Page 49 - 《中国药房》2022年14期
P. 49

香附为常用大宗中药材，为莎草科植物莎草Cyperus                     kg，除去杂质，火燎去毛须及节上毛状物，分别采用蒸、
        rotundus L.的干燥根茎，具有疏肝解郁、调经止痛的功                     煮、晒干等方法处理，每个方法处理3批样品。具体样品
                                          [1]
        效，临床常用于治疗肝郁气滞、痛经等症 ，有“气病之总                         处理信息见表1。
        司、女科之主帅”之称。查阅历代炮制古籍发现，不同历                                         表1 样品处理信息表
                                     [2]
        史时期香附的加工方法各不相同 ，现代产地加工多为                            编号      样品处理方法          编号      样品处理方法
        火燎后直接晒干、蒸制或煮制后晒干，广大学者对香附                            A5-1～A5-3  隔水蒸5 min后取出，晒干  B2-1～B2-3  4倍量水煮2 min后取出，晒干
                                                            A10-1～A10-3  隔水蒸10 min后取出，晒干  B4-1～B4-3  4倍量水煮4 min后取出，晒干
        的研究多集中于其醋制、酒制等炮制过程和炮制品的质
                                                            A15-1～A15-3  隔水蒸15 min后取出，晒干  B8-1～B8-3  4倍量水煮8 min后取出，晒干
        量评价   [3－5] ，而未对具体产地加工方法进行系统研究。                     A20-1～A20-3  隔水蒸20 min后取出，晒干  B12-1～B12-3  4倍量水煮12 min后取出，晒干
        2020 年版《中国药典》（一部）规定挥发油为香附药材的                        Z-1～Z-3  直接晒干
        质量评价指标，也有研究证实该类成分为香附的主要药                           2 方法与结果
                  [6]
        效活性成分 ，但在产地加工中所使用的蒸、煮等高温处                          2.1 香附HPLC指纹图谱的建立
        理方法势必影响香附的药效成分，其具体变化如何、对                           2.1.1  供试品溶液的制备          取香附药材粉末约0.5 g，精
        药材质量产生何种影响并未详细阐述。有学者利用高                            密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定
        效 液 相 色 谱（high performance liquid chromatography，  质量，超声（功率250 W，频率40 kHz，下同）处理30 min，
        HPLC）指纹图谱结合化学成分含量测定，评价了香附加                         放冷，称定质量，用甲醇补足减少的质量，摇匀，经0.22 μm
        工炮制过程中化学成分变化与道地药材的质量差异                      [7－9] ，  滤膜滤过，即得。
        较好阐释了药材炮制过程中品质变化及道地药材的优                            2.1.2  混合对照品溶液的制备             精密称取α-香附酮和
        选，这为香附产地加工研究提供了参考。本课题组前期                           香附烯酮对照品适量，置于 25 mL 量瓶中，加甲醇溶解
        产地调研发现，各地区对香附的产地加工手段不一（如                           并定容，得到上述2种成分质量浓度分别为0.277、0.278
        河南省对香附产地加工以直接晒干为主，其他省份在保                           mg/mL的混合对照品溶液。
        留晒干基础上，先将香附蒸、煮再于日光下晒干），加工                          2.1.3  色谱条件 以Venusil C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）
        工艺也不尽相同。同时根据本课题组前期预实验发现，                           为色谱柱，以甲醇（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱
        不同产地加工方法所得香附样品的化学成分存在明显                            （0～10 min，40％A→48％A；10～50 min，48％A→59％
        差异。基于此，本研究采用HPLC法建立香附的指纹图                          A；50～70 min，59％A；70～100 min，59％A→70％A；
        谱并进行化学计量学分析，同时采用 HPLC 法测定α-香                       100～110 min，70％A；110～120 min，70％A→80％A）；
        附酮、香附烯酮、木犀草素和阿魏酸的含量，多角度研究                          采用二极管阵列检测器，检测波长为 254 nm；柱温为
        产地加工方法对香附化学成分的影响，探讨香附适宜的                           30 ℃；进样量为20 µL；流速为1.0 mL/min。
        产地加工方法。                                            2.1.4  精密度试验       取样品（编号 A5-1），精密称定，按
        1 材料                                              “2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱
        1.1  主要仪器                                          条件连续进样测定6次，以香附烯酮为参照峰，计算各共
            本研究所用主要仪器有 ME204E 型万分之一分析                      有峰的相对峰面积和相对保留时间。结果显示，各共有
        天平、AB135-S 型十万分之一分析天平[梅特勒-托利多                      峰相对保留时间的RSD均小于2.00％（n＝6），相对峰面
        仪器（上海）有限公司]，HH-S6 型电子恒温水浴锅（巩                       积的RSD均小于3.00％（n＝6），表明仪器精密度良好。
        义市予华仪器有限责任公司），1260 型 HPLC 仪（美国                     2.1.5  重复性试验       取样品（编号 A5-1），精密称定，按
        Agilent公司），Milli-Q型超纯水处理系统[默克密理博实                 “2.1.1”项下方法平行制备 6 份供试品溶液，再按“2.1.3”
        验室设备（上海）有限公司]，KQ-700DB型数控超声波清                      项下色谱条件进样测定，以香附烯酮为参照峰，计算各
        洗器（昆山超声仪器有限公司），C21-RT2170 型电磁炉                     共有峰的相对峰面积和相对保留时间。结果显示，各共
       （美的集团股份有限公司）等。                                      有峰相对保留时间的RSD均小于2.00％（n＝6），相对峰
        1.2 主要药品与试剂                                        面积的 RSD 均小于 3.00％（n＝6），表明方法重复性
            α-香附酮对照品（批号MUST-19041104）、香附烯酮                 良好。
        对照品（批号 MUST-19103001）、阿魏酸对照品（批号                    2.1.6  稳定性试验       取样品（编号 A5-1），精密称定，按
        MUST-19032928）、木犀草素对照品（批号 DST191020-              “2.1.1”项下方法制备供试品溶液，分别在室温下放置0、
        032）均购于成都曼斯特生物科技有限公司，纯度均大于                         2、4、8、12、24 h 时按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，以
        98％；甲醇、磷酸为色谱纯，超纯水为实验室自制。                           香附烯酮为参照峰，计算各共有峰的相对峰面积和相对
            香附药材均于2019年10月采集于河南省开封市尉                       保留时间。结果显示，各共有峰相对保留时间的RSD均
        氏县，经河南中医药大学药学院陈随清教授鉴定为莎草                           小于 2.00％（n＝6），相对峰面积的 RSD 均小于 3.00％
        科植物莎草 C. rotundus L.的干燥根茎。取香附药材 5                  （n＝6），表明供试品溶液在室温下放置24 h内稳定。


        中国药房2022年第33卷第14期                                                China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 14  ·1707 ·
   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54