Page 44 - 《中国药房》2022年10期
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intestinal absorption of Hyp to a certain extent.
        KEYWORDS     hyperoside；mixed nanomicelles；preparation technology；intestinal absorption characteristics；Plackett-Burman
        design；Box-Behnken response surface method；unidirectional intestinal perfusion model


            金丝桃苷（hyperoside，Hyp）为天然黄酮类化合物，                  成都埃法生物科技有限公司；F127（批号 RA0213008）、
        广泛存在于各种植物体内，具有治疗心血管疾病、抗氧                            TPGS（批号 RJ0210731）均购自西安瑞禧生物科技有限
        化应激、抗肿瘤、抗炎等作用 。但该成分水溶性差、口                           公司；尼罗红（批号S15GS161316）购自上海源叶生物科
                                 [1]
        服吸收不佳、生物利用度低，极大影响了其临床疗效，也                           技有限公司；磷酸二氢钾（批号 20190219）、无水磷酸氢
                         [2]
        限制了其开发应用 。有学者指出，探讨药物在肠道内                            二钠（批号 20200106）、氯化钾（批号 20190215）、氯化钠
        的吸收情况是评价生物利用度、改良剂型、提高临床疗                           （批号20200210）均购自国药集团化学试剂有限公司；乙
                     [3]
        效的有效手段 。将 Hyp 制成新剂型来改善其肠道吸                          腈、甲醇、磷酸均为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为
        收，对提高Hyp生物利用度、增强疗效具有重要意义。                           蒸馏水。
            作为一种新型给药系统，纳米胶束在水中能自组装                          1.3 实验动物
        形成“核-壳”结构，从而实现对脂溶性药物的包载，是提                              本研究所用实验动物为 SPF 级雄性 SD 大鼠，月龄
                                        [4]
        高难溶性药物口服吸收的有效途径 。普朗尼克 F127                          为 2～3 个月，体质量为 180～220 g，购自长春市亿斯实
        （pluronic F127，F127）是一种 ABA 型三嵌段共聚物，因               验动物技术有限责任公司，动物生产许可证号为SCXK-
        具有优异的生物相容性、能增加蛋白的稳定性且不具有                           （吉）2020-0002。本研究方案经长春中医药大学动物伦
        肌毒性和免疫毒性，现已被广泛应用于生物医学领                              理委员会审核批准，批准号为2021199。
        域 。聚乙二醇 1000 维生素 E 琥珀酸酯（D-α-tocopheryl              2 方法与结果
          [5]
        polyethylene glycol 1000 succinate，TPGS）是具有代表性      2.1  Hyp-F127/TPGS的制备
        的两亲性维生素E琥珀酸酯衍生物，是美国食品药品监                                采用薄膜分散法制备 Hyp-F127/TPGS。分别将一
        督管理局（U.S. Food and Drug Administration，FDA）批        定量的Hyp对照品、F127和TPGS溶于丙酮中，超声（功
        准的安全药物辅助剂之一，在给药系统中应用广泛 。                            率250 W，频率50 kHz，下同）溶解5 min，置于100 mL茄
                                                      [6]
        TPGS 具有表面活性剂的特性，可提高水溶性较差药物                          形瓶中，于45 ℃水浴中减压旋转蒸发以去除有机溶剂，
        的溶解度，并可通过抑制P糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）                直至在瓶壁形成一层均匀、蜂窝状的薄膜。将茄形瓶置
        外排泵来增强机体对药物的吸收能力 。本研究首次将                            于真空干燥器（室温）中静置过夜，加入自行配制的 pH
                                         [7]
        Hyp 载入 F127 和 TPGS 中，并采用 Plackett-Burman（PB）       （7.4 ± 0.1）磷 酸 盐 缓 冲 液（phosphate buffered saline，
        实 验 设 计 和 Box-Behnken 设 计（Box-Behnken Design，       PBS）3 mL，于 50 ℃下搅拌水化，再于 4 ℃下以 10 000
        BBD）响应面法优化 Hyp 混合纳米胶束（Hyp-F127/TP-                  r/min 离心 10 min，取上清液，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，
        GS）的制备工艺，并对其进行质量评价；同时，通过大鼠                          即得。同法制备不含Hyp的空白胶束（F127/TPGS）。
        在体单向肠灌流模型来评价 Hyp-F127/TPGS 的肠道吸                     2.2  Hyp含量测定
        收特性，为Hyp制剂的进一步研发和应用提供参考。                            2.2.1  色谱条件     色谱柱为Agilent ZORBAX Eclicpase
        1 材料                                                Plus C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.1％磷
        1.1  主要仪器                                           酸溶液（18 ∶ 82，V/V）；检测波长为360 nm；柱温为30 ℃；
            本研究所用主要仪器有 LC-15 型高效液相色谱                        流速为1 mL/min；进样量为10 µL。
        仪[岛津企业管理（中国）有限公司]、Zetasizer Nano ZS90               2.2.2  溶液的制备 （1）对照品溶液：精密称取 Hyp 对
        型激光粒度仪（英国 Malvern 公司）、SpectraMax Para-              照品，加甲醇制成质量浓度为 0.100 5 mg/mL 的 Hyp 对
        digm型多功能酶标仪[美谷分子仪器（上海）有限公司]、                        照品溶液。（2）供试品溶液与空白胶束溶液：精密移取所
        JEM-1200EX 型透射电子显微镜（transmission electron           制 Hyp-F127/TPGS 200 μL，置于 10 mL 量瓶内，加甲醇
        microscope，TEM）（日本JEOL公司）、DF-101Z型集热式               适量，超声处理10 min，甲醇定容，摇匀，经0.22 µm微孔
        恒 温 加 热 磁 力 搅 拌 器（上 海 科 升 仪 器 有 限 公 司）、             滤膜过滤，即得。精密移取所制 F127/TPGS，同法制备
        KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、                        空白胶束溶液。
        Sigma 4K15型台式高速冷冻离心机（德国Sigma公司）、                    2.2.3  方法学考察      参照 2020 年版《中国药典》（四部）
        MD200-2型氮吹仪（杭州奥盛仪器有限公司）、RE-52AA                     相关通则进行方法学考察 。
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        型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）、BS100-1A 型恒                          （1）专属性考察：分别按“2.2.2”项下方法制备对照
        流泵（保定思诺流体科技有限公司）等。                                  品、供试品和空白胶束溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进
        1.2  主要药品与试剂                                        样测定并记录色谱图，结果见图1。由图1所示，在该色
            Hyp对照品（批号AF2020041503，纯度≥98％）购自                 谱条件下，Hyp 色谱峰峰形较好，且 F127 和 TPGS 对其


        ·1190 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10                                 中国药房    2022年第33卷第10期
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