21.3、22.3、26.5、27.3 min，峰面积占比分别
为7.13％、7.23％、63.52％、14.97％。根据人体内CATM活性构型的保留时间为26.3 min，确定目标产物CATM中活性顺式异构体
占比为63.52％。结论 本方法成本低、步骤简单，可制备出活性构型占比较高的CATM。
关键词 离体大鼠肝脏灌流；氯吡格雷；活性巯基代谢物；制备；纯化；（S）-2-氧氯吡格雷

Preparation of active thiol metabolite of clopidogrel by isolated rat liver perfusion
LIU Yi，TAO Ting，LIU Yun，LI Yanli，HU Panpan，JIANG Yanjiao，SUN Zengxian（Dept. of Pharmacy，
Lianyungang Hospital Affiliated of Xuzhou Medical University/The First People’s Hospital of Lianyungang，
Jiangsu Lianyungang 222002，China）

ABSTRACT OBJECTIVE To establish the preparation method of clopidogrel active thiol metabolite（CATM），and to provide
reference for the synthesis of cis-CATM. METHODS CATM was prepared，separated and purified with isolated rat liver perfusion
and ChromCore 120 C18 preparative column，using（S）-2-oxo-clopidogrel as substrate. The target compounds were identified by
mass spectrometry and nuclear magnetic resonance spectroscopy. The retention time of the active configuration of CATM in the
human body（cis-CATM）were compared to confirm the proportion of active configuration in the target product. RESULTS The
conversion rate of the target product was 11.71％. The target products were identified as CATM by MS and H-NMR. Peak 2-peak
1
5 of CATM were four stereoisomers. The retention time of them were 21.3，22.3，26.5，27.3 min. The peak area ratios of them
were 7.13％，7.23％，63.52％，14.97％，respectively. Based on that retention time of the active configuration of CATM in human
body was 26.3 min，the active cis-stereoisomer in the target product CATM accounted for 63.52％. CONCLUSIONS This method
is low-cost，simple，and can prepare CATM with higher active configuration.
KEYWORDS isolated rat liver perfusion；clopidogrel；active thiol metabolite；preparation；purification；（S）-2-oxo-clopidogrel

氯吡格雷活性巯基代谢物（clopidogrel active thiol 要对 C3—C16 双键构型和 C4 位手性构型进行选择，步
[3]
metabolite，CATM，化学结构式见图 1）是氯吡格雷发挥 骤复杂 ；生物酶肝微粒体催化法具有较高的生物选择
抗血小板疗效的最终活性物质 。CATM 化学结构复 性和转化效率，但肝微粒体成本高，酶催化反应条件严
[1]
杂，C3—C16 双键和 C4 位手性结构使其具有 4 种构型， 苛，同时因底物量受限难以得到足够的目标代谢产
[2]
分别为H1（7S，3E，4S）、H2（7S，3E，4R）、H3（7S，3Z，4S）、 物 。已有研究显示，离体大鼠肝脏灌流法被广泛用于
H4（7S，3Z，4R），其中 H1 和 H2 为反式 CATM、H3 和 H4 大鼠肝脏的生理、病理生理、肝损伤及药物代谢研究，兼
为顺式 CATM 。已有研究表明，人体内 CATM 的构型 具体外实验和整体动物实验的优点 [4－6] 。本实验拟采用
[1]
为顺式构型 。目前市面上仅有反式CATM异构体H1、 （S）-2-氧氯吡格雷为底物，采用离体大鼠肝脏灌流法通
[2]
H2的标准品，使CATM的体内研究受限。 过代谢途径制备CATM，旨在为顺式CATM的合成提供
对CATM进行合成的现有技术中，常用的方法有化 参考。
学合成法和生物酶肝微粒体催化法，其中化学合成法需 O O
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Δ 基金项目 江苏省科技基础设施建设计划项目（No.BM2018545） 3
HOOC N
＊第一作者 硕士研究生。研究方向：临床药代动力学。电话：
0518-85767492。E-mail：liuyipharm@163.com
# 通信作者 主任药师，硕士生导师，博士。研究方向：临床药学。 HS 4 Cl
电话：0518-85767492。E-mail：sunzx715@163.com 图1 CATM化学结构式

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