Page 66 - 《中国药房》2022年3期

给药作用 24 h 时，仙鹤草总提取物的 IC50 为 50.17 75
a
μg/mL，乙酸乙酯部位的IC50为20.75 μg/mL，石油醚部位 60 对照组
的 IC50为 5.82 μg/mL，正丁醇部位的 IC50为 4.09 μg/mL， a PDGF-BB组
详见表1。由此可知，仙鹤草正丁醇部位对HSC-T6细胞 凋亡率/％ 45 a a 仙鹤草总提取物组
增殖的抑制作用最明显。基于此，选择各组药物约1/2倍 30 仙鹤草乙酸乙酯组
仙鹤草石油醚组
IC50作为后续实验浓度，即仙鹤草总提取物25.00 μg/mL、 15
仙鹤草正丁醇组
乙酸乙酯部位 10.00 μg/mL、石油醚部位 3.00 μg/mL、正
0
丁醇部位2.00 μg/mL。 组别
表 1 仙鹤草不同提取部位的 IC50计算结果（x±±s，n＝ a：与PDGF-BB组比较，P＜0.01
9，μg/mL） 图3 各组HSC-T6细胞凋亡率的测定结果（x±±s，n＝3）
作用时间 总提取物 乙酸乙酯部位 石油醚部位 正丁醇部位 3.3 仙鹤草不同提取部位对 HSC-T6 细胞内 Col-ⅠⅠ蛋
24 h 50.17 20.75 5.82 4.09 白表达的影响
48 h 7.23 20.10 1.86 2.12
72 h 11.03 32.49 2.05 1.31 ELISA 和 Western blot 检测结果显示，与对照组比
3.2 仙鹤草不同提取部位对HSC-T6细胞凋亡的影响 较，PDGF-BB 组 HSC-T6 细胞培养上清液中和细胞中
与对照组比较，PDGF-BB组HSC-T6细胞凋亡率差 Col-Ⅰ蛋白表达水平均显著升高（P＜0.01）；与PDGF-BB
异无统计学意义；经仙鹤草不同提取部位干预后， 组比较，仙鹤草不同提取部位组 HSC-T6 细胞培养上清
液中和细胞中Col-Ⅰ蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05
HSC-T6细胞凋亡率均显著升高（P＜0.01），各提取部位
对细胞凋亡率影响大小顺序为石油醚部位＞正丁醇部 或P＜0.01）。结果见图4、图5。
位＞总提取物＞乙酸乙酯部位。结果见图 2、图 3。由 45
此可知，仙鹤草石油醚部位和正丁醇部位可能是其发挥 36 a 对照组
抗肝纤维化作用的有效部位。 （ μg/L ） 27 b PDGF-BB组
Col-Ⅰ蛋白/ 18 b b 仙鹤草总提取物组
10 6 10 6 9 b 仙鹤草乙酸乙酯部位组
仙鹤草石油醚部位组
7-AAD PC5.5-A 10 5 4 7-AAD PC5.5-A 10 5 4 0 组别 仙鹤草正丁醇部位组
10
10
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与PDGF-BB组比较，P＜0.01
10 3 10 3
图4 各组HSC-T6细胞培养上清液中Col-ⅠⅠ蛋白的表
10 3 10 4 10 5 10 6 10 3 10 4 10 5 10 6 达水平
Annexin Ⅴ PE-A Annexin Ⅴ PE-A
A.对照组 B. PDGF-BB组
Col-Ⅰ 130 kDa
10 6 10 6 β-actin 42 kDa
7-AAD PC5.5-A 10 5 4 7-AAD PC5.5-A 10 5 4 对照组 PDGF-BB 仙鹤草总 仙鹤草乙 仙鹤草石 仙鹤草正

组
丁醇部位
提取物组 酸乙酯部 油醚部位
10
10
位组
A. Col-Ⅰ蛋白表达电泳图 组 组
10 3 10 3 0.8
10 3 10 4 10 5 10 6 10 3 10 4 10 5 10 6 a
Annexin Ⅴ PE-A Annexin Ⅴ PE-A 0.6 对照组
C.仙鹤草总提取物组 D.仙鹤草乙酸乙酯部位组 b c PDGF-BB组
蛋白表达水平 0.4 b b 仙鹤草总提取物组
10 6 10 6 0.2 仙鹤草乙酸乙酯部位组
7-AAD PC5.5-A 10 5 4 7-AAD PC5.5-A 10 5 4 0 仙鹤草石油醚部位组
仙鹤草正丁醇部位组
10
10
组别
B. Col-Ⅰ蛋白表达水平
10 3 10 3
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与 PDGF-BB 组比较，P＜0.01；c：与
10 3 10 4 10 5 10 6 10 3 10 4 10 5 10 6 PDGF-BB组比较，P＜0.05
Annexin Ⅴ PE-A Annexin Ⅴ PE-A
E.仙鹤草石油醚部位组 F.仙鹤草正丁醇部位组 图5 仙鹤草不同提取部位对HSC-T6细胞中Col-ⅠⅠ蛋
图2 各组HSC-T6细胞的流式图 白表达水平的影响结果（x±±s，n＝3）

·316 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 3 中国药房 2022年第33卷第3期