Page 67 - 《中国药房》2021年24期
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表 3 萝卜硫素对高糖诱导 HK-2 细胞中 p-mTOR、 表4 AMPK抑制剂/激动剂对经萝卜硫素作用后HK-2
p-AMPK、p-Akt、p-PI3K蛋白表达的影响(x±±s, 细胞中 p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K 蛋白
n=3) 表达的影响(x±±s,n=3)
Tab 3 Effects of sulforaphane on protein expression Tab 4 Effects of AMPK inhibitor/agonist on the pro-
of p-mTOR,p-AMPK,p-Akt and p-PI3K of tein expression of p-mTOR,p-AMPK,p-Akt
HK-2 cells induced by high glucose(x ±± s, and p-PI3K in HK-2 cells after treated with
n=3) sulforaphane(x±±s,n=3)
组别 p-mTOR p-AMPK p-Akt p-PI3K 组别 p-mTOR p-AMPK p-Akt p-PI3K
正常组 0.28±0.11 0.59±0.12 0.22±0.02 0.33±0.03 正常组 0.37±0.05 0.63±0.08 0.19±0.06 0.42±0.02
高糖组 0.83±0.22 * 0.10±0.01 * 0.68±0.10 * 0.75±0.07 * 高糖组 0.95±0.15 * 0.22±0.04 * 0.70±0.09 * 0.79±0.12 *
萝卜硫素低浓度组 0.78±0.14 # 0.14±0.02 # 0.60±0.07 # 0.65±0.02 # 萝卜硫素高浓度组 0.42±0.06 # 0.59±0.11 # 0.22±0.04 # 0.40±0.10 #
萝卜硫素中浓度组 0.63±0.06 #□ 0.38±0.03 #□ 0.42±0.08 #□ 0.45±0.05 #□ 萝卜硫素高浓度+compound C组 0.85±0.06 □ 0.30±0.07 □ 0.22±0.03 0.41±0.07
萝卜硫素高浓度组 0.35±0.05 #□ 0.50±0.06 #□ 0.38±0.02 #□ 0.39±0.04 #□ 阿卡地新组 0.38±0.04 # 0.65±0.13 # 0.69±0.06 0.72±0.11
厄贝沙坦组 0.30±0.80 # 0.52±0.10 # 0.28±0.05 # 0.35±0.06 #
#
注:与正常组比较,P<0.05;与高糖组比较,P<0.05;与萝卜硫
*
#
注:与正常组比较,P<0.05;与高糖组比较,P<0.05;与萝卜硫 □
*
素高浓度组比较,P<0.05
素低浓度组比较,P<0.05 * #
□
Note:vs. normal group, P<0.05;vs. high glucose group,P<
Note:vs. normal group, P<0.05;vs. high glucose group,P< □
#
*
0.05;vs. sulforaphane high concentration group,P<0.05
□
0.05;vs. sulforaphane low concentration group,P<0.05
3.5.2 PI3K/Akt信号通路 与高糖组比较,哌立福辛组
3.5 AMPK/mTOR、PI3K/Akt双信号通路作用的验证
细胞中 p-mTOR、p-Akt、p-PI3K 蛋白的表达量均显著降
与正常组比较,高糖组细胞中p-AMPK蛋白的表达 低(P<0.05);与萝卜硫素高浓度组比较,哌立福辛组细
量显著降低(P<0.05),p-mTOR、p-Akt、p-PI3K 蛋白的
胞中上述蛋白的表达量差异均无统计学意义(P>
表达量均显著升高(P<0.05)。与高糖组比较,萝卜硫
0.05)。与萝卜硫素高浓度组比较,萝卜硫素高浓度+
素高浓度组细胞中 p-AMPK 蛋白的表达量显著升高
SC79组细胞中p-mTOR、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量均
(P<0.05),p-mTOR、p-Akt、p-PI3K 蛋白的表达量均显
显著升高(P<0.05),p-AMPK蛋白的表达量差异无统计
著降低(P<0.05)。
学意义(P>0.05)。结果见图6、表5。
3.5.1 AMPK/mTOR信号通路 与高糖组比较,阿卡地
新 组 细 胞 中 p-AMPK 蛋 白 的 表 达 量 显 著 升 高(P< p-PI3K 85 kDa
0.05),p-mTOR 蛋白的表达量显著降低(P<0.05);与萝
卜硫素高浓度组比较,阿卡地新组细胞中上述蛋白的表 p-Akt 60 kDa
达量差异均无统计学意义(P>0.05)。与萝卜硫素高浓度
p-AMPK 64 kDa
组比较,萝卜硫素高浓度+compound C组细胞中p-AMPK
蛋白的表达量显著降低(P<0.05),p-mTOR蛋白的表达 p-mTOR 289 kDa
量显著升高(P<0.05),p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量差异
均无统计学意义(P>0.05)。结果见图5、表4。 GAPDH 36 kDa
p-PI3K 85 kDa 正常组 高糖组 萝卜硫素 萝卜硫素 哌立福辛组
高浓度组 高 浓 度 +
SC79组
p-Akt 60 kDa
图 6 Akt 抑制剂/激动剂对经萝卜硫素作用后 HK-2 细
p-AMPK 64 kDa 胞中 p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K 蛋白表
达影响的电泳图
p-mTOR 289 kDa
Fig 6 Electrophoretograms of the effects of Akt inhibi-
GAPDH 36 kDa tor/agonist on the protein expression of p-mTOR,
p-AMPK,p-Akt and p-PI3K in HK-2 cells after
正常组 高糖组 萝卜硫素 萝卜硫素 阿卡地新组
高浓度组 高 浓 度 +
compound treated with sulforaphane
C组
图5 AMPK抑制剂/激动剂对经萝卜硫素作用后HK-2 4 讨论
细胞中 p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K 蛋白 有研究表明,cyclin D1 作为细胞周期蛋白,可以正
表达影响的电泳图 向调控细胞周期,促进细胞由 G1期进入 S 期,从而促进
[14]
Fig 5 Electrophoretograms of the effects of AMPK in- 细胞增殖 。caspase-3是引起细胞凋亡的关键酶,可通
hibitor/agonist on the protein expression of 过促进细胞色素 C 释放入细胞质来激活 caspase 家族级
[15]
p-mTOR, p-AMPK, p-Akt and p-PI3K in 联反应,从而诱导细胞凋亡和炎症反应的发生 。
HK-2 cells after treated with sulforaphane Bcl-2、Bax 分别是 Bcl 家族中最主要的抗凋亡蛋白和促
中国药房 2021年第32卷第24期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 24 ·3005 ·