Page 67 - 《中国药房》2022年3期

3.4 仙鹤草不同提取部位对 HSC-T6 细胞中肝纤维化 纤维化药物的重要思路。本研究表明，仙鹤草总提取
和凋亡相关蛋白的影响 物、乙酸乙酯部位、石油醚部位和正丁醇部位对HSC-T6
与 对 照 组 比 较 ，PDGF-BB 组 HSC-T6 细 胞 中 细胞增殖均具有不同程度的抑制作用。这提示，仙鹤草
α-SMA、Bcl-2、Bax、caspase-3 蛋白的表达水平均显著升 中存在具有抑制HSC-T6细胞增殖的活性物质。
高（P＜0.01）；与 PDGF-BB 组比较，仙鹤草不同提取部 活化的 HSCs 能够分泌大量细胞外基质，如 HSCs
位组HSC-T6细胞中上述蛋白表达水平大部分显著逆转 活化的标志性蛋白α-SMA、反映肝纤维化程度的蛋白
（P＜0.01）。其中，仙鹤草正丁醇部位的干预作用最为 Col-Ⅰ等，这些细胞外基质是纤维间隔形成的物质基础，
显著。结果见图6。 参与炎症和肝纤维化过程，并且是导致血流动力学变化
和门静脉压力升高的病理基础 [13－14] 。本研究表明，仙鹤
α-SMA 42 kDa
草总提取物、乙酸乙酯部位、石油醚部位和正丁醇部位
均可明显抑制HSC-T6细胞培养上清液和细胞中Col-Ⅰ
β-actin 42 kDa
的表达水平，以及细胞中α-SMA 蛋白表达水平。这提

Bcl-2 26 kDa 示，仙鹤草不同提取部位可通过抑制 HSC-T6 细胞中肝
纤维化相关蛋白的表达，来减少细胞外基质沉积。
Bax 20 kDa
相关研究发现，仙鹤草水提液可显著抑制人胰腺癌
细胞增殖，且呈剂量依赖性和时间依赖性 。仙鹤草挥
[15]
caspase-3 35 kDa
发性成分及主要单体成分棕榈酸、反式角鲨烯和α-亚麻
β-actin 42 kDa 酸等不仅可显著抑制人肝癌细胞HepG2的增殖，还可显
[16]
著升高细胞的早期和晚期凋亡率 。仙鹤草中的异香
对照组 PDGF-BB 仙鹤草总 仙鹤草乙 仙鹤草石 仙鹤草正
组 提取物组 酸乙酯部 油醚部位 丁醇部位
位组 组 组 豆素类成分仙鹤草内酯可通过抑制细胞周期进展、调控
A. α-SMA、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达电泳图
促凋亡蛋白 Bax 和抗凋亡蛋白 Bcl-2 的比例、活化促凋
1.0 对照组 仙鹤草乙酸乙酯部位组
[17]
b 亡蛋白 caspase-3 等方式诱导胃癌细胞凋亡 。另有研
PDGF-BB组 仙鹤草石油醚部位组
0.8 b b 究发现，从仙鹤草干燥部位中提取的均质多糖能抑制骨
仙鹤草总提取物组 仙鹤草正丁醇部位组 a
蛋白表达水平 0.6 a b a b b 肉瘤细胞增殖，并可通过caspase-3依赖的线粒体途径诱
[18]
导该细胞凋亡，且这种抑制作用呈剂量依赖性 。还有
0.4
a b b 研究发现，仙鹤草水提物可抑制 HepG2 细胞增殖，且呈
0.2 b b b
b
时间依赖性和剂量依赖性，这种抑制作用可能是通过上
0
α-SMA Bcl-2 Bax caspase-3 调线粒体凋亡通路中 Bax、caspase-3 蛋白表达来实现
B. α-SMA、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达水平 [19－20]
的 。本研究表明，仙鹤草总提取物、乙酸乙酯部位、
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与PDGF-BB组比较，P＜0.01
石油醚部位和正丁醇部位均可显著诱导HSC-T6细胞凋
图6 仙鹤草不同提取部位对HSC-T6细胞中肝纤维化
亡，仙鹤草总提取物和正丁醇部位可显著抑制 Bcl-2 蛋
和凋亡相关蛋白的影响（x±±s，n＝3）
白表达，仙鹤草总提取物和正丁醇部位可显著促进 Bax
4 讨论
蛋白表达，仙鹤草乙酸乙酯部位、石油醚部位和正丁醇
肝纤维化是多种慢性肝病过程中的主要病理变化，
部位可显著促进caspase-3蛋白的表达。这提示，仙鹤草
具有可逆性，但若刺激因素持续存在，则可进展至不可
正丁醇部位对 HSC-T6 细胞具有较强的促凋亡作用，可
逆的肝硬化阶段，最终引起肝癌、肝衰竭等严重后果。 能是仙鹤草发挥抗肝纤维化作用的有效部位。
肝纤维化的病理机制较复杂，单一靶点的药物无法干预 综上所述，仙鹤草总提取物、乙酸乙酯部位、石油醚
[9]
或逆转肝纤维化进程，目前尚无有效药物 。而近年研 部位和正丁醇部位均可抑制 HSC-T6 细胞增殖，并诱导
究显示，中医药在改善肝纤维化症状、恢复肝功能、改善 其凋亡；正丁醇部位可能是仙鹤草发挥抗肝纤维化作用
肝内血液循环，甚至逆转肝纤维化、调节免疫等方面具 的有效部位。后续笔者将进一步明确仙鹤草抗肝纤维
有明显的优势 [10－11] 。 化的具体活性成分，以期为其抗肝纤维化的药效成分开
HSCs 活化是肝纤维化形成的关键环节，肝脏细胞 发提供参考。
受不同病因刺激发生炎症，肝内多种细胞可通过释放细 参考文献
胞因子活化 HSCs，活化的 HSCs 又分泌大量细胞外基 [ 1 ] 中国中西医结合学会肝病专业委员会.肝纤维化中西医
质，进而导致肝纤维化形成 。因此，开发能够抑制 结合诊疗指南：2019 年版[J].中华肝脏病杂志，2019，27
[12]
HSCs 活化及增殖、促进 HSCs 凋亡的药物，是研究抗肝 （7）：494-504.

中国药房 2022年第33卷第3期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 3 ·317 ·