Page 22 - 《中国药房》2022年1期
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400 10 6 10 6
400
10 5 10 5
Count 200 Count 200 PE-A 10 4 PE-A 10 4
10 3 10 3
0 0 10 2 10 2
10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
DCFH FITC-A DCFH FITC-A FITC-A FITC-A
正常组 缺氧模型组 正常组 缺氧模型组
300 10 6 10 6
200
10 5 10 5
200
Count Count 100 PE-A 10 4 PE-A 10 4
100
10 3 10 3
0 0 10 2 10 2
10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
DCFH FITC-A DCFH FITC-A FITC-A FITC-A
阿魏酸甲酯高剂量组 阿魏酸甲酯中剂量组 阿魏酸甲酯高剂量组 阿魏酸甲酯中剂量组
300 400 10 6 10 6
10 5 10 5
200
Count Count 200 PE-A 10 4 PE-A 10 4
100
10 3 10 3
0 0 10 2 10 2
10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
DCFH FITC-A DCFH FITC-A FITC-A FITC-A
阿魏酸甲酯低剂量组 阳性对照药组 阿魏酸甲酯低剂量组 阳性对照药组
A.流式细胞图 A.流式细胞图
300 000 a 0.25
c
b
b 0.20 b b
200 000 b 0.15 b b
荧光强度 红/绿荧光强度比值 0.10 a
100 000
0.05
0 0
正常组 缺氧模 阿魏酸 阿魏酸 阿魏酸 阳性对 正常组 缺氧模 阿魏酸 阿魏酸 阿魏酸 阳性对
型组 甲酯高 甲酯中 甲酯低 照药组 型组 甲酯高 甲酯中 甲酯低 照药组
剂量组 剂量组 剂量组 剂量组 剂量组 剂量组
B.荧光强度定量检测结果柱状图 B.红/绿荧光强度比值定量检测结果柱状图
a:与正常组比较,P<0.01;b:与缺氧模型组比较,P<0.01;c:与缺 a:与正常组比较,P<0.01;b:与缺氧模型组比较,P<0.01
氧模型组比较,P<0.05 图3 各组H9c2心肌细胞线粒体膜电位的检测结果
图2 各组H9c2心肌细胞中ROS的检测结果
4 讨论 满、均一性良好,表明阿魏酸甲酯和环孢菌素A 对H9c2
阿魏酸甲酯即4-羟基-3-甲氧基肉桂酸甲酯,是阿魏 心肌细胞均无毒性。本研究通过构建H9c2心肌细胞缺
酸的衍生物,具有抗氧化、抗菌、抗炎活性 [14-15] 。有研究 氧模型,观察阿魏酸甲酯预处理对细胞上清液中生化指
表明,阿魏酸甲酯较阿魏酸具有更高的活性、更低的毒 标、ROS、线粒体膜电位、线粒体膜通透性转换孔开放情
性,有较好的开发应用前景 [16-17] 。本课题组前期鉴定结 况的影响。
果显示,阿魏酸甲酯为藏药复方三味檀香散中的活性成 LDH、CK是检验心脏受损的重要指标之一,当心肌
分,故本研究在细胞层面深入探讨其对缺氧损伤心肌细 细胞发生损伤后,细胞破裂,细胞质中的 LDH、CK 会漏
胞的保护作用。 出,二者活力的大小直接反映心肌细胞受损程度 。本
[18]
本研究通过构建 H9c2 心肌细胞缺氧模型,以阿魏 研究结果显示,相较于缺氧模型组,阿魏酸甲酯高、中、
酸甲酯高、中、低剂量和阳性对照药(环孢菌素 A)对各 低剂量组H9c2心肌细胞上清液中LDH、CK水平显著降
组细胞进行处理后,倒置显微镜观察可见细胞形态饱 低,说明阿魏酸甲酯能够维持细胞膜的完整性,减少
·16 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 中国药房 2022年第33卷第1期