Page 70 - 《中国药房》2022年11期
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当归补血汤出自《内外伤辨惑论》，由当归、黄芪按                         规格为6 g×10袋，编号S8～S15）。阿魏酸对照品（批号
        1 ∶5的比例配伍而成，具有益气生血的功效，主治血虚阳                         110773-201915，纯度≥99.4％）、黄芪甲苷对照品（批号
        浮发热证，为甘温除热法代表方之一 。当归补血丸由                            110781-202118，纯度≥96.9％）均购自北京瑞达恒辉科
                                        [1]
        当归补血汤改良而来：将当归 160 g、黄芪 400 g 粉碎成                    技发展有限公司；毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品（批号
        细粉，过筛，混匀，加炼蜜30～40 g与适量的水，泛丸，干                       wkq21010405，纯度≥98％）购自四川省维克奇生物科技
        燥，即得    [2－3] 。当归补血丸中含有多种黄酮苷类、氨基酸                   有限公司；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超
        类、有机酸类等成分 ，具有补气养血的功效，用于身体                           纯水。
                          [4]
        虚弱、气血两虚，是妇科临床常用中成药 。                                2 方法与结果
                                          [2]
            目前，仅有《中华人民共和国卫生部药品标准（中药                         2.1 色谱条件
        成方制剂第一册）》从显微鉴别和薄层鉴别项对当归补                                采用 Hypersil ODS2 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5
                             [2]
        血丸进行定性质量控制 ，尚缺乏相应的定量标准。虽                            μm），以乙腈（A）-0.2％甲酸溶液（B）为流动相进行梯度洗
        然有研究对当归补血丸开展了定量研究，分别建立了阿                            脱（0～10 min，5％A→8％A；10～15 min，8％A→12％A；
        魏酸和藁本内酯含量测定的高效液相色谱（HPLC）法                   [5－6] ，  15～25 min，12％A→20％A；25～35 min，20％A→25％A；
        但上述研究也仅对组方中当归的指标成分进行了测                              35～42 min，25％A；42～50 min，25％A→40％A；50～
        定。当归补血丸中化学成分多样，仅对单一成分进行定                            65 min，40％A→80％A；65～75 min，80％A）；流速为
        量检测无法全面反映其整体质量。当归补血丸中以黄                             1.0 mL/min；柱温为25 ℃；进样量为20 μL；DAD检测器
        芪为君药，当归为臣药，处方具有补气生血的功效。毛                            的检测波长为 250 nm（毛蕊异黄酮葡萄糖苷）、323 nm
        蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷是黄芪中的主要药效成                            （阿魏酸）；ELSD检测器（黄芪甲苷）的条件为氮气流速
        分，具有提高免疫力、抗癌等多方面的药理作用                     [7－10] ，可  1.5 L/min、漂移管温度80 ℃、增益值4。
        作为质量评价指标。阿魏酸作为当归的主要有效成分                             2.2  混合对照品溶液的制备
        之一，是2020版《中国药典》（一部）规定的当归指标性成                            取阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷对照品
        分，具有增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化、抗抑郁和保肝等                           各适量，精密称定，加甲醇制成质量浓度分别为 1.242
        药理作用     [11－14] 。鉴于此，本研究以来源于 2 个厂家的 15             mg/mL 的阿魏酸母液、0.846 mg/mL 的毛蕊异黄酮葡萄
        批当归补血丸为样本，建立HPLC指纹图谱，并同时采用                          糖苷母液、1.940 mg/mL 的黄芪甲苷母液。取各对照品
        HPLC 法测定其中阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪                          母液1 mL，置于同一10 mL量瓶中，用甲醇稀释并定容，
        甲苷的含量，以期为当归补血丸质量标准的完善及其质                            得到阿魏酸质量浓度为 124.2 μg/mL、毛蕊异黄酮葡萄
        量控制提供参考。                                            糖苷质量浓度为 84.6 μg/mL、黄芪甲苷质量浓度为
        1 材料                                                194.0 μg/mL的混合对照品溶液。
        1.1  主要仪器                                           2.3  供试品溶液的制备
            本研究所用的主要仪器有1260型HPLC仪、G1315B                        取2 g当归补血丸细粉于锥形瓶中，加入100 mL含
        型 二 极 管 阵 列（DAD）检 测 器（美 国 Agilent 公 司），             4％浓氨试液的 80％甲醇（取浓氨试液 4 mL，加 80％甲
        Alltech 3300 型蒸发光散射（ELSD）检测器（美国 Alltech             醇至100 mL，摇匀即得），称定质量；然后以80 ℃水浴回
        公司），BSA224S-CW型电子天平（德国Sartorius公司），                 流1 h，冷却后，再次称定质量，用含4％浓氨试液的80％
        HH-S6 型水浴锅（江苏金怡仪器科技有限公司），YM-                        甲醇补足损失的质量；抽滤，取50 mL滤液蒸干，残渣用
        080S型超声波清洗机（深圳市方奥微电子有限公司）。                          80％甲醇复溶，转移到 10 mL 量瓶中，并以 80％甲醇定
                                                                                                         [8]
        1.2 主要药品与试剂                                         容，摇匀；用微孔滤膜（0.22 μm）滤过，取续滤液，即得 。
            当归、黄芪药材由南方医科大学中医药学院田恩伟                          2.4 对照药材溶液的制备
        副教授于 2020 年 7 月分别从甘肃岷县、河北承德采集，                          取当归药材细粉和黄芪药材细粉各 1 g，按“2.3”项
        并由其鉴定分别为伞形科植物当归 Angelica sinensis                   下方法制备当归对照药材溶液和黄芪对照药材溶液。
        （Oliv.）Diels和豆科植物膜荚黄芪Astragalus membrana-           2.5 HPLC指纹图谱的建立及分析
        ceus（Fisch.）Bge.的干燥根。本研究共收集了2个厂家的                   2.5.1  精密度试验       取当归补血丸（S15）细粉适量，按
        15 批当归补血丸样品，其中来自 A 厂家的样品有 7 批                      “2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条
        （批号分别为20062022、19123021、21032722、21041122、          件连续进样测定 6 次，记录色谱图。结果，以 32 号峰为
        20092021、21062221、20112321，规格为 6 g×10 袋，编号          参 照 峰 ，计 算 得 各 共 有 峰 相 对 保 留 时 间 的 RSD 为
        S1～S7），来自B厂家的样品有8批（批号分别为190204、                     0.06％～0.23％（n＝6）、相对峰面积的 RSD 为 0.97％～
        190302、190306、190308、190311、190504、190505、190809，   3.09％（n＝6），表明仪器精密度良好。


        ·1344 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 11                                 中国药房    2022年第33卷第11期
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