Page 94 - 《中国药房》2022年5期

3.4 芥 子 酸 对 PC12 细 胞 中 cAMP、PKA、CREB、
p-CREB 蛋白表达的影响
各组 PC12 细胞中 CREB 蛋白表达水平均无显著差
异（P＞0.05）。 与 对 照 组 比 较 ，模 型 组 PC12 细 胞 中
cAMP、PKA、p-CREB 蛋白表达水平均显著降低（P＜
0.05）；与模型组比较，芥子酸组 PC12 细胞中 cAMP、
PKA、p-CREB 蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）；与
芥子酸组比较，PI3K抑制剂组和ERK抑制剂组PC12细
A.对照组 B.模型组
胞中 cAMP、PKA、p-CREB 蛋白表达水平均显著降低
（P＜0.05或P＜0.01）。结果见表5、图2。
表 5 各组 PC12 细胞中 cAMP、PKA、CREB、p-CREB
蛋白表达水平的检测结果（x±±s，n＝3）
组别 cAMP PKA CREB p-CREB
对照组 1.00 1.00 1.00 1.00
模型组 0.51±0.06 a 0.42±0.09 a 1.08±0.13 0.45±0.13 a
芥子酸组 0.86±0.11 b 0.72±0.04 b 0.96±0.18 0.91±0.03 b
PI3K抑制剂组 0.50±0.07 cd 0.31±0.09 c 0.94±0.12 0.63±0.08 d
C.芥子酸组 D. PI3K抑制剂组
ERK抑制剂组 0.22±0.10 c 0.29±0.08 c 0.96±0.20 0.64±0.03 d
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与芥子酸
组比较，P＜0.01；d：与芥子酸组比较，P＜0.05

cAMP 42 kDa
PKA 38～42 kDa

CREB 43 kDa
E. ERK抑制剂组 p-CREB 43 kDa
图1 各组PC12细胞形态的显微图（×200） β-actin 43 kDa
对照组 模型组 芥子酸组 PI3K抑制剂组 ERK抑制剂组
表3 各组PC12细胞中Aβ 42含量的检测结果（x±±s，n＝
图 2 各组 PC12 细胞中 cAMP、PKA、CREB、p-CREB
3，pg/mL） 蛋白表达的电泳图
组别 Aβ42含量 组别 Aβ42含量
对照组 123.45±13.40 PI3K抑制剂组 195.33±34.32 c 4 讨论
模型组 210.55±38.54 a ERK抑制剂组 136.70±9.49 c 近年研究发现，芥子酸可改善Aβ 42或氰化钾诱导的
芥子酸组 113.88±5.98 b
小鼠认知障碍，抑制CO2或东莨胆碱引起的大鼠认知障
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与芥子酸 [13－15]
碍，减轻 Aβ 42或红藻氨酸造成的海马神经元损伤 。
组比较，P＜0.05
细胞内Aβ含量随着AD患者年龄的增长而增加，其在体
3.3 芥子酸对PC12细胞中CREB mRNA表达的影响
内累积可以导致AD患者神经元突触损伤 。因此，加速
[16]
与对照组比较，模型组 PC12 细胞中 CREB mRNA
Aβ降解、减少Aβ沉积，已成为防治AD的主要方法之一。
表达水平显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，芥子酸组
本研究结果显示，芥子酸可显著提高 Aβ 42诱导的
PC12 细 胞 中 CREB mRNA 表 达 水 平 显 著 升 高（P＜ PC12 细 胞 存 活 率 ，改 善 细 胞 形 态 ；经 PI3K 抑 制 剂
0.05）；与芥子酸组比较，PI3K抑制剂组和ERK抑制剂组 LY294002 和 ERK 抑制剂 U0126 干预后，PC12 细胞存活
PC12 细胞中 CREB mRNA 表达水平均显著降低（P＜ 率下降，细胞形态发生改变，细胞碎片增多，且突触连接
0.05）。结果见表4。 减少。采用 ELISA 法检测 PC12 细胞中 Aβ 42含量发现，
表4 各组PC12细胞中CREB mRNA表达水平的检测 芥子酸可显著降低 PC12 细胞中 Aβ 42含量；而经 PI3K 抑
结果（x±±s，n＝3） 制剂LY294002和ERK抑制剂U0126干预后，PC12细胞
组别 CREB mRNA 组别 CREB mRNA 中Aβ 42含量升高。这表明芥子酸能够降低PC12细胞中
对照组 1.00 PI3K抑制剂组 0.77±0.10 c Aβ 42的含量，但当PI3K和ERK信号通路被阻断后，芥子
模型组 0.69±0.03 a ERK抑制剂组 0.81±0.12 c
芥子酸组 0.95±0.03 b 酸这一降低作用受到抑制。
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与芥子酸 研究指出，BDNF与TrkB结合后可介导丝裂原活化
组比较，P＜0.05 蛋 白 激 酶（mitogen activated protein kinases，MAPK）/

·600 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5 中国药房 2022年第33卷第5期