Page 88 - 《中国药房》2022年11期
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有抗抑郁活性，且作用效果与VEN类似 。欧洲精神病                           色谱柱为 Agilent TC-C18 （150 mm×4.6 mm，5 µm），保护
                                           [8]
        药理学会与神经精神药理学会发布的治疗药物监测指                             柱为 Agilent-C18 （12.5 mm×4.6 mm，5 µm）；流动相为甲
        南中推荐对VEN及ODV的血药浓度进行监测 。                             醇-乙腈-0.5％甲酸溶液（50 ∶ 45 ∶ 5，V/V/V）；流速为 800
                                                [9]
            长春西汀（vinpocetine，VIN）可抑制钙离子依赖性                  µL/min；柱温为40 ℃。（2）色谱条件二（检测AVA）：色谱
        磷酸二酯酶的活性，增加环磷酸腺苷的含量，松弛血管                            柱为 Agilent TC-C18 （150 mm×4.6 mm，5 µm），保护柱为
        平滑肌，增加脑灌注量，常用于治疗心血管疾病及抑郁                            Agilent-C18 （12.5 mm×4.6 mm，5 µm）；流动相为甲醇-乙
        症 。VIN体内吸收快速，约75％被迅速水解为活性代                          腈溶液（85∶15，V/V）；流速为800 µL/min；柱温为40 ℃。
          [10]
        谢物阿朴长春胺酸（apovincaminic acid，AVA），致使VIN              2.1.2  质谱条件     采用电喷雾离子源，正离子检测，多
        在血浆中的浓度较低。VIN 和 AVA 药理活性具有显著                        反应监测扫描；离子源温度为 450 ℃，离子源喷射电压
        的相关性，检测 AVA 即可反映 VIN 的药代动力学行                        为 5.5 kV；气帘气压力为 20 psi；喷雾气、辅助加热气压
        为 [11－12] ，因此本研究只测定AVA的血药浓度。                        力均为 70 psi；碰撞气体压力为 7 psi；VEN、ODV、AVA
            患者抑郁症发作时，进行 VEN 联合 VIN 治疗，可明                    及多潘立酮（内标）的去簇电压分别为 22、23、100、55
        显降低其汉密尔顿焦虑量表评分，且疗效较单用VEN明                           eV，碰撞能量分别为 30、34、33、37.2 eV；定量分析离子
        显提高   [13－14] 。VEN代谢过程中涉及多种CYP450同工酶，               对分别为 m/z 278.1→m/z 121.0（VEN）、m/z 264.1→m/z
        而VIN对其中CYP3A4、CYP2D6均有一定抑制作用，从                      107.0（ODV）、m/z 323.2→m/z 236.1（AVA）、m/z 426.1→
        而影响 VEN 的代谢       [15－16] 。基于此，本研究采用液相色             m/z 175.1（内标）。VEN、ODV、AVA 和多潘立酮的全扫
        谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中 VEN、                       描质谱图及化学结构见图 1。
        ODV、AVA 的浓度，进而研究 VIN 联用 VEN 的药代动                    2.2 标准溶液的配制
        力学，考察两者的相互作用，以期为两者合理用药提供                                精密称定VEN、ODV、AVA对照品各10 mg，分别置
        参考。                                                 于 100 mL 量瓶中，以甲醇溶解定容，即得 VEN、ODV、
        1 材料                                                AVA质量浓度均为100 µg/mL的储备液。取上述各成分
        1.1  主要仪器                                           储备液适量，分别用甲醇稀释成质量浓度均为5、10、50、
            本研究所用主要仪器有 1100 型高效液相色谱仪                        100、500、1 000、2 000、5 000 ng/mL的系列标准溶液。同
        （美国 Agilent 公司）、API2000 型三重四极杆质谱仪（美                 法制备VEN、ODV、AVA质量浓度均分别为10、100、4 000
        国ABSciex公司）、管式加热L-119A型氮吹仪[来亨科技                     ng/mL的质控（QC）工作溶液。
        （北京）有限公司]、DW-86W100 型卧式超低温保存箱                       2.3  标准血浆样品与QC样品的配制
        （青岛海尔特种电器有限公司）、BS 124S型电子天平[赛                           取 VEN、ODV、AVA 相同质量浓度的系列标准溶液
        多利斯科学仪器（北京）有限公司]、KQ-50B型超声波清                        各 50 µL 于同一 5 mL 离心管中，共 8 份，加入 500 µL 空
        洗器（昆山市超声仪器有限公司）、LG10-2.4A 型高速离                      白血浆，配制成VEN、ODV、AVA质量浓度均分别为0.5、
        心机（北京雷勃尔离心机有限公司）。                                   1、5、10、50、100、200、500 ng/mL 的标准血浆样品，备
        1.2  主要药品与试剂                                        用。另取 VEN、ODV、AVA 的 QC 工作溶液各 50 µL，加
            本研究所用主要药品与试剂有VIN对照品（广东健                         入 500 µL 空白血浆，涡旋 1 min，制备 VEN、ODV、AVA
        坤药业有限公司，含量100.2％，批号151221-41815003），                质量浓度均分别为1、10、400 ng/mL的QC样品，备用。
        VEN、ODV 对照品（上海麦克林生化科技有限公司，含                         2.4  血浆样品的预处理方法
        量均大于99.5％，批号分别为M00118009、C10034477），                2.4.1 VEN及ODV血浆样品的预处理              取100 µL大鼠
        AVA对照品（国家标准物质资源平台，含量99.5％，批号                        血浆，加入 200 ng/mL 内标溶液 10 µL，涡旋 1 min；加入
        101439-201901），多潘立酮对照品（信阳市中检计量生                     0.1 mol/L碳酸钠溶液100 μL，涡旋1 min，再加入甲基叔
        物科技有限公司，含量 99.8％，批号 100304-201103）；甲                丁基醚 3 mL，涡旋震荡 20 min；以 12 000 r/min 离心 10
        酸、甲醇、乙腈为色谱纯，甲基叔丁基醚、无水碳酸钠为                           min，取上清液，置于另一离心管，以 37 ℃氮气吹干，残
        分析纯，其余试剂为实验室常用规格，水为纯净水。                             渣加 100 µL 甲醇-乙腈-0.5％甲酸溶液复溶，取 20 µL 进
        1.3 动物                                              行LC-MS/MS分析。
            本研究所用动物为 SPF 级雄性 SD 大鼠，体质量为                     2.4.2 AVA血浆样品的预处理           取100 µL大鼠血浆，加
        180～200 g，购自沈阳药科大学实验动物中心，实验动物                       入200 ng/mL内标溶液10 µL，涡旋30 s；加入1 mol/L盐
        生产许可证号为SCXK（辽）2019-0058。                            酸100 μL，涡旋30 s，再加入乙酸乙酯3 mL，涡旋1 min；
        2 方法与结果                                             以3 500 r/min离心10 min，取上清液，置于另一离心管，
        2.1  色谱与质谱条件                                        以 37 ℃氮气吹干，残渣加 100 µL 甲醇-乙腈溶液复溶，
        2.1.1  色谱条件 （1）色谱条件一（检测 VEN、ODV）：                   取20 µL进行LC-MS/MS分析。


        ·1362 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 11                                 中国药房    2022年第33卷第11期
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