Page 36 - 《中国药房》2022年5期

类叶升麻苷调控 Rnd3/NF-κB 通路对缺氧/复氧诱导心肌细胞损

伤的影响 Δ

杨 洋 ，李天发 ，王 军，黄 珊，凌学斌（海南医学院第一附属医院心血管内科，海口 570102）
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中图分类号 R965.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）05-0542-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.05.06

摘 要 目的 探讨类叶升麻苷调控Rho家族GTP酶3（Rnd3）/核因子κB（NF-κB）通路对缺氧/复氧（H/R）诱导心肌细胞损伤的影
响。方法 本实验将H9c2心肌细胞分为对照组（不给药、不造模）、H/R组（仅造模）、H/R+AS-L组、H/R+AS-M组、H/R+AS-H组（以
上 3 组先分别给予 10、30、90 μmol/L 类叶升麻苷，再造模）、H/R+pcDNA 组[先转染 pcDNA（空载体），再造模]、H/R+pcDNA-Rnd3
组[先转染pcDNA-Rnd3（Rnd3过表达载体）使Rnd3过表达，再造模]、H/R+AS-H+si-NC组[先转染si-NC（阴性对照），然后给予90
μmol/L类叶升麻苷，再造模]、H/R+AS-H+si-Rnd3组[先转染si-Rnd3（Rnd3小分子干扰RNA）抑制Rnd3过表达，然后给予90 μmol/L
类叶升麻苷，再造模]。各组经相应处理后，检测细胞凋亡率和细胞中乳酸脱氢酶（LDH）释放量、丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧
化酶（SOD）活性、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平、白细胞介素 1β（IL-1β）水平、IL-6 水平、Rnd3 和 NF-κB 亚基 p65（NF-κB p65）
mRNA及蛋白的表达、活化胱天蛋白酶3（Cleaved Caspase-3）和Cleaved Caspase-9蛋白表达的变化。结果 给予不同浓度类叶升麻
苷均可降低H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达
水平、LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平，升高SOD活性和Rnd3 mRNA及蛋白表达水平（P＜0.05），且呈剂量依赖性。
Rnd3过表达可使H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率，NF-κB p65、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平，LDH释放量和
MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6 水平降低，使 Rnd3 蛋白表达水平和 SOD 活性升高（P＜0.05）；而抑制 Rnd3 过表达，可减弱类叶升麻
苷对 H/R诱导H9c2心肌细胞的凋亡、氧化应激及炎症反应的抑制作用（P＜0.05）。结论 类叶升麻苷可通过促进Rnd3表达、抑制
NF-κB p65表达来调控Rnd3/NF-κB通路，进而抑制心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应，从而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。
关键词 类叶升麻苷；Rnd3/NF-κB通路；缺氧/复氧；H9c2心肌细胞；细胞凋亡；氧化应激；炎症反应

Effects of acteoside on hypoxia/reoxygenation-induced cardiomyocyte damage by regulating the Rnd3/NF-κB
pathway
YANG Yang，LI Tianfa，WANG Jun，HUANG Shan，LING Xuebin（Dept. of Cardiovascular Medicine，the First
Affiliated Hospital of Hainan Medical College，Haikou 570102，China）

ABSTRACT OBJECTIVE To explore the effects of acteoside on hypoxia/reoxygenation（H/R）-induced cardiomyocyte damage
by regulating Rho family GTPase 3（Rnd3）/nuclear factor κB（NF-κB）pathway. METHODS The H9c2 cardiomyocyte were
divided into control group（no administration，no modeling），H/R group（only modeling），H/R+AS-L group，H/R+AS-M group，
H/R+AS-H group（10，30，90 μmol/L acteoside for above 3 groups firstly，and then modeling），H/R+pcDNA group [transfecting
pcDNA （empty vector） firstly， and then modeling]， H/R + pcDNA-Rnd3 group [overexpression of Rnd3 by transfecting
pcDNA-Rnd3（Rnd3 overexpression vector）firstly，and then modeling]，H/R+AS-H+si-NC group [transfecting si-NC（negative
control）firstly，and then giving 90 μmol/L acteoside and modeling]，H/R+AS-H+si-Rnd3 group [inhibiting overexpression of Rnd3
by transfecting si-Rnd3 （Rnd3 small interfering RNA） firstly，and then giving 90 μ mol/L acteoside and modeling]. After
corresponding treatment，the apoptotic rate，release of lactate dehydrogenase（LDH），malondialdehyde（MDA）level，the activity
of superoxide dismutase（SOD），the level of tumor necrosis factor α（TNF-α），interleukin 1β（IL-1β）and interleukin-6（IL-6），
mRNA and protein expression of Rnd3 and NF-κB subunit p65（NF-κB p65），the expression of aspartate proteolytic enzyme 3
（Cleaved Caspase-3）protein and Cleaved Caspase-9 protein were detected. RESULTS Different concentrations of acteoside could
reduce the apoptotic rate of H/R-induced H9c2 cardiomyocyte，the protein expressions of Cleaved Caspase-3 and Cleaved
Caspase-9，mRNA and protein expressions of NF-κB p65，the levels of LDH release and MDA，TNF-α，IL-1β and IL-6，while
increase the activity of SOD and mRNA and protein expressions of Rnd3（P＜0.05），in a dose-dependent manner. Overexpression
of Rnd3 could decrease the apoptotic rate of H9c2 cardiomyocyte，protein expressions of NF-κ B p65，Cleaved Caspase-3 and
Cleaved Caspase-9， the levels of LDH release， MDA，
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81860075）
TNF-α，IL-1β and IL-6，while increase the protein expression
＊主治医师，硕士。研究方向：心血管内科起搏电生理、心肌梗死
药物治疗。电话：0898-66528127。E-mail：yytm85@126.com of Rnd3 and the activity of SOD （P＜0.05）. The inhibition
# 通信作者：主任医师，博士。研究方向：心血管内科冠状动脉介 overexpression of Rnd3 could weaken the inhibitory effects of
入治疗。电话：0898-66528127。E-mail：2223084306@qq.com acteoside on H/R-induced apoptosis of H9c2 cardiomyocyte，

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