Page 70 - 《中国药房》2021年22期

表 3 TEN 对 APP/PS1 小鼠脑组织线粒体中 LC3、p62、Cathepsin D、Rab7、PINK1、Parkin mRNA 表达量的影响
（x±±s，n＝7）
Tab 3 Effects of TEN on mRNA expressions of LC3，p62，Cathepsin D，Rab7，PINK1 and Parkin in brain mito-
chondria of APP/PS1 mice（x±±s，n＝7）
组别 LC3 p62 Cathepsin D Rab7 PINK1 Parkin
正常对照组 0.997±0.030 1.003±0.026 1.036±0.145 1.005±0.023 1.024±0.096 1.022±0.130
模型组 1.353±0.057 ＊＊ 2.214±0.208 ＊＊ 0.838±0.024 ＊ 0.759±0.029 ＊＊ 1.266±0.039 ＊ 1.727±0.035 ＊＊
TEN低剂量组 1.523±0.032 # 1.965±0.070 1.157±0.037 # 1.367±0.050 ## 1.394±0.143 1.926±0.048
TEN中剂量组 1.843±0.044 ## 1.596±0.016 ## 1.238±0.031 # 1.667±0.041 ## 1.532±0.061 # 2.476±0.135 ##
TEN高剂量组 1.794±0.036 ## 1.813±0.026 # 1.421±0.063 ## 1.527±0.030 ## 1.480±0.013 # 2.322±0.162 #
TEN中剂量+3-MA组 1.261±0.059 ΔΔ 2.320±0.156 ΔΔ － － 1.308±0.012 Δ 1.790±0.031 ΔΔ
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注：与正常对照组比较，P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01；与TEN中剂量组比较，P＜0.05，P＜0.01；“－”表示未检测
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Note：vs. normal control group，P＜0.05， P＜0.01；vs. model group，P＜0.05，P＜0.01；vs. TEN medium-dose group， P＜0.05， P＜0.01；
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“－”means not detected
[20]
LC3-Ⅰ 14 kDa 变化，包括线粒体自噬功能障碍等 。大量文献报道，
LC3-Ⅱ 16 kDa
线粒体异常和突触功能障碍的存在是 Aβ蛋白聚集或
p62 62 kDa
Tau 磷酸化的起因 [21－23] ，且线粒体自噬途径受损可能导
β-actin 42 kDa 致AD的发生 [24－25] 。
正常对 模型组 TEN低 TEN中 TEN高 TEN 中 LC3 是自噬体膜上的标志蛋白。在自噬体形成过
照组 剂量组 剂量组 剂量组 剂量+3-
MA 组 程中，Atg4 蛋白酶在新合成 LC3 的羧基端进行剪切，生
A. LC3、p62蛋白
成LC3-Ⅰ，随后LC3-Ⅰ通过Atg7和Atg3参与的泛素样
PINK1 63 kDa
反应与磷脂酰乙醇胺结合，形成脂质化形式的LC3-Ⅱ并
Parkin 52 kDa
附着于自噬体膜表面，LC3-Ⅱ是形成完整自噬体过程中
42 kDa 必不可少的关键因子，因此LC3-Ⅱ常作为自噬体的标志
β-actin
正常对 模型组 TEN低 TEN中 TEN高 TEN 中 物，而 LC3-Ⅱ与 LC3-Ⅰ的比值则被用来衡量自噬体的
照组 剂量组 剂量组 剂量组 剂量+3-
[26]
MA 组 形成情况 。p62能够同自噬体膜上的LC3结合形成一
B. PINK1、Parkin蛋白
个完整的自噬小体，随后溶酶体会与包裹着目标线粒体
图 2 TEN 对 APP/PS1 小鼠脑组织线粒体中 LC3、p62、 的自噬小体融合，形成自噬-溶酶体，最后被溶酶体内的
PINK1、Parkin蛋白表达影响的电泳图
[27]
蛋白水解酶降解，p62随即被一同降解 。由此可见，一
Fig 2 Electrophoretic maps of the effects of TEN on
个完整的自噬过程包括自噬体的形成和自噬体的清除，
protein expressions of LC3，p62，PINK1 and
自噬的强弱与LC3成正比，与p62成反比。如果LC3和
Parkin in brain mitochondria of APP/PS1 mice
p62表达同时增加，只能表明自噬体已形成，但并未被正
表 4 TEN 对 APP/PS1 小鼠脑组织线粒体中 LC3、p62、
常降解，即包裹异常线粒体的自噬体没有被机体清除。
PINK1、Parkin蛋白表达的影响（x±±s，n＝7）
有研究提示，提高APP/PS1小鼠空间学习记忆能力可能
Tab 4 Effects of TEN on protein expressions of LC3， 与调节LC3和p62相关的自噬水平有关 [28－29] 。本研究结
p62，PINK1 and Parkin in brain mitochondria 果显示，模型组小鼠神经元内LC3的阳性分布以及脑组
of APP/PS1 mice（x±±s，n＝7） 织线粒体中 LC3、p62 mRNA 及其蛋白的表达量均显著
组别 LC3 p62 PINK1 Parkin 高于正常对照组，表明APP/PS1小鼠脑组织线粒体中自
正常对照组 0.892±0.036 0.954±0.017 0.828±0.015 1.593±0.022 噬体有所增加，但自噬体没有得到较好的降解；经高剂
模型组 1.182±0.093 ＊＊ 1.260±0.013 ＊＊ 1.234±0.030 ＊＊ 2.507±0.296 ＊＊
TEN低剂量组 1.402±0.037 # 0.798±0.009 ## 1.608±0.070 ## 2.081±0.141 # 量TEN干预后，APP/PS1小鼠神经元内LC3的阳性分布
TEN中剂量组 1.240±0.118 0.758±0.035 ## 1.797±0.023 ## 3.414±0.062 ## 以及脑组织线粒体中 LC3 mRNA 及其蛋白的表达量均
TEN高剂量组 1.482±0.074 ## 0.851±0.038 ## 1.083±0.020 # 3.034±0.151 #
TEN中剂量+3-MA组 0.999±0.086 Δ 0.991±0.070 ΔΔ 0.846±0.045 ΔΔ 1.722±0.039 ΔΔ 显著高于模型组，而p62 mRNA及其蛋白的表达量均显
著低于模型组，表明 TEN 加快了自噬体的降解，使受损
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注：与正常对照组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜
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0.01；与TEN中剂量组比较，P＜0.05，P＜0.01 线粒体得以清除；而自噬抑制剂3-MA和TEN的共同干
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Note：vs. normal control group， P＜0.01；vs. model group，P＜ 预结果表明，在线粒体自噬被抑制的情况下，TEN 的上
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0.05，P＜0.01；vs. TEN medium-dose group，P＜0.05，P＜0.01 述作用也会受到抑制。
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[19]
效的治疗药物已经成为医药界研究的难点与热点 。 已有研究表明，溶酶体功能以及溶酶体与自噬小体
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近年来研究者们发现，AD 的发病机制涉及多种病理学 的融合是影响线粒体自噬的重要因素 。溶酶体内主
·2752 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22 中国药房 2021年第32卷第22期