Page 63 - 《中国药房》2022年14期

Ⅰ、17号峰为西红花苷Ⅱ。因6号峰响应最强，且该峰对 表3 DAAME等成分的回归方程与线性范围
应的成分栀子苷为2020年版《中国药典》（一部）中栀子的 待测成分 回归方程 R 2 线性范围/（μg/mL）
指标性成分，故以其为参照峰。 DAAME Y＝9.980X－1.379 0.999 2 3.67～73.30
栀子苷 Y＝14.341X－22.556 0.999 6 30.54～610.80
400 600
350 500 苦番红花素 Y＝10.004X+0.169 0.999 5 2.23～44.60
300 6 芦丁 Y＝11.426X－1.057 0.999 5 2.09～41.70
250 6 400 西红花苷Ⅰ Y＝45.888X－20.109 0.999 9 1.49～148.90
mAU 200 mAU 300
150 西红花苷Ⅱ Y＝68.708X－9.754 0.999 9 0.20～20.03
200 15
100 2.5.3 精密度试验 取“2.3”项下供试品溶液（编号
50 2 15 100
0 9 11 17 0 2 9 11 17 S1），按“2.1”项下色谱条件进样测定 6 次，记录峰面积。
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60
t/min t/min 结果显示，DAAME、栀子苷、苦番红花素、芦丁、西红花苷
A.混合对照品溶液 B.供试品溶液（编号S1） Ⅰ、西红花苷Ⅱ峰面积的 RSD 分别为 2.85％、0.56％、
400 0.98％、2.29％、0.20％、0.82％（n＝6），表明方法精密度
350
300 良好。
250
mAU 200 2.5.4 稳定性试验 取“2.3”项下供试品溶液（编号
150 S1），分别于室温下放置0、2、4、6、8、10 h时按“2.1”项下
100
50 色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，DAAME、
0 栀子苷、苦番红花素、芦丁、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ峰
0 10 20 30 40 50 60
t/min 面 积 的 RSD 分 别 为 0.95％ 、0.46％ 、2.29％ 、2.30％ 、
C.空白溶剂
0.27％、1.03％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置
2：DAAME；6：栀子苷；9：苦番红花素；11：芦丁；15：西红花苷Ⅰ；
10 h内稳定性良好。
17：西红花苷Ⅱ
2.5.5 重复性试验 取样品（编号 S1），共 6 份，按“2.3”
图4 DAAME等成分的混合对照品溶液、供试品溶液、
项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样
空白溶剂的HPLC图
测定，记录峰面积并按外标法计算样品含量。结果显
2.4.6 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
示，DAAME、栀子苷、苦番红花素、芦丁、西红花苷Ⅰ、西
价系统（2012 版）》对 20 批栀子饮片及 10 批栀子配方颗
红花苷Ⅱ含量的 RSD 分别为 2.01％、0.90％、1.43％、
粒进行相似度评价。结果显示，30 批样品与对照图谱 1.28％、0.75％、0.85％（n＝6），表明方法重复性良好。
（R3）的相似度均不低于0.96，表明不同产地栀子饮片与 2.5.6 加样回收率试验 精密称取DAAME、栀子苷、苦
栀子配方颗粒间成分种类基本相同。结果见表2。 番红花素、芦丁、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ对照品适量，
表2 30批样品的相似度评价结果
加甲醇制成质量浓度分别为 146.60、2 036.00、892.00、
编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度 编号 相似度
S1 0.996 S7 0.986 S13 0.995 S19 0.984 PF5 0.965 834.00、297.80、40.05 μg/mL 的单一对照品溶液。精密
S2 0.999 S8 0.975 S14 0.997 S20 0.998 PF6 0.964 称取已知含量的样品（编号 S1）粉末约 0.1 g，共 9 份，分
S3 0.995 S9 0.988 S15 0.999 PF1 0.967 PF7 0.973 别按已知含量的 80％、100％、120％加入上述各单一对
S4 0.976 S10 0.991 S16 0.969 PF2 0.973 PF8 0.966 照品溶液，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”
S5 1.000 S11 0.998 S17 0.980 PF3 0.961 PF9 0.963
S6 0.985 S12 0.996 S18 0.994 PF4 0.960 PF10 0.963 项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收
2.5 含量测定 率。结果显示，DAAME、栀子苷、苦番红花素、芦丁、西红
2.5.1 系统适用性试验 “取2.2”项下混合对照溶液及 花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ的平均加样回收率分别为100.83％
“2.3”项供试品溶液（按“2.4.5”项下方法处理）、空白溶剂 （RSD＝1.43％，n＝9）、101.37％（RSD＝1.62％，n＝9）、
（70％甲醇），按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱 99.50％（RSD＝1.95％，n＝9）、98.21％（RSD＝1.35％，
图，详见图 4。由图 4 可知，各色谱峰的分离度良好，空 n＝9）、99.96％（RSD＝1.29％，n＝9）、100.27％（RSD＝
白溶剂对测定无干扰。 1.47％，n＝9），表明方法准确度良好。
2.5.2 线性关系考察 精密吸取“2.2”项下DAAME、栀 2.5.7 样品含量测定 取20批栀子饮片及10批栀子配
子苷、苦番红花素、芦丁混合对照品溶液 0.5、2、4、6、8、 方颗粒各适量，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，再按
10 mL，置于 10 mL 量瓶中，加 70％甲醇定容，得系列样 “2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法计
品溶液Ⅰ；精密吸取西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ混合对照 算样品含量。每样品平行测定3次，结果见表4（栀子配
品溶液 0.1、0.5、1、4、8、10 mL，置于 10 mL 量瓶中，加 方颗粒中6个成分含量已换算为饮片中含量）。
70％甲醇定容，得系列样品溶液Ⅱ。取上述各溶液适 2.6 主成分分析
量，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以各 以 30 批样品的 22 个共有峰峰面积为变量构建 30×
待测成分的质量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y） 22 数据矩阵，采用 SIMCA 16.0 软件进行主成分分析。
进行线性回归。结果见表3。 结果显示，20 批栀子饮片均分布于得分图的[t]1 正值象

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