Page 49 - 《中国药房》2022年10期

6×10 6 表9 Hyp-F127/TPGS体外释放模型拟合结果
拟合模型 拟合方程 R 2
5×10 6
零级动力学 Qn＝0.558 t+26.543 0.733 3
4×10 6 一级动力学 Qn＝61.218（1－e －0.123 t ） 0.890 7
0.905 8
Higuchi方程
Qn＝6.271 t +14.733
1/2
荧光强度 3×10 6 2.8 大鼠在体肠吸收实验
2×10 6 2.8.1 供试溶液的制备 参照孙慧园等 [16] 方法配制
Krebs-Ringer’s（K-R）营养液。分别称取 Hyp 对照品和
1×10 6
Hyp-F127/TPGS 冻干粉适量，用 K-R 营养液定容至 50
0
mL，制备成含 Hyp 30 μg/mL 的 Hyp 溶液和 Hyp-F127/
－4.0 －3.0 －2.0 －1.0 0 TPGS溶液。
胶束浓度的对数值
2.8.2 灌流液中 Hyp 含量的测定 精密吸取供试溶液
图7 F127/TPGS的CMC测定结果
或流出液 200 μL 置于 2 mL EP 管内，加甲醇 800 μL，于
表 8 Hyp-F127/TPGS 的初步稳定性考察结果（x±±s， 4 ℃下以10 000 r/min离心10 min，取上清液，过0.22 μm
n＝3） 微孔滤膜，取续滤液，按“2.2.1”项下色谱条件进样测
储存时间/d EE/％ DL/％ 定。参照2020年版《中国药典》（四部）相关通则进行方
0 87.99±1.44 5.12±0.10 法学考察 。结果显示，Hyp 检测质量浓度的线性范围
[8]
3 87.72±0.86 5.09±0.08 为 1.251～125.1 μ g/mL，其回归方程为 Y＝16 701X－
5 86.78±2.50 5.04±0.09 2
7 86.75±1.94 4.97±0.13 4 089.4（R ＝ 0.999 8）；方法精密度、重复性、稳定性（24 h）
14 86.07±1.25 4.94±0.07 均良好，灌流液中的内源性物质对Hyp无干扰。
21 85.89±1.20 4.96±0.12 2.8.3 大鼠在体单向肠灌流实验 取“2.8.1”项下供试
28 85.13±1.41 4.87±0.27
溶液 50 mL 置于离心管内，于（37.0±0.5）℃水浴中预
24、32、48、60、72、96 h 时取样 500 μL，同时补充相同体 热。选择健康雄性 SD 大鼠，禁食、不禁水 18～24 h，称
积的释放介质。取样溶液按“2.2”项下方法测定溶液中 定质量后，腹腔注射 20％乌拉坦溶液（6.5 mL/kg）麻醉，
Hyp 的含量，再按下式计算各时间点的累积释放率 沿其腹中线剪开约 3 cm，分离肠段（空肠自幽门 15 cm
n－1 处往下约 10 cm，回肠自盲肠上行 20 cm 处往下约 10
（Qn ）：Qn （％）＝（V e ∑ Ci+V0Cn ）/M 药 （式中，V e为释放介质
i＝0 cm），在肠段两端切口，并插入3 mm玻璃管结扎。先用
的置换体积，Ci为第i次取样时取样溶液中的药物浓度， 37 ℃生理盐水清理盲肠内容物，再排净生理盐水，更换
V0为释放介质体积，Cn为第 n 次取样时释放介质中的药 K-R营养液，打开恒流泵以0.2 mL/min灌流15 min以平
物浓度，M 药为胶束中 Hyp 的含量），采用 Origin 2019 软
衡肠段，再换成预热好的供试溶液平衡 30 min，最后在
件绘制累积释放曲线，再分别进行零级动力学、一级动
灌注口换上已知质量的装有供试溶液 5 mL 的 EP 管进
力学和 Higuchi 方程拟合。每组样品平行制备 3 份。结
行灌注，同时在出液口换上已知质量的 EP 管收集流出
果显示，Hyp 混悬液在 60 h 内基本释放完全，累积释放
液。每隔 15 min 更换一次灌注口的 EP 管，同时收集流
率达到（99.24±0.27）％；Hyp-F127/TPGS 胶束溶液的释
出液，称定质量并计算灌流前后 EP 管质量差异。实验
放明显减缓，96 h 内的累积释放率为（66.30±2.93）％，
共灌注 90 min。将供试溶液和流出液按“2.8.2”项下方
2
且更符合 Higuchi 方程（R ＝0.905 8），说明该胶束具有
法进行处理并分析。在整个实验过程中，大鼠腹部需覆
缓释作用，能延长药物作用时间。结果见图8、表9。
盖用生理盐水浸润的脱脂棉以避免腹膜中液体蒸发和
100 热量损失。大鼠处死后，将各肠段剪下，测量其长度与
Hyp [17－18]
80 Hyp-F127/TPGS 内径 。 按“2.8.1”项
2.8.4 Hyp-F127/TPGS 溶液稳定性考察
累积释放率/％ 60 下方法平行制备Hyp-F127/TPGS溶液5份，置于（37.0±
0.5）℃水浴锅中，分别于 0、30、60、90、120 min 各取样 1
40
mL，按“2.8.2”项下方法处理并分析。结果表明，在
20
（37.0±0.5）℃下，Hyp-F127/TPGS溶液中Hyp的含量在
0 2 h内无明显变化（RSD＝1.06％，n＝5），稳定性良好。
0 20 40 60 80 100
时间/h 2.8.5 肠壁物理吸附考察 剪取清洗后的相应肠段各
图8 Hyp和Hyp-F127/TPGS的体外释放曲线（x±±s，％％， 10 cm，用玻璃管将黏膜层翻出，分别置于 30 μg/mL 的
n＝3） Hyp-F127/TPGS供试溶液中，在（37.0±0.5）℃水浴中恒

中国药房 2022年第33卷第10期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10 ·1195 ·