Page 74 - 《中国药房》2022年6期
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柱温为30 ℃；检测波长为340 nm；进样量为10 μL。 有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，各共有
表2 流动相梯度洗脱程序 峰相对保留时间的 RSD 均小于 2.00％，相对峰面积的
RSD均小于3.00％，表明供试品溶液在室温下放置24 h
时间/min A/％ B/％ D/％ 时间/min A/％ B/％ D/％
0 90 8 2 25 84 14 2 内稳定。
5 86 12 2 35 78 20 2 2.3.4 指纹图谱的建立、相似度评价及共有峰指认 取
15 86 12 2 50 63 35 2
18 84 14 2 55 63 35 2 24批心安胶囊样品，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品
溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将
2.2 溶液的制备
所得色谱图的“AIA”格式文件导入《中药色谱指纹图谱
2.2.1 混合对照品溶液 分别精密称取绿原酸、牡荆素
相似度评价系统（2012 版）》进行分析，设 S11 图谱为参
葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷、异槲皮
照图谱，采用中位数法自动匹配后生成24批心安胶囊样
素对照品适量，分别置于 10 mL 量瓶中，用甲醇溶解并
品的叠加指纹图谱和对照指纹图谱（图1、图2）。结果显
定容，制成质量浓度分别为 1.05、1.01、1.06、1.02、0.96、
示，24 批心安胶囊样品有 12 个共有峰。24 批心安胶囊
0.93 mg/mL 的单一对照品贮备液。分别取上述各对照
样品图谱与对照指纹图谱的相似度分别为0.993、0.993、
品贮备液适量，置于同一量瓶中，以50％甲醇为溶剂，制
0.991、0.990、0.992、0.991、0.980、0.972、0.977、0.992、
成绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、
0.992、0.991、0.990、0.991、0.991、0.989、0.988、0.987、
金 丝 桃 苷 、异 槲 皮 素 质 量 浓 度 分 别 为 38.44、75.40、
0.983、0.983、0.977、0.982、0.985、0.982，均大于 0.97，提
294.30、38.25、21.60、13.95 μg/mL的混合对照品溶液。
示样品图谱与对照指纹图谱具有较高的相似度，各批样
2.2.2 供试品溶液 随机取10粒心安胶囊，称定其总质
品的化学成分整体类似。经与混合对照品色谱图（图3）
量。将胶囊内容物倒出，擦净胶囊壳，称定10粒胶囊壳
比对，共指认出 6 个色谱峰，分别为绿原酸（3 号峰）、牡
总质量，计算平均粒重：平均粒重＝（胶囊总质量－胶囊
荆素葡萄糖苷（7号峰）、牡荆素鼠李糖苷（8号峰）、牡荆
壳总质量）/10。将胶囊内容物研细，取细粉约 0.5 g，精
素（9号峰）、金丝桃苷（10号峰）、异槲皮素（11号峰）。
密称定，置于具塞三角瓶，精密加入60％甲醇25 mL，称
600 8
定质量，超声（功率250 W，频率40 kHz，下同）30 min，放 560
520
冷，再次称定质量，用60％甲醇补足减失的质量，取上清 480 3 7
440
400 1 2 6 9 10 12
液，以 12 000 r/min 离心 10 min，用 0.45 μm 微孔滤膜滤 360 4 5 11
320
过，取续滤液，即得。 电压/mV 280
240
200
2.3 指纹图谱分析 160
120
2.3.1 精密度试验 取心安胶囊样品（编号 S1），按 80
40
“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件 0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52
连续进样6次，记录色谱图。以牡荆素葡萄糖苷色谱峰 时间/min
为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面 图1 24批心安胶囊样品的叠加指纹图谱
积。结果显示，各共有峰相对保留时间的 RSD 均小于
170 8
160
2.00％，相对峰面积的 RSD 均小于 3.00％，表明方法精 150
140
密度良好。 130
120
110 3
2.3.2 重复性试验 取心安胶囊样品（编号 S1），按 100
90
“2.2.2”项下方法平行制备供试品溶液，共 6 份，按“2.1” 电压/mV 80 7
70
60
项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以牡荆素葡萄糖 50
40
30 1 2 9
苷色谱峰为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相 20 4 5 6 10 11 12
10
0
对峰面积。结果显示，各共有峰相对保留时间的RSD均
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52
小于 2.00％，相对峰面积的 RSD 均小于 3.00％，表明方 时间/min
图2 心安胶囊的对照指纹图谱
法重复性良好。
2.3.3 稳定性试验 取心安胶囊样品（编号 S1），按 2.4 多成分定量测定
“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，分别于室温下放置0、 2.4.1 专属性考察 取心安胶囊样品（编号 S1），按
2、4、8、12、24 h 时按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录 “2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件
色谱图。以牡荆素葡萄糖苷色谱峰为参照峰，计算各共 对 60％甲醇空白溶剂和供试品溶液进样分析。结果显
·708 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 中国药房 2022年第33卷第6期
