Page 39 - 《中国药房》2022年5期
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         PIPE-A  10 5            PIPE-A  10 5                PIPE-A  10 5            PIPE-A  10 5

          10 4                    10 4                        10 4                    10 4
          10 3                    10 3                        10 3                    10 3
           0                       0                          0                       0
               0  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  0 10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  0  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  0 10 3  10 4  10 5  10 6  10 7
                   Annexin FITC-A         Annexin FITC-A              Annexin FITC-A          Annexin FITC-A
                     对照组                     H/R组                      H/R+AS-L组               H/R+AS-M组
                      10 7
                      10 6
                     PIPE-A  10 5                           Cleaved Caspase-3                           32 kDa

                      10 4
                                                            Cleaved Caspase-9                           46 kDa
                      10 3
                       0
                         0 10 3  10 4  10 5  10 6  10 7          GAPDH                                  36 kDa
                              Annexin FITC-A
                               H/R+AS-H组                               对照组    H/R组  H/R+AS-L组 H/R+AS-M组  H/R+AS-H组
                             A. 流式细胞图                                            B.Western blot电泳图
              图1 各组H9c2心肌细胞的凋亡流式细胞图和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达电泳图
                     表3   类叶升麻苷对H/R诱导H9c2心肌细胞炎症反应及氧化应激的影响(x±±s,n=9)

        组别            LDH/(U/L)     MDA/(nmol/mL)  SOD/(U/mL)    TNF-α/(μg/mL)   IL-1β/(μg/mL)  IL-6/(pg/mL)
        对照组           22.33±3.59    14.10±1.30     68.14±6.92     285.19±42.93   138.34±11.59   60.19±5.62
        H/R组          91.91±5.98 a  58.53±4.73 a   13.33±0.88 a   883.24±49.91 a  601.72±47.09 a  187.68±8.22 a
        H/R+AS-L组     70.47±6.02 b  46.40±2.41 b   23.81±2.06 b   643.23±27.31 b  430.29±28.39 b  164.79±5.87 b
        H/R+AS-M组     50.72±4.74 bc  35.14±3.23 bc  34.35±3.31 bc  555.30±25.62 bc  333.09±25.25 bc  133.37±7.14 bc
        H/R+AS-H组     34.68±2.74 bcd  24.58±3.02 bcd  46.51±1.89 bcd  425.55±26.67 bcd  233.52±25.25 bcd  106.25±8.15 bcd
        F              303.173        279.112        300.491        357.731        325.931        447.520
        P              <0.05          <0.05          <0.05          <0.05          <0.05          <0.05
           a:与对照组比较,P<0.05;b:与H/R组比较,P<0.05;c:与H/R+AS-L组比较,P<0.05;d:与H/R+AS-M组比较,P<0.05
        AS-L 组比较,H/R+AS-M 组、H/R+AS-H 组 H9c2 心肌细
        胞中Rnd3、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平的上述变                       Rnd3                                   29 kDa
        化程度更显著(P<0.05);与 H/R+AS-M 组比较,H/R+
        AS-H 组H9c2心肌细胞中Rnd3、NF-κB p65 mRNA 及蛋                NF-κB p65                                75 kDa
        白表达水平的上述变化程度更显著(P<0.05)。结果见
        图2、表4。                                                GAPDH                                   36 kDa
        3.4  Rnd3过表达对H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡、氧化                             对照组    H/R组  H/R+AS-L组 H/R+AS-M组  H/R+AS-H组
                                                           图 2   各组 H9c2 心肌细胞中 Rnd3、NF-κB p65 蛋白表
        应激及炎症反应的影响
                                                                 达电泳图
            转染pcDNA-Rnd3使Rnd3过表达后,与H/R+pcDNA
        组比较,H/R+pcDNA-Rnd3 组 H9c2 心肌细胞中 Rnd3 蛋             表 4   类叶升麻苷对 H/R 诱导 H9c2 心肌细胞中 Rnd3、
        白表达水平、SOD 活性显著升高,而细胞凋亡率及细胞                               NF-κB mRNA及蛋白表达的影响(x±±s,n=9)
        中 NF-κB p65、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 蛋                   Rnd3               NF-κB p65
                                                            组别
        白表达水平,LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水                             mRNA      蛋白       mRNA      蛋白
        平显著降低(P<0.05)。结果见图3、表5。                             对照组       1.00±0.02  0.87±0.04  1.00±0.00  0.22±0.02
                                                            H/R组      0.29±0.05 a  0.24±0.02 a  4.28±0.22 a  0.91±0.05 a
        3.5  抑制 Rnd3 过表达联合类叶升麻苷对 H/R 诱导                     H/R+AS-L组  0.46±0.04 b  0.42±0.04 b  3.22±0.46 b  0.74±0.02 b
        H9c2心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应的影响                             H/R+AS-M组  0.64±0.05 bc  0.56±0.04 bc  2.44±0.29 bc  0.56±0.06 bc
            转染 si-Rnd3 抑制 Rnd3 过表达后再给予 90 μmol/L            H/R+AS-H组  0.83±0.03 bcd  0.74±0.05 bcd  1.35±0.14 bcd  0.38±0.05 bcd
                                                            F          456.437   365.727   224.384  362.489
        的 类 叶 升 麻 苷 ,与 H/R + AS-H + si-NC 组 比 较 ,H/R +      P          <0.05     <0.05     <0.05     <0.05
        AS-H+si-Rnd3组H9c2心肌细胞中Rnd3蛋白表达水平、                      a:与对照组比较,P<0.05;b:与 H/R 组比较,P<0.05;c:与 H/R+
        SOD活性显著降低,而细胞凋亡率及细胞中NF-κB p65、                     AS-L组比较,P<0.05;d:与H/R+AS-M组比较,P<0.05


        中国药房    2022年第33卷第5期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5  ·545 ·
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