Page 59 - 《中国药房》2022年1期

表2 西洋参药材外观性状指标和醇溶性浸出物含量测 1.630 9x + 2.110 7（R ＝0.999 1）、y＝1.974 6x + 1.763 0
2
2
定结果（n＝20） （R ＝0.999 2）、y＝1.229 8x + 3.381 6（R ＝0.999 1）、y＝
2
2
主根长度/主根直径/ 单根药材 醇溶性浸 主根长度/主根直径/ 单根药材 醇溶性浸 1.185 5x+ 3.280 8（R ＝0.999 3），分别在 0.2～3.2、5.1～
编号 编号
cm cm 质量/g 出物/％ cm cm 质量/g 出物/％ 14.5、6.6～32.8、1.4～10.9、0.1～0.7、0.6～4.4、0.3～2.5 μg
S1 5.94 1.05 3.21 45.02 S13 6.18 1.15 5.39 43.31
S2 5.54 1.07 4.10 42.05 S14 5.45 1.07 4.46 51.86 进样量范围内与其峰面积的线性关系良好；精密度试验
S3 6.28 1.06 4.51 48.25 S15 6.72 0.87 2.25 42.99 中 ，峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1.74％ 、1.06％ 、1.45％ 、
S4 6.36 0.98 4.42 51.45 S16 6.37 0.92 3.97 47.33
S5 6.99 0.98 3.76 50.23 S17 6.82 1.08 4.91 41.11 1.86％、1.73％、1.05％、1.61％（n＝6）；重复性试验中，含
S6 5.83 1.05 4.54 48.42 S18 6.00 0.93 2.36 43.28 量的RSD分别为1.04％、1.72％、1.08％、1.65％、1.48％、
S7 7.22 0.93 3.30 41.44 S19 6.68 1.09 5.98 46.39 1.54％、1.41％（n＝6）；稳定性试验（室温放置 24 h）中，
S8 7.91 1.16 6.41 53.98 S20 4.73 0.93 2.26 39.44
S9 6.38 1.15 6.77 47.95 S21 6.77 1.11 5.56 47.85 峰面积的 RSD 分别为 1.02％、0.86％、1.21％、1.35％、
S10 8.08 1.04 4.53 34.77 S22 6.61 1.13 4.95 34.13 1.49％、1.43％、1.75％（n＝6）；平均加样回收率分别为
S11 7.64 1.12 6.14 43.24 S23 6.53 1.17 5.86 43.22
S12 7.40 1.11 6.91 38.88 S24 6.77 0.94 3.23 33.34 95.23％、96.82％、96.38％、97.25％、97.58％、97.04％、
2.3 HPLC-ELSD 法测定西洋参药材中 7 种人参皂苷 95.78％（n＝6）。结果表明，本方法的专属性、精密度、重
类成分的含量 复性、准确性良好。
2.3.1 供试品溶液的制备 精密称取西洋参药材粉末 1 000
800
1 g，精密加入水饱和正丁醇溶液50 mL，称定质量，水浴 U/mV 600
加热回流提取1.5 h，冷却后用水饱和正丁醇溶液补足减 400
200
少的质量，摇匀，过滤，收集续滤液。精密量取续滤液
－5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 70 75
25 mL，回收溶剂至干，残渣用70％甲醇定容至10 mL量 t/min
A.空白溶剂
瓶中；以0.22 μm微孔滤膜过滤，收集滤液，即得。
1 000
2.3.2 混合对照品溶液的制备 精密称取各人参皂苷对 800
照品适量，加甲醇制成分别含人参皂苷Rg1 0.204 mg/mL、 U/mV 600 1 2 3 4 5 6 7
400
人参皂苷 Rb1 0.198 mg/mL、人参皂苷 Re 0.206 mg/mL、 200
－5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 70 75
人参皂苷 Rb2 0.219 mg/mL、人参皂苷 Rc 0.213 mg/mL、 t/min
拟人参皂苷F11 0.214 mg/mL和人参皂苷Rd 0.223 mg/mL B.混合对照品溶液
的混合对照品溶液。 2 000 4
1 800
2.3.3 色谱条件 采用大连依利特 Hypsil C18 色谱柱 1 600
（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈（A）-水（B）为流动相进 1 400
1 200
行梯度洗脱（0～15 min，19％A；15～30 min，19％A→ U/mV 1 000 2
800
29％A；30～42 min，29％A；42～45 min，29％A→33％ 600
A；45～65 min，33％A→40％A；65～70 min，40％A）；进 400 1 3 5 6 7
200
样量为 20 μL；柱温为 25 ℃；流速为 1.0 mL/min；漂移管 －5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 70 75
温度为50 ℃；载气流量为1.0 L/min。 t/min
C.供试品溶液
2.3.4 方法学考察 依据 2020 版《中国药典》（四部）分 1：人参皂苷 Rg1；2：人参皂苷 Re；3：拟人参皂苷 F11；4：人参皂苷
[1]
析方法验证指导原则进行方法学考察 。专属性试验结 Rb1；5：人参皂苷Rc；6：人参皂苷Rb2；7：人参皂苷Rd
果如图1所示，空白溶剂（甲醇溶液）对待测成分的测定 图1 专属性试验的HPLC-ELSD图
无影响，各待测色谱峰与相邻峰间的分离度均大于 2.3.5 含量测定 取24批西洋参药材，按“2.3.1”项下方

1.5。以各待测成分峰面积的对数值（y）作为纵坐标、进 法制备供试品溶液，再按“2.3.3”项下色谱条件进样测
样量的对数值（x）作为横坐标进行方程拟合，得到人参皂 定，记录峰面积，根据标准曲线计算样品中各成分的含
苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂 量。每个样品重复进样测定 3 次，取平均值。结果，24
苷Rb2、人参皂苷Rd、拟人参皂苷F11的回归方程分别为 批西洋参药材中人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、人参皂苷
2
y＝0.971 9x+3.305 3（R ＝0.999 6）、y＝1.542 3x+2.369 4 Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rd、拟人参皂
2
2
（R ＝0.999 3）、y＝0.983 4x+3.246 8（R ＝0.999 5）、y＝ 苷 F11 的含量分别为 0.37～2.58、15.21～29.01、21.79～
中国药房 2022年第33卷第1期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 ·53 ·