Page 19 - 《中国药房》2022年1期

·药学研究·

阿魏酸甲酯对缺氧损伤H9c2心肌细胞的线粒体保护作用研究 Δ

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杨 赞 ，周 怡（青海大学生态环境工程学院，西宁 810016）
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中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）01-0013-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.01.03
摘 要 目的 探讨阿魏酸甲酯对 H9c2心肌细胞缺氧损伤后线粒体功能的影响。方法 将细胞分为正常组（不给药、不造模），缺氧
模型组（仅造模），阿魏酸甲酯高、中、低（40、20、10 μmol/L）剂量组，阳性对照药组（环孢菌素A ，1 μmol/L）。各给药组细胞经药物
预处理及缺氧损伤造模后，检测乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、肌酸激酶（CK）、三磷酸腺苷（ATP）水平，采用流式细胞仪检测
细胞内活性氧（ROS）、线粒体膜电位、线粒体膜通透性转换孔开放情况的变化。结果 与缺氧模型组比较，阿魏酸甲酯高、中、低剂
量组H9c2心肌细胞中LDH、MDA、CK水平和ROS荧光强度均显著降低，ATP水平均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）；线粒体膜电
位红/绿荧光强度比值和线粒体膜通透性转换孔绿色荧光强度均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）。结论 阿魏酸甲酯能逆转缺氧损
伤H9c2心肌细胞的生化指标水平，稳定线粒体膜电位，降低线粒体膜通透性转换孔的开放程度，对缺氧损伤H9c2心肌细胞线粒
体功能具有明显的保护作用，且这种保护作用呈剂量依赖趋势。
关键词 阿魏酸甲酯；心肌缺血；缺氧损伤；线粒体；H9c2心肌细胞

Study on protective effects of methyl ferulate on mitochondria of H9c2 cardiomyocytes injured by hypoxia
YANG Zan，ZHOU Yi（College of Eco-Environmental Engineering，Qinghai University，Xining 810016，China）

ABSTRACT OBJECTIVE To investigate the effects of methyl ferulate （MF） on the mitochondrial function of H9c2
cardiomyocytes after hypoxia-induced injury. METHODS H9c2 cardiomyocytes were divided into normal group （no
administration，no modeling），hypoxia model group（modeling alone），MF high-dose，medium-dose and low-dose groups（40，
20，10 μmol/L）and positive control drug group（cyclosporin A， 1 μmol/L）. After drug pretreatment and inducing hypoxia-induced
injury，the levels of lactate dehydrogenase（LDH）， malondialdehyde（MDA），creatine kinase（CK）and adenosine triphosphate
（ATP）were tested. The intracellular reactive oxygen species（ROS），mitochondrial membrane potential（MMP），the opening of
mitochondrial membrane permeability transition pore （mPTP） were detected with flow cytometry. RESULTS Compared with
hypoxia model group，the levels of LDH，MDA，CK and ROS fluorescence intensity were decreased significantly in MF
high-dose，medium-dose and low-dose groups，while the level of ATP was increased significantly（P＜0.01 or P＜0.05）. The red/
green fluorescence intensity ratio of MMP and the green fluorescence intensity of mPTP were increased significantly（P＜0.01 or
P＜0.05）. CONCLUSIONS MF can reverse the levels of biochemical indexes in H9c2 cardiomyocyte after hypoxia-induced
injury，keep MMP stable，reduce the opening of mPTP，and has an obvious protective effect on the mitochondrial function of
H9c2 cardiomyocytes injured by hypoxia，and this protective effect is dose-dependent.
KEYWORDS methyl ferulate；myocardial ischemia；hypoxia-induced injury；mitochondria；H9c2 cardiomyocytes

目前，缺血性心脏病占居民疾病死因构成的40％以 体通过氧化磷酸化过程产生大量 ATP 用以维持心肌细
上，严重威胁着人类健康 。近年来，随着心肌缺血治疗 胞的舒张、收缩、离子泵功能 [6－7] 。心肌缺血过程会使线
[1]
的发展，研究者提出了“能量饥饿”的概念 ，认为能量代 粒体的结构和功能发生改变，导致线粒体自身稳态平衡
[2]
谢紊乱是缺血性心脏病发病过程中普遍存在的现象，激 遭到破坏，引起细胞内活性氧（reactive oxygen species，
发与扶持心肌内源性能量、使心脏重新恢复正常心肌代 ROS）增加，促发线粒体膜通透性转换孔开放，继而导致
谢模式、增强心肌细胞抗损伤能力，是保护心肌缺血的 电子传递链解偶联、线粒体膜电位下降、ATP 生成障
新选择 [2－4] 。心脏作为高耗能的器官，需要每日消耗大 碍 。因此，对线粒体功能的保护作用是药物抗心肌缺
[8]
量的三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP） 。线粒
[5]
血的重要研究方向。阿魏酸甲酯为本课题组前期从藏
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.82060731）；青海省 药复方三味檀香散中鉴定到的活性成分，其可以提高缺
科技计划项目（No.2019-ZJ-981Q）
氧损伤H9c2心肌细胞的存活率。本研究主要探讨阿魏
＊硕士研究生。研究方向：藏药药理学。电话：0971-5310086。
酸甲酯对缺氧损伤 H9c2 心肌细胞线粒体功能的影响，
E-mail：860197218@qq.com
以期在细胞层面明确阿魏酸甲酯对缺氧心肌细胞的保
# 通信作者：副教授，硕士生导师，博士。研究方向：藏药药理学。
电话：0971-5310086。E-mail：2013990028@qhu.edu.cn 护作用。

中国药房 2022年第33卷第1期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 ·13 ·