Page 42 - 《中国药房》2022年12期
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2.3 水溶性浸出物的测定                                      （n＝6），表明方法重复性良好。（4）精密称取白子菜叶
            参考 2020 年版《中国药典》（四部）通则“2201 浸出                 （编号 S1）0.5 g，共 9 份，分别精密加入一定量的芦丁对
        物测定法”项下“热浸法”测定白子菜叶中的水溶性浸出                           照品溶液，按上述方法制备供试品溶液，再按“2.4.1”项
        物 ：取样品粉末（过 50 目筛）2 g，精密称定，置于 250                    下方法显色后于510 nm波长处测定吸光度并计算加样
          [13]
        mL锥形瓶中，加水50 mL，密塞，称定质量，静置1 h后，                      回收率，结果显示，芦丁的平均加样回收率为 103.60％
        连接冷凝回流管，加热至沸腾，并保持微沸 1 h 后放冷，                       （RSD＝2.56％，n＝9）。
        再次称定质量，用水补足减失的质量，摇匀，滤过，精密                           2.4.3  总黄酮含量测定         精密称取待测白子菜叶粉末
        量取滤液25 mL，置于干燥至恒定质量的蒸发皿中，水浴                         0.5 g，按“2.4.2（2）”项下方法制备供试品溶液，再按
        蒸干，于 105 ℃干燥 3 h 后，置于干燥器中冷却 30 min，                “2.4.1”项下方法显色后于 510 nm 波长处测定吸光度并
        迅速精密称定质量，并按下式计算水溶性浸出物含量                             按标准曲线法计算样品含量。每个样品平行测定3次。
        （％）：水溶性浸出物含量（％）＝[（m2－m0 ）×50]/（25×m1 ）×             2.5 多糖含量的测定
        100％（式中，m0为蒸发皿质量，m1为供试品质量，m2为干                          采用紫外-可见分光光度法测定白子菜叶中多糖
        燥后蒸发皿+供试品质量）。每个样品平行测定3次。                           （以D-无水葡萄糖计）的含量。
        2.4 总黄酮含量的测定                                        2.5.1  线性关系考察       精密称取 D-无水葡萄糖对照品
            采用紫外-可见分光光度法测定白子菜叶中总黄酮                          10 mg，加 80％乙醇，超声溶解并定容至 100 mL，摇匀，
        （以芦丁计）的含量。                                          即得 D-无水葡萄糖质量浓度为 0.1 mg/mL 的对照品溶

        2.4.1  线性关系考察        精密称取芦丁对照品 10 mg，加              液。分别吸取上述对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，
        80％乙醇，超声（功率300 W，频率 25 kHz，下同）溶解并                   置于10 mL试管中，加水至2 mL，加5％苯酚溶液1 mL，
        定容至10 mL，摇匀，即得芦丁质量浓度为1.0 mg/mL的                     摇匀，迅速精密加入浓硫酸 5 mL，摇匀，避光静置 15
        对照品溶液。分别吸取上述对照品溶液 0.2、0.4、0.6、                      min，取出。以水为空白对照，使用紫外-可见分光光度
                                                                                       [14]
        0.8、1.0、1.2 mL，置于25 mL量瓶中，加水至6 mL，加5％               计于 490 nm 波长处测定吸光度 。以 D-无水葡萄糖对
        亚硝酸钠溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加10％硝酸铝溶                      照品的质量浓度为横坐标（X）、吸光度为纵坐标（Y）进行
        液 1 mL，摇匀，静置 6 min，加 4％氢氧化钠溶液 10 mL，                线性回归，得 D-无水葡萄糖的回归方程为 Y＝11.458X+
                                                                   2
        以 80％乙醇定容，静置 15 min。以 80％乙醇为空白对                     0.003（R ＝0.999 6），表明 D-无水葡萄糖检测质量浓度
        照，使用紫外-可见分光光度计于 510 nm 波长处测定吸                       的线性范围为0.01～0.05 mg/mL。
            [14]
        光度 。以芦丁对照品的质量浓度为横坐标（X）、吸光度                          2.5.2  方法学考察 （1）取上述D-无水葡萄糖对照品溶
        为纵坐标（Y）进行线性回归，得芦丁的回归方程为 Y＝                          液0.4 mL，按“2.5.1”项下方法显色后于490 nm波长处连
        0.478 5X－0.008 5（R ＝0.999 9），表明芦丁检测质量浓              续测定吸光度6次。结果显示，D-无水葡萄糖吸光度的
                          2
        度的线性范围为0.008～0.048 mg/mL。                           RSD为0.02％（n＝6），表明仪器精密度良好。（2）取白子
        2.4.2  方法学考察 （1）取上述芦丁对照品溶液 0.5                      菜叶（编号 S1）粉末 0.5 g，置于锥形瓶中，加 80％乙醇
        mL，按“2.4.1”项下方法显色后于 510 nm 波长处连续测                   100 mL，加热回流 1 h，趁热滤过，滤渣和滤器经 80％乙
        定吸光度6次。结果显示，芦丁吸光度的RSD为0.02％                         醇 30 mL 分 3 次洗涤后移至烧瓶中，加水 150 mL，加热
        （n＝6），表明仪器精密度良好。（2）取白子菜叶（编号S1）                      回流 2 h，趁热滤过，用少量热水洗涤滤器，合并滤液及
        粉末 0.5 g，置于具塞锥形瓶中，加石油醚 150 mL，超声                    洗液，放冷，用水定容至250 mL，即得供试品溶液。取上
        30 min，滤过，挥干石油醚，残渣加80％乙醇45 mL，超声                    述供试品溶液 0.5 mL，置于具塞试管中，按“2.5.1”项下
        30 min，滤过，滤液用 80％乙醇定容至 50 mL，即得供试                   方法显色后，分别在室温下放置 0、10、20、30、40、50、60
        品溶液。取上述供试品溶液 5.0 mL，置于 25 mL 量瓶                     min时于490 nm波长处测定吸光度。结果显示，D-无水
        中，按“2.4.1”项下方法显色后，分别在室温下放置0、10、                     葡萄糖吸光度的RSD为2.98％（n＝7），表明供试品溶液
        20、30、40、50、60 min 时于 510 nm 波长处测定吸光度。              于室温下放置 60 min 内稳定性良好。（3）取上述供试品
        结果显示，芦丁吸光度的 RSD 为 2.41％（n＝7），表明供                    溶液（编号 S1）0.5 mL，共 6 份，按“2.5.1”项下方法显色
        试品溶液于室温下放置 60 min 内稳定性良好。（3）取上                      后于490 nm波长处测定吸光度并按标准曲线法计算样
        述供试品溶液（编号 S1）5.0 mL，共 6 份，按“2.4.1”项下                品含量。结果显示，D-无水葡萄糖含量的RSD为3.59％
        方法显色后于510 nm波长处测定吸光度并按标准曲线                         （n＝6），表明方法重复性良好。（4）精密称取白子菜叶
        法计算样品含量。结果显示，芦丁含量的RSD为2.83％                        （编号 S1）0.5 g，共 9 份，分别精密加入一定量的 D-无水


        ·1444 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 12                                 中国药房    2022年第33卷第12期
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