Page 77 - 《中国药房》2022年6期

承德厂家
4 4 四川厂家
辽宁厂家
2 2
0 0
t[2] t[2]
－2 －2
－4 －4
－6 －6
－8 －6 －4 －2 0 2 4 6 －8 －6 －4 －2 0 2 4 6
t[1]
t[1]
图6 24批心安胶囊的PCA得分图
图8 24批心安胶囊的PLS-DA得分图
2.5.3 PLS-DA 为明确24批样品的组间差异及差异标
志物，本研究在 CA 和 PCA 的基础上，将 24 批心安胶囊 0.5
0.4
的 12 个 共 有 峰 峰 面 积 导 入 SIMCA 14.1 软 件 ，建 立 0.3
0.2
PLS-DA模型。结果显示，自变量累积解释能力参数R X W*c[2] 0.1
2
为0.967，因变量累积解释能力参数R Y为0.965，预测能 －0.1 0
2
2
2
2
力参数Q 为0.919，均大于0.5，且R 和Q 两者差距小于 －0.2
－0.3
0.2，说明所建模型具有较强的解释率和预测率 。设置 －0.4
[19]
－0.5 －0.4 －0.3 －0.2 －0.1 0 0.1 0.2 0.3 0.4
分类 Y 矩阵随机排列 200 次并进行置换检验，置换检验 W*c[1]
图见图7。由图7可知，R 拟合直线在Y坐标轴的截距为 图9 24批心安胶囊共有峰的PLS-DA载荷散点图
2
2
0.209（应小于0.30），说明所建立的模型可靠；Q 拟合直
1.8
线在Y坐标轴的截距为－0.703（应小于0.05），表明所建 1.6
1.4
模型不存在过度拟合，可用于分析 24 批样品的组间差 1.2
[19]
异 。PLS-DA 得分图、载荷散点图和变量重要性投影 VIP值 1.0
0.8
（variable importance in projection，VIP）图分别见图 8～ 0.6
0.4
图 10。由图 8 可知，3 个厂家生产的 24 批样品均分布在 0.2
0
95％置信区间内，且不同厂家分布在不同区域，区分明 6 8 7 11 10 12 4 5 3 2 9 1
峰号
显，分类结果与CA和PCA一致。由图9可知，离原点分 图10 24批心安胶囊共有峰的PLS-DA VIP图
散较远的色谱峰分别为 6、7、8、10、11 号峰，说明这些成
3 讨论
分对样品组间差异的影响较大。结合 VIP 值筛选出能
3.1 色谱条件的优化
引起不同厂家心安胶囊质量差异的标志性成分，其中
本课题组前期考察了 4 种型号的色谱柱[Agilent
VIP 值＞1 且其值越大，表明对质量差异的贡献越大，
TM
ZORBAX SB-C18、Thermo Acclaim 120 C18、Water Sun-
[20]
可作为差异标志物 。由图 10 可得出，6 号峰对应成
fire C18及 Agilent 5 HC-C18 （2），规格（4.6 mm×250 mm，5
分和牡荆素葡萄糖苷（7 号峰）、牡荆素鼠李糖苷（8 号
µm）均相同]的分离效果，发现 Agilent ZORBAX SB-C18
峰）、金丝桃苷（10 号峰）、异槲皮素（11 号峰）为差异标 的分离效果最佳。本课题组考察了流动相体系中不同
志物。
体积分数甲酸溶液（0.05％、0.1％、0.2％）的分离效果，发
现以 0.1％甲酸溶液（A）-乙腈（B）-四氢呋喃（D）的分离
R 2
Q 2 效果最好，并对梯度洗脱程序进行了优化。本课题组对
0.8
0.6 检测波长（320、340、350、363 nm）进行了筛选，发现 340
0.4
nm 波长下各色谱峰的响应值均较高，故将其作为检测
0.2
R 2 或Q 2 0 波长。本课题组还对柱温（25、30、35 ℃）、流速（0.8、1.0、
－0.2 1.2 mL/min）进行了考察，发现当柱温为 30 ℃、流速为
－0.4
1.0 mL/min时的分离效果最佳。
－0.6
－0.8 3.2 供试品溶液制备方法的考察
－0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
相关系数 本课题组以指纹图谱信息的全面性和色谱峰的响
图7 24批心安胶囊的PLS-DA置换检验图 应值为主要指标，比较了不同提取溶剂（50％甲醇、60％

中国药房 2022年第33卷第6期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 ·711 ·