Page 43 - 《中国药房》2022年12期

葡萄糖对照品溶液，按上述方法制备供试品溶液，再按
紫云英苷
“2.5.1”项下方法显色后于 490 nm 波长处测定吸光度并
100
计算加样回收率。结果显示，D-无水葡萄糖的平均加样
回收率为98.57％（RSD＝1.66％，n＝9）。 50
2.5.3 多糖含量测定 精密称取待测白子菜叶粉末0.5 mAU
g，按“2.5.2（2）”项下方法制备供试品溶液，再按“2.5.1”
－5
项下方法显色后于490 nm波长处测定吸光度并按标准 0 2 4 6 8 10 12 14 16
曲线法计算样品含量。每个样品平行测定3次。 t/min
A.对照品溶液
2.6 紫云英苷含量的测定
200
采用HPLC法测定白子菜叶中紫云英苷的含量。
2.6.1 色 谱 条 件 以 Diamonsil C18 （2）（4.6 mm × 250
mm，5 µm）为色谱柱，以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相进 mAU 100
行梯度洗脱（0～6.0 min，10％A→17％A；6.0～7.5 min， 紫云英苷
17％A→27％A；7.5～11.0 min，27％A→90％A；11.0～
15.0 min，90％A→17％A）；流速为 1.0 mL/min；检测波 －3
0 2 4 6 8 10 12 14 16
长为348 nm；柱温为35 ℃；进样量为10 μL。 t/min
2.6.2 溶液的制备 （1）精密称取紫云英苷对照品 5 B.供试品溶液（编号S1）
mg，置于5 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，精密移 75
取0.8 mL，用甲醇定容至10 mL，制成紫云英苷质量浓度
为 0.08 mg/mL 的对照品溶液。（2）取白子菜叶粉末 1.0 50
g，精密称定，置于锥形瓶中，加50％乙醇20 mL，称定质 mAU
25
量，超声提取 30 min，冷却至室温，再次称定质量，用
50％乙醇补足减失的质量，经 0.45 μm 滤膜滤过，取滤
－3
液，即得供试品溶液。（3）以50％乙醇为空白对照溶液。 0 5 10 15
2.6.3 系统适用性试验 精密吸取上述对照品溶液、供 t/min
C.空白对照溶液
试品溶液和空白对照溶液，按“2.6.1”项下色谱条件进样
图1 紫云英苷对照品、供试品、空白对照溶液的HPLC图
测定，记录色谱图，详见图 1。由图 1 可知，紫云英苷的
项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计
分离度大于1.5，理论板数按紫云英苷峰计均大于2 500，
算样品含量。结果显示，紫云英苷含量的RSD为3.60％
空白对照溶液对测定无干扰。
2.6.4 线性关系考察 精密吸取“2.6.2（1）”项下对照品 （n＝6），表明方法重复性良好。（4）精密称取白子菜叶
溶液 1、2、5、10、15、20 μL，按“2.6.1”项下色谱条件进样 （编号 S1）1.0 g，共 9 份，分别精密加入一定量的紫云英
测定，记录峰面积。以紫云英苷对照品的进样量为横坐 苷对照品溶液，按“2.6.2（2）”项下方法制备供试品溶液，
标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归，得紫云英苷 再按“2.6.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算
2
的回归方程为Y＝35.266X－0.087（R ＝0.999 8），表明紫 加样回收率。结果显示，紫云英苷的平均加样回收率为
云英苷检测进样量的线性范围为0.08～1.60 μg。 104.65％（RSD＝6.91％，n＝9）。
2.6.5 方法学考察 （1）精密吸取“2.6.2（1）”项下对照 2.6.6 紫云英苷含量测定 精密称取待测白子菜叶样
品溶液 10 μL，按“2.6.1”项下色谱条件连续进样测定 6 品粉末1.0 g，按“2.6.2（2）”项下方法制备供试品溶液，再
次，记录峰面积。结果显示，紫云英苷峰面积的 RSD 为 按“2.6.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准
0.59％（n＝6），表明仪器精密度良好。（2）精密吸取“2.6.2 曲线法计算样品含量。每个样品平行测定3次。
（2）”项下供试品溶液（编号 S1），分别于室温下放置 0、 2.7 综合评分的计算
2、4、6、8、12、24 h 时按“2.6.1”项下色谱条件进样测定， 采用层次分析法进行综合评价。本研究构建的两
记录峰面积。结果显示，紫云英苷峰面积的 RSD 为 两比较矩阵中，多糖、总黄酮、紫云英苷是发挥临床作用
1.76％（n＝7），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳 的物质基础，其重要性高于水溶性浸出物；多糖、黄酮类
定性良好。（3）精密称取白子菜叶（编号 S1）1.0 g，共 6 成分的抗氧化、抗炎、增强免疫等作用与白子菜具有的
份，按“2.6.2（2）”项下方法制备供试品溶液，再按“2.6.1” 清热凉血、活血止痛功效契合，且总黄酮的作用强于多

中国药房 2022年第33卷第12期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 12 ·1445 ·