Page 67 - 《中国药房》2021年24期
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表 3   萝卜硫素对高糖诱导 HK-2 细胞中 p-mTOR、                   表4 AMPK抑制剂/激动剂对经萝卜硫素作用后HK-2
              p-AMPK、p-Akt、p-PI3K蛋白表达的影响(x±±s,                   细胞中 p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K 蛋白
              n=3)                                               表达的影响(x±±s,n=3)
        Tab 3 Effects of sulforaphane on protein expression  Tab 4 Effects of AMPK inhibitor/agonist on the pro-
               of p-mTOR,p-AMPK,p-Akt and p-PI3K of               tein expression of p-mTOR,p-AMPK,p-Akt
               HK-2 cells induced by high glucose(x ±± s,         and p-PI3K in HK-2 cells after treated with
               n=3)                                               sulforaphane(x±±s,n=3)
         组别           p-mTOR   p-AMPK    p-Akt   p-PI3K     组别                p-mTOR  p-AMPK  p-Akt  p-PI3K
         正常组         0.28±0.11  0.59±0.12  0.22±0.02  0.33±0.03  正常组         0.37±0.05  0.63±0.08  0.19±0.06  0.42±0.02
         高糖组         0.83±0.22 *  0.10±0.01 *  0.68±0.10 *  0.75±0.07 *  高糖组  0.95±0.15 *  0.22±0.04 *  0.70±0.09 *  0.79±0.12 *
         萝卜硫素低浓度组    0.78±0.14 #  0.14±0.02 #  0.60±0.07 #  0.65±0.02 #  萝卜硫素高浓度组  0.42±0.06 #  0.59±0.11 #  0.22±0.04 #  0.40±0.10 #
         萝卜硫素中浓度组    0.63±0.06 #□  0.38±0.03 #□  0.42±0.08 #□  0.45±0.05 #□  萝卜硫素高浓度+compound C组  0.85±0.06 □  0.30±0.07 □  0.22±0.03  0.41±0.07
         萝卜硫素高浓度组    0.35±0.05 #□  0.50±0.06 #□  0.38±0.02 #□  0.39±0.04 #□  阿卡地新组  0.38±0.04 #  0.65±0.13 #  0.69±0.06  0.72±0.11
         厄贝沙坦组       0.30±0.80 #  0.52±0.10 #  0.28±0.05 #  0.35±0.06 #
                                                                                              #
                                                               注:与正常组比较,P<0.05;与高糖组比较,P<0.05;与萝卜硫
                                                                            *
                                          #
           注:与正常组比较,P<0.05;与高糖组比较,P<0.05;与萝卜硫                          □
                        *
                                                           素高浓度组比较,P<0.05
        素低浓度组比较,P<0.05                                                          *                       #
                    □
                                                               Note:vs. normal group, P<0.05;vs. high glucose group,P<
           Note:vs. normal group, P<0.05;vs. high glucose group,P<                         □
                                                    #
                            *
                                                           0.05;vs. sulforaphane high concentration group,P<0.05
                                       □
        0.05;vs. sulforaphane low concentration group,P<0.05
                                                           3.5.2 PI3K/Akt信号通路       与高糖组比较,哌立福辛组
        3.5 AMPK/mTOR、PI3K/Akt双信号通路作用的验证
                                                           细胞中 p-mTOR、p-Akt、p-PI3K 蛋白的表达量均显著降
            与正常组比较,高糖组细胞中p-AMPK蛋白的表达                       低(P<0.05);与萝卜硫素高浓度组比较,哌立福辛组细
        量显著降低(P<0.05),p-mTOR、p-Akt、p-PI3K 蛋白的
                                                           胞中上述蛋白的表达量差异均无统计学意义(P>
        表达量均显著升高(P<0.05)。与高糖组比较,萝卜硫
                                                           0.05)。与萝卜硫素高浓度组比较,萝卜硫素高浓度+
        素高浓度组细胞中 p-AMPK 蛋白的表达量显著升高
                                                           SC79组细胞中p-mTOR、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量均
       (P<0.05),p-mTOR、p-Akt、p-PI3K 蛋白的表达量均显
                                                           显著升高(P<0.05),p-AMPK蛋白的表达量差异无统计
        著降低(P<0.05)。
                                                           学意义(P>0.05)。结果见图6、表5。
        3.5.1 AMPK/mTOR信号通路         与高糖组比较,阿卡地
        新 组 细 胞 中 p-AMPK 蛋 白 的 表 达 量 显 著 升 高(P<             p-PI3K                                     85 kDa
        0.05),p-mTOR 蛋白的表达量显著降低(P<0.05);与萝
        卜硫素高浓度组比较,阿卡地新组细胞中上述蛋白的表                             p-Akt                                     60 kDa
        达量差异均无统计学意义(P>0.05)。与萝卜硫素高浓度
                                                           p-AMPK                                      64 kDa
        组比较,萝卜硫素高浓度+compound C组细胞中p-AMPK
        蛋白的表达量显著降低(P<0.05),p-mTOR蛋白的表达                      p-mTOR                                     289 kDa
        量显著升高(P<0.05),p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量差异
        均无统计学意义(P>0.05)。结果见图5、表4。                           GAPDH                                      36 kDa
         p-PI3K                                    85 kDa          正常组     高糖组    萝卜硫素   萝卜硫素  哌立福辛组
                                                                                  高浓度组   高 浓 度 +
                                                                                          SC79组
          p-Akt                                    60 kDa
                                                           图 6   Akt 抑制剂/激动剂对经萝卜硫素作用后 HK-2 细
        p-AMPK                                     64 kDa        胞中 p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K 蛋白表
                                                                 达影响的电泳图
        p-mTOR                                     289 kDa
                                                           Fig 6 Electrophoretograms of the effects of Akt inhibi-
        GAPDH                                      36 kDa         tor/agonist on the protein expression of p-mTOR,
                                                                  p-AMPK,p-Akt and p-PI3K in HK-2 cells after
                正常组    高糖组    萝卜硫素   萝卜硫素  阿卡地新组
                              高浓度组   高 浓 度 +
                                     compound                     treated with sulforaphane
                                      C组
        图5 AMPK抑制剂/激动剂对经萝卜硫素作用后HK-2                        4 讨论
             细胞中 p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K 蛋白                 有研究表明,cyclin D1 作为细胞周期蛋白,可以正
             表达影响的电泳图                                      向调控细胞周期,促进细胞由 G1期进入 S 期,从而促进
                                                                    [14]
        Fig 5  Electrophoretograms of the effects of AMPK in-  细胞增殖 。caspase-3是引起细胞凋亡的关键酶,可通
              hibitor/agonist on the protein expression of  过促进细胞色素 C 释放入细胞质来激活 caspase 家族级
                                                                                                        [15]
              p-mTOR, p-AMPK, p-Akt and p-PI3K in          联反应,从而诱导细胞凋亡和炎症反应的发生 。
              HK-2 cells after treated with sulforaphane   Bcl-2、Bax 分别是 Bcl 家族中最主要的抗凋亡蛋白和促


        中国药房    2021年第32卷第24期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 24  ·3005 ·
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