Page 75 - 《中国药房》2021年22期

并两次滤液，蒸干，残渣用20％甲醇（含5％乙酸）复溶并 200
180 5
定容于25 mL量瓶中，经0.45 µm微孔滤膜滤过，即得。 160
140
2.1.4 精密度试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号 120
mV
S1），按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录色 U， 100
80
谱图。以吗啡的色谱峰为参照，计算各共有峰的相对保 60
40 6 11
留时间和相对峰面积。结果显示，13个共有峰相对保留 13
20 1 2 4 7 10
3 8 9 12
时间的RSD 均小于1.0％（n＝6），相对峰面积的RSD 均 0
0 20 40 60 80
小于2.0％（n＝6），表明方法精密度良好。
t，min
2.1.5 重复性试验 精密称取罂粟壳药材样品粉末（编 图2 罂粟壳的对照指纹图谱
号 S1）0.5 g，共 6 份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶 Fig 2 Reference fingerprint of Papaveris Pericarpium
液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。 号峰为吗啡、6 号峰为可待因、10 号峰为蒂巴因、12号峰
以吗啡的色谱峰为参照，计算各共有峰的相对保留时间 为罂粟碱、13 号峰为那可丁，保留时间分别为 28.086、
和相对峰面积。结果显示，13个共有峰相对保留时间的 36.491、55.001、70.744、75.629 min。由于吗啡为罂粟壳
RSD 均小于 1.0％（n＝6），相对峰面积的 RSD 均小于 的主要成分，且其色谱峰出峰稳定，故选择其为参照峰，
2.0％（n＝6），表明方法重复性良好。 计算其他共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果
2.1.6 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号 显示，15 批罂粟壳药材共有峰相对保留时间的 RSD 为
S1），分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1”项 0～0.47％，相对峰面积的RSD为0～2.11％。
下色谱条件进样测定，记录色谱图。以吗啡的色谱峰为 200
参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结 180
160
果显示，13个共有峰相对保留时间的RSD 均小于1.0％ 140 5
120
（n＝6），相对峰面积的RSD 均小于2.0％（n＝6），表明供 mAU 100
80
60 6
试品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。 40 13
20 10 12
2.1.7 HPLC 指纹图谱的建立 精密称取 15 批罂粟壳 0
药材样品粉末各0.5 g，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶 20 40 60 80
t，min
液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图并 A.混合对照品溶液
导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》进 200
180 5
行分析，以S1样品的色谱图为参照图谱，以中位数法生 160
140
120
成对照图谱（R），设定时间窗宽度为 0.2 s，经多点校正、 mAU 100
自动匹配后生成对照指纹图谱和15 批罂粟壳药材样品 80
60
40 6
的叠加指纹图谱。结果显示，15批罂粟壳药材样品中共 20 10 12 13
0
有13 个共有峰。15 批罂粟壳药材样品的叠加指纹图谱
20 40 60 80
和对照指纹图谱见图1、图2。 t，min
B.供试品溶液（编号S1）
5
440 200
400 180
360 6 11 160
320 1 2 3 4 7 8 9 10 12 13 140
280 120
mV 240 100
U， 200 mAU 80
160
120 60
80 40
40 20
0 0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 20 40 60 80
t，min t，min
图1 15批罂粟壳药材样品的HPLC叠加指纹图谱 C.空白溶液
Fig 1 HPLC superimposed fingerprint of 15 batches 注：5.吗啡；6.可待因；10.蒂巴因；12.罂粟碱；13.那可丁
Note：5. morphine；6. codeine；10. thebaine；12. papaverine；13.
of Papaveris Pericarpium
narcotine
2.1.8 共有峰的指认 经与混合对照品（取“2.1.2”项下 图3 系统适用性试验的HPLC图
混合对照品溶液同法测定所得，图3A）进行比对，指认5 Fig 3 HPLC chromatograms of system suitability test

中国药房 2021年第32卷第22期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22 ·2757 ·