Page 22 - 《中国药房》2022年1期
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400                         10 6                     10 6
           400
                                                               10 5                     10 5

          Count  200              Count  200                 PE-A  10 4                PE-A  10 4
                                                               10 3                     10 3

            0                       0                          10 2                     10 2
              10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6
                   DCFH FITC-A             DCFH FITC-A                FITC-A                    FITC-A
                    正常组                    缺氧模型组                      正常组                     缺氧模型组
           300                                                 10 6                     10 6
                                   200
                                                               10 5                     10 5
           200
          Count                   Count  100                 PE-A  10 4                PE-A  10 4
           100
                                                               10 3                     10 3
            0                       0                          10 2                     10 2
              10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6
                   DCFH FITC-A             DCFH FITC-A                FITC-A                    FITC-A
                 阿魏酸甲酯高剂量组               阿魏酸甲酯中剂量组                 阿魏酸甲酯高剂量组                阿魏酸甲酯中剂量组
           300                     400                         10 6                     10 6

                                                               10 5                     10 5
           200
          Count                   Count  200                 PE-A  10 4                PE-A  10 4
           100
                                                               10 3                     10 3
            0                       0                          10 2                     10 2
              10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 7  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6  10 2  10 3  10 4  10 5  10 6
                   DCFH FITC-A             DCFH FITC-A                FITC-A                    FITC-A
                 阿魏酸甲酯低剂量组                 阳性对照药组                  阿魏酸甲酯低剂量组                  阳性对照药组
                            A.流式细胞图                                             A.流式细胞图
              300 000      a                                       0.25
                                               c
                                          b
                                     b                             0.20            b    b
              200 000           b                                  0.15                       b    b
             荧光强度                                                 红/绿荧光强度比值  0.10  a
              100 000
                                                                   0.05
                 0                                                   0
                    正常组  缺氧模  阿魏酸   阿魏酸  阿魏酸  阳性对                       正常组  缺氧模  阿魏酸  阿魏酸  阿魏酸  阳性对
                          型组  甲酯高   甲酯中  甲酯低  照药组                            型组   甲酯高  甲酯中  甲酯低  照药组
                              剂量组   剂量组  剂量组                                      剂量组  剂量组  剂量组
                        B.荧光强度定量检测结果柱状图                                 B.红/绿荧光强度比值定量检测结果柱状图
            a:与正常组比较,P<0.01;b:与缺氧模型组比较,P<0.01;c:与缺             a:与正常组比较,P<0.01;b:与缺氧模型组比较,P<0.01
        氧模型组比较,P<0.05                                         图3   各组H9c2心肌细胞线粒体膜电位的检测结果
             图2 各组H9c2心肌细胞中ROS的检测结果
        4 讨论                                                满、均一性良好,表明阿魏酸甲酯和环孢菌素A 对H9c2
            阿魏酸甲酯即4-羟基-3-甲氧基肉桂酸甲酯,是阿魏                       心肌细胞均无毒性。本研究通过构建H9c2心肌细胞缺
        酸的衍生物,具有抗氧化、抗菌、抗炎活性                 [14-15] 。有研究    氧模型,观察阿魏酸甲酯预处理对细胞上清液中生化指
        表明,阿魏酸甲酯较阿魏酸具有更高的活性、更低的毒                            标、ROS、线粒体膜电位、线粒体膜通透性转换孔开放情
        性,有较好的开发应用前景            [16-17] 。本课题组前期鉴定结          况的影响。
        果显示,阿魏酸甲酯为藏药复方三味檀香散中的活性成                                LDH、CK是检验心脏受损的重要指标之一,当心肌
        分,故本研究在细胞层面深入探讨其对缺氧损伤心肌细                            细胞发生损伤后,细胞破裂,细胞质中的 LDH、CK 会漏
        胞的保护作用。                                             出,二者活力的大小直接反映心肌细胞受损程度 。本
                                                                                                      [18]
            本研究通过构建 H9c2 心肌细胞缺氧模型,以阿魏                       研究结果显示,相较于缺氧模型组,阿魏酸甲酯高、中、
        酸甲酯高、中、低剂量和阳性对照药(环孢菌素 A)对各                          低剂量组H9c2心肌细胞上清液中LDH、CK水平显著降
        组细胞进行处理后,倒置显微镜观察可见细胞形态饱                             低,说明阿魏酸甲酯能够维持细胞膜的完整性,减少


        ·16 ·   China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1                                    中国药房    2022年第33卷第1期
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