Page 62 - 《中国药房》2021年24期

萝卜硫素对高糖诱导人肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响及机制 Δ

周 磊 ，艾 望，陈小娟，闻春月（武汉市中医医院肾病内科，武汉 430010）
＊

中图分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）24-3000-08
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.24.10

摘 要 目的：研究萝卜硫素对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2增殖和凋亡的影响，并初步探讨其作用机制。方法：将HK-2细
胞分为正常组、高糖组、厄贝沙坦组（阳性对照，1 μmol/L）和萝卜硫素低、中、高浓度组（10、20、40 μmol/L），正常组细胞用DMEM
完全培养基培养96 h，其余各组细胞均用高糖DMEM完全培养基（含40 mmol/L葡萄糖）培养48 h诱导细胞损伤后，再加入相应药
物继续培养48 h。检测各组细胞的存活率、凋亡率以及细胞中细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、胱天蛋白酶3（caspase-3）、B细胞淋巴
瘤2（Bcl-2）、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白（Bax）mRNA和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、磷酸化腺苷一磷酸活化蛋白
激酶（p-AMPK）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）蛋白的表达量。另将HK-2细胞分为正常组、高糖
组、萝卜硫素高浓度组（40 μmol/L）、阿卡地新组（AMPK激动剂，1 mmol/L）、萝卜硫素高浓度+compound C组（萝卜硫素40 μmol/L+
AMPK抑制剂compound C 40 μmol/L）、哌立福辛组（Akt抑制剂，19.95 μmol/L）、萝卜硫素高浓度+SC79组（萝卜硫素40 μmol/L+
Akt激动剂SC79 4 μmol/L），同法培养后，检测细胞中p-mTOR、p-AMPK、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量。结果：与正常组比较，高糖
组细胞的存活率以及细胞中 cyclin D1、Bcl-2 mRNA 和 p-AMPK 蛋白的表达量均显著降低（P＜0.05），凋亡率以及细胞中 cas-
pase-3、Bax mRNA和p-mTOR、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量均显著升高（P＜0.05）。与高糖组比较，萝卜硫素低、中、高浓度组和厄
贝沙坦组细胞上述指标均显著改善（P＜0.05），其中萝卜硫素中、高浓度组细胞上述指标的改善效果均显著优于萝卜硫素低浓度
组（P＜0.05）。与厄贝沙坦组比较，萝卜硫素高浓度组细胞上述指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。与萝卜硫素高浓度组比较，
阿卡地新组细胞中p-AMPK、p-mTOR蛋白和哌立福辛组细胞中p-mTOR、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量差异均无统计学意义（P＞
0.05）；萝卜硫素高浓度+compound C组细胞中p-AMPK蛋白的表达量显著降低（P＜0.05），p-mTOR蛋白的表达量显著升高（P＜
0.05）；萝卜硫素高浓度+SC79组细胞中p-mTOR、p-Akt、p-PI3K蛋白的表达量均显著升高（P＜0.05）。结论：萝卜硫素可促进高糖
诱导肾小管上皮细胞增殖，抑制其凋亡，其机制可能与上调p-AMPK表达，下调p-mTOR、p-Akt、p-PI3K表达有关。
关键词 萝卜硫素；高糖；人肾小管上皮细胞；磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路；腺苷一磷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕
霉素靶蛋白信号通路；增殖；凋亡

用的研究[J].生物化工，2018，4（3）：11-12，15. 2013，40（18）：132-133.
[ 8 ] XIE Y，JIANG Z W，YANG R，et al. Polysaccharide-rich [14] 龚千锋.中药炮制学[M]. 4 版.北京：中国中医药出版社，
extract from Polygonatum sibiricum protects hematopoiesis 2016：313．
in bone marrow suppressed by triple negative breast can- [15] 张亨柱.黄精炮制品功效差异初探[J].海峡药学，2019，31
cer[J]. Biomed Pharmacother，2021，137：111338. （6）：36-39.
[ 9 ] YI Y X，WU S X，YE M S，et al. Effect of Aβ 1-42 injection [16] 吴建华，张涓，崔於.黄精炮制工艺的研究进展[J].川北医
on hippocampus cells in rats and protective role of polygo- 学院学报，2013，28（1）：27-30.
na-polysaccharose for Alzheimer’s disease[J]. Zhong Nan [17] 陈丽霞，王建科，耿晓玲.综合评分法优选黄精蒸制工
Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban，2014，39（4）：344-348. 艺[J].微量元素与健康研究，2017，34（5）：38-40.
[10] MU C L，SHENG Y F，WANG Q，et al. Potential com- [18] 孙秀梅，栾妮娜，张兆旺.黄精饮片 3 种蒸制工艺的比
pound from herbal food of rhizoma polygonati for treat- 较[J].山东中医药大学学报，2010，34（6）：542-543.
ment of COVID-19 analyzed by network pharmacology： [19] 瞿昊宇，冯楚雄，谢梦洲，等.不同炮制方法对黄精多糖含
viral and cancer signaling mechanisms[J]. J Funct Foods， 量的影响[J].湖南中医药大学学报，2015，35（12）：53-55.
[20] 钟凌云. 中药炮制学[M]. 5版.北京：中国中医药出版社，
2021，77：104149.
2021：299-300.
[11] 王聪.多花黄精多糖提取分离、分子量测定及其粗多糖的
初步药效研究[D].成都：成都中医药大学，2012. [21] 李艳辉.无机及分析化学实验[M]. 3版.南京：南京大学出
版社，2019：245.
[12] 张志君，孙伟，李永亮，等. 3，5-二硝基水杨酸法联合苯
[22] 吴丰鹏，李芹英，吴彦超，等.九蒸九制对黄精多糖单糖组
酚-浓硫酸法测定不同产地黄精中多糖含量[J].中国实验
成及其抗氧化性的影响[J].食品工业科技，2021，42（2）：
方剂学杂志，2012，18（6）：106-109.
42-46.
[13] 蓝松.苯酚-硫酸法测定黄精多糖含量研究[J].广东化工，
[23] 颜艳，王彤.医学统计学[M]. 5版.北京：人民卫生出版社，
Δ 基金项目：湖北省自然科学基金知识创新专项（No.2019CFA016） 2020：256．
＊主治医师，硕士。研究方向：中西医结合治疗慢性肾脏疾病。 （收稿日期：2021-08-04 修回日期：2021-11-24）
E-mail：289760353@qq.com （编辑：陈 宏）

·3000 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 24 中国药房 2021年第32卷第24期