Page 51 - 《中国药房》2022年14期

6
15
4
10
2
5
0 0
CS t[2]
－2 －5
－10
－4
－15
－6
－20
－80 －60 －40 －20 0 20 40 60
－8 t[1]
Z-1 Z-2 Z-3 A5-1 A5-2 A5-3 A10-1 A10-2 A10-3 A15-1 A15-2 A15-3 A20-1 A20-2 A20-3 B2-1 B2-2 B2-3 B4-1 B4-2 B4-3 B8-1 B8-2 B8-3 B12-1 B12-2 B12-3 A. PLS-DA 得分图
2
编号 Q R 2
图4 主成分模型的CS图 0.5

型可靠；Q 拟合直线在Y轴截距小于0.05，说明所建模型 0
2
不存在过度拟合，可用于分析各样品间的差异 。 －0.5
[12]
R 2 或Q 2
PLS-DA得分图、模型验证图和变量重要性投影（variable
important projection，VIP）图见图 5。筛选 VIP 值＞1 的 －1.0
共有峰 ，找到对整体模型贡献率高于平均值的共有 －1.5
[13]
峰，分别为 20 号峰（α-香附酮）、16 号峰（香附烯酮）、22 －2.0
号峰、17 号峰和 21 号峰，提示对应的 5 种成分可能是影 －0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
相关系数
响香附质量的标志性差异成分。 B. PLS-DA模型验证图
2.3 香附中4种化学成分含量的测定
2.3.1 供试品溶液的制备 （1）测定α-香附酮与香附烯 2.5
酮供试品溶液的制备：同“2.1.1”项。（2）测定木犀草素供 2.0
试品溶液的制备：取香附药材粉末约3.0 g，精密称定，置
1.5
于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，超声 VIP值
处理 30 min，放冷，称定质量，用甲醇补足减失的质量， 1.0
摇匀，滤过，取35 mL续滤液水浴蒸干，加甲醇溶解并定 0.5
容至 5 mL，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，即得。（3）测定阿 0
魏酸供试品溶液的制备：取香附药材粉末约 2.0 g，精密 20 16 22 17 21 9 19 4 1 2 14 18 12 10 5 11 13 15 9 3 7 6
峰号
称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇40 mL，称 C. PLS-DA的VIP图
定质量，80 ℃水浴回流30 min，放冷，称定质量，用70％ 图5 PLS-DA结果图
甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取30 mL续滤液水浴 速为1.0 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为20 μL。（2）木犀
蒸干，加 70％甲醇溶解并定容至 5 mL，经 0.22 μm 微孔 草素的色谱条件：以Venusil C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）
滤膜滤过，即得。 为色谱柱，以甲醇-0.1％磷酸溶液（45 ∶ 55，V/V）为流动
2.3.2 对照品溶液的制备 （1）α-香附酮与香附烯酮的 相；检测波长为 345 nm；流速为 1.0 mL/min；柱温为
混合对照品溶液的制备：同“2.1.2”项。（2）木犀草素对照 25 ℃；进样量为20 μL。（3）阿魏酸的色谱条件：以Venusil
品溶液的制备：精密称取木犀草素对照品适量，置于 25 C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇-0.2％醋酸
mL量瓶中，加甲醇定容，得质量浓度为0.59 mg/mL的木 溶液（25∶75，V/V）为流动相；检测波长为320 nm；流速为
犀草素对照品溶液。（3）阿魏酸对照品溶液的制备：精密 1.0 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为20 μL。在上述各色
称取阿魏酸对照品适量，置于 25 mL 量瓶中，加 70％甲 谱条件下，各目标色谱峰的分离度均大于 1.5。结果见
醇定容，得质量浓度为 0.54 mg/mL 的阿魏酸对照品 图6。
溶液。 2.3.4 线性关系考察 （1）α-香附酮与香附烯酮标准曲
2.3.3 色谱条件 （1）α-香附酮与香附烯酮的色谱条 线的建立：分别精密吸取“2.3.2（1）”项下α-香附酮与香
件：以 Venusil C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，以 附烯酮的混合对照品溶液 2.0、1.5、1.0、0.5、0.1、0.006
甲醇-水（68 ∶ 32，V/V）为流动相；检测波长为 242 nm；流 mL，置于5 mL量瓶中，用甲醇定容，按“2.3.3（1）”项下色

中国药房2022年第33卷第14期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 14 ·1709 ·