Page 45 - 《中国药房》2022年10期

测定无干扰。（2）线性关系考察：精密吸取“2.2.2（1）”项 2.3 包封率和载药量测定
下 Hyp 对照品溶液，加入甲醇制成质量浓度分别为 按“2.2.2（2）”项 下 方 法 制 备 供 试 品 溶 液 ，再 按
80.40、50.25、25.125、10.05、5.025、1.005 µg/mL的系列对 “2.2.1”项下色谱条件进样测定，计算包封率（entrapped
照品溶液。取“2.2.2（1）”项下对照品溶液和上述系列对 efficiency，EE）：[EE（％）＝胶束中 Hyp 的质量/Hyp 投药
照品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，以峰面积 量×100％]。
为纵坐标（Y）、Hyp质量浓度为横坐标（X）绘制标准曲线， 将 Hyp-F127/TPGS 置于－80 ℃冰箱中预冻 3 h，放
得 Hyp 的线性回归方程为 Y＝20 893X－2 396.5（R ＝ 入冷冻干燥机（温度＜－40 ℃，真空度＜20 Pa）12 h 后
2
0.999 9），提示 Hyp 检测质量浓度的线性范围为 1.005～ 取出，称定质量，即得胶束冻干粉。称取上述胶束冻干
100.50 μg/mL。（3）精密度考察：按“2.2.2（2）”项下方法制 粉 2 mg，置于 10 mL 量瓶内，加入适量甲醇超声 10 min
备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱条件平行进样6次， 以破坏胶束结构，甲醇定容，摇匀，经 0.22 μm 微孔滤膜
得Hyp峰面积的RSD为0.25％（n＝6），表明该方法精密 滤过，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，计算载药量
度良好。（4）重复性考察：按“2.2.2（2）”项下方法平行制 （drug loading，DL）：[DL（％）＝冻干胶束中 Hyp 的质量/
备6份供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定， 冻干胶束的质量×100％] [9－10] 。
记录峰面积并代入线性回归方程计算含量，得Hyp含量 2.4 PB 实验设计优化 Hyp-F127/TPGS 制备的主要影
的RSD为0.97％（n＝6），表明该方法重复性良好。（5）稳 响因素
定性考察：取“2.2.2（2）”项下供试品溶液，分别于室温下 2.4.1 PB 实验设计 参考现有研究 [11－12] ，以 EE 为考察
放置0、2、4、6、8、10、12、24、48 h时按“2.2.1”项下色谱条 指标，对F127-TPGS质量比、聚合物质量浓度（以固体材
件进样测定，得 Hyp 峰面积的 RSD 为 0.68％（n＝9），表 料总量计）、Hyp 投药量、水化温度、水化时间进行单因
明该样品在室温下放置 48 h 内稳定性良好。（6）加样回 素 考 察 ，各 因 素 水 平 均 平 行 操 作 3 次 。 最 终 确 定
收 率 试 验 ：平 行 取 9 份 经 稀 释 的 已 知 质 量 浓 度 的 F127-TPGS质量比为2∶1、聚合物质量浓度为50 mg/mL、
Hyp-F127/TPGS 溶液（0.02 mg/mL）各 1 mL，按质量比 Hyp 投药量为 9 mg、水化温度为 50 ℃、水化时间为 2 h，
0.5 ∶ 1、1 ∶ 1、1.5 ∶ 1 分别加入 Hyp 对照品溶液 0.1、0.2、0.3 以进行后续 PB 实验设计。根据单因素考察结果，利用
mL，按“2.2.2（2）”项 下 方 法 制 备 供 试 品 溶 液 ，再 按 Mintab 18软件设计PB实验，以EE（Y）为响应值，对影响
“2.2.1”项下色谱条件进样测定。每个质量浓度样品平 胶束的 5 个因素[F127-TPGS 质量比（A）、聚合物质量浓
行制备 3 份，测得平均加样回收率为 100.35％（RSD＝ 度（B）、Hyp投药量（C）、水化温度（D）、水化时间（E）]进行
1.01％，n＝9），表明该方法准确度良好。 显著性验证。每个因素设计2个水平，即高水平（+1）和低
Hyp 水平（－1），高水平约为低水平的1.5～2倍。PB实验设计
12.5
10.0 的因素与水平见表1，实验设计的安排与结果见表2。
U/mV 7.5 表1 PB实验设计的因素与水平
5.0
2.5
水平 A B/（mg/mL） C/mg D/℃ E/h
0 －1 2∶1 40 9 25 1
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 +1 4∶1 60 15 50 2
t/min
A.对照品溶液
表2 PB实验设计的安排与结果
8 试验号 A B/（mg/mL） C/mg D/℃ E/h Y/％
6 Hyp 1 4∶1 40 9 25 1 79.35
U/mV 4 2 4∶1 40 9 50 2 71.73
2 3 4∶1 60 15 25 2 65.69
4 2∶1 60 9 50 1 86.94
0
5 4∶1 40 15 50 2 65.70
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 6 2∶1 60 15 25 2 75.32
t/min
B.供试品溶液 7 4∶1 60 9 25 1 79.68
17.5 8 2∶1 60 9 50 2 82.71
15.0 9 2∶1 40 15 50 1 83.18
12.5 10 2∶1 40 9 25 2 79.84
U/mV 10.0 11 2∶1 40 15 25 1 80.50
7.5
5.0 12 4∶1 60 15 50 1 73.46
2.5
0 2.4.2 数据分析 采用 Minitab 18 软件根据表 2 实验
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 结果进行回归分析，得到回归方程为 Y＝0.770 08－
t/min
C.空白胶束溶液 0.044 07A + 0.002 92B － 0.030 33C + 0.002 78D －
2
图1 Hyp含量测定专属性考察的高效液相色谱图 0.035 10E。该模型的R 为0.983 8，表明其拟合度良好；

中国药房 2022年第33卷第10期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10 ·1191 ·