Page 39 - 《中国药房》2022年5期
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10 7 10 7 10 7 10 7
10 6 10 6 10 6 10 6
PIPE-A 10 5 PIPE-A 10 5 PIPE-A 10 5 PIPE-A 10 5
10 4 10 4 10 4 10 4
10 3 10 3 10 3 10 3
0 0 0 0
0 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 0 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 0 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 0 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7
Annexin FITC-A Annexin FITC-A Annexin FITC-A Annexin FITC-A
对照组 H/R组 H/R+AS-L组 H/R+AS-M组
10 7
10 6
PIPE-A 10 5 Cleaved Caspase-3 32 kDa
10 4
Cleaved Caspase-9 46 kDa
10 3
0
0 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 GAPDH 36 kDa
Annexin FITC-A
H/R+AS-H组 对照组 H/R组 H/R+AS-L组 H/R+AS-M组 H/R+AS-H组
A. 流式细胞图 B.Western blot电泳图
图1 各组H9c2心肌细胞的凋亡流式细胞图和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达电泳图
表3 类叶升麻苷对H/R诱导H9c2心肌细胞炎症反应及氧化应激的影响(x±±s,n=9)
组别 LDH/(U/L) MDA/(nmol/mL) SOD/(U/mL) TNF-α/(μg/mL) IL-1β/(μg/mL) IL-6/(pg/mL)
对照组 22.33±3.59 14.10±1.30 68.14±6.92 285.19±42.93 138.34±11.59 60.19±5.62
H/R组 91.91±5.98 a 58.53±4.73 a 13.33±0.88 a 883.24±49.91 a 601.72±47.09 a 187.68±8.22 a
H/R+AS-L组 70.47±6.02 b 46.40±2.41 b 23.81±2.06 b 643.23±27.31 b 430.29±28.39 b 164.79±5.87 b
H/R+AS-M组 50.72±4.74 bc 35.14±3.23 bc 34.35±3.31 bc 555.30±25.62 bc 333.09±25.25 bc 133.37±7.14 bc
H/R+AS-H组 34.68±2.74 bcd 24.58±3.02 bcd 46.51±1.89 bcd 425.55±26.67 bcd 233.52±25.25 bcd 106.25±8.15 bcd
F 303.173 279.112 300.491 357.731 325.931 447.520
P <0.05 <0.05 <0.05 <0.05 <0.05 <0.05
a:与对照组比较,P<0.05;b:与H/R组比较,P<0.05;c:与H/R+AS-L组比较,P<0.05;d:与H/R+AS-M组比较,P<0.05
AS-L 组比较,H/R+AS-M 组、H/R+AS-H 组 H9c2 心肌细
胞中Rnd3、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平的上述变 Rnd3 29 kDa
化程度更显著(P<0.05);与 H/R+AS-M 组比较,H/R+
AS-H 组H9c2心肌细胞中Rnd3、NF-κB p65 mRNA 及蛋 NF-κB p65 75 kDa
白表达水平的上述变化程度更显著(P<0.05)。结果见
图2、表4。 GAPDH 36 kDa
3.4 Rnd3过表达对H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡、氧化 对照组 H/R组 H/R+AS-L组 H/R+AS-M组 H/R+AS-H组
图 2 各组 H9c2 心肌细胞中 Rnd3、NF-κB p65 蛋白表
应激及炎症反应的影响
达电泳图
转染pcDNA-Rnd3使Rnd3过表达后,与H/R+pcDNA
组比较,H/R+pcDNA-Rnd3 组 H9c2 心肌细胞中 Rnd3 蛋 表 4 类叶升麻苷对 H/R 诱导 H9c2 心肌细胞中 Rnd3、
白表达水平、SOD 活性显著升高,而细胞凋亡率及细胞 NF-κB mRNA及蛋白表达的影响(x±±s,n=9)
中 NF-κB p65、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 蛋 Rnd3 NF-κB p65
组别
白表达水平,LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水 mRNA 蛋白 mRNA 蛋白
平显著降低(P<0.05)。结果见图3、表5。 对照组 1.00±0.02 0.87±0.04 1.00±0.00 0.22±0.02
H/R组 0.29±0.05 a 0.24±0.02 a 4.28±0.22 a 0.91±0.05 a
3.5 抑制 Rnd3 过表达联合类叶升麻苷对 H/R 诱导 H/R+AS-L组 0.46±0.04 b 0.42±0.04 b 3.22±0.46 b 0.74±0.02 b
H9c2心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应的影响 H/R+AS-M组 0.64±0.05 bc 0.56±0.04 bc 2.44±0.29 bc 0.56±0.06 bc
转染 si-Rnd3 抑制 Rnd3 过表达后再给予 90 μmol/L H/R+AS-H组 0.83±0.03 bcd 0.74±0.05 bcd 1.35±0.14 bcd 0.38±0.05 bcd
F 456.437 365.727 224.384 362.489
的 类 叶 升 麻 苷 ,与 H/R + AS-H + si-NC 组 比 较 ,H/R + P <0.05 <0.05 <0.05 <0.05
AS-H+si-Rnd3组H9c2心肌细胞中Rnd3蛋白表达水平、 a:与对照组比较,P<0.05;b:与 H/R 组比较,P<0.05;c:与 H/R+
SOD活性显著降低,而细胞凋亡率及细胞中NF-κB p65、 AS-L组比较,P<0.05;d:与H/R+AS-M组比较,P<0.05
中国药房 2022年第33卷第5期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5 ·545 ·