Page 68 - 《中国药房》2021年20期
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基反应 ，由此初步判断 PEG 已成功接枝于 PLGA。在 主峰与杂质峰均能达到基线分离，阴性对照对测定无干
[8]
图1B中，1.65、5.10 ppm 处的峰来自于 PLGA 中—CH 和 扰。结果见图2。
—CH3的质子；PEG 中的—CH2—特征峰位于 3.65 ppm 300 60
DTX DTX
处，而 GA 中—CH2—的特征峰位于4.78 ppm处，代表了
200 40
PLGA 和 PEG 的共轭片段。与 PEG 和 PLGA 相关特征 mAU mAU
100 20
峰的存在证实了聚合反应后共聚物的结构特征，提示
PELGE合成成功。 0 0
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
100 t，min t，min
90 A.对照品 B.供试品
80
60
％ 70
T， 60 40
50 mAU
40
20
30
4 000 3 000 2 000 1 000 0 6 5 4 3 2 1 0
0
λ，cm －1 δ，ppm
1
A. IR光谱 B. H-NMR 0 2 4 6 8
t，min
图1 PELGE的鉴定图谱 C.阴性对照
Fig 1 Identification spectra of PELGE 图2 DTX对照品、供试品及阴性对照的HPLC图
2.2 DTX-PELGE-NPs的制备 Fig 2 HPLC chromatograms of DTX control，test
采用乳化溶剂挥发法制备DTX-PELGE-NPs。称取 sample and negative control
DTX原料药 2.0 mg、“2.1”项下PELEG 20 mg，加乙酸乙 2.3.4 线性关系考察 精密量取“2.3.2（1）”项下对照品
酯-丙酮混合溶剂（5 ∶ 1，V/V）5 mL 使溶解，作为油相，探 溶液，加甲醇稀释，制得DTX质量浓度分别为2.5、5、10、
头超声（功率200 W，工作5 s，间歇5 s，下同）1 min，将水 20、40、50 μg/mL的系列线性溶液，按“2.3.1”项下色谱条
5 mL缓慢均匀加入油相，形成油包水型初乳；将上述初 件进样测定，记录色谱图。以DTX质量浓度（C）为横坐
乳加入至含有泊洛沙姆 188 0.5 g 的水相 5 mL 中，再次 标、峰面积（A）为纵坐标进行线性回归。结果显示，DTX
探头超声 1 min 后，于 40 ℃真空旋转蒸发 1 h 以除去乳 的回归方程为 A＝17.626C－8.354（R ＝0.999 6），表明
2
液中的有机溶剂，经 0.22 µm 微孔滤膜滤过，即得 DTX- DTX在2.5～50 μg/mL线性范围内与峰面积成良好的线
PELGE-NPs（含 DTX 0.2 mg/mL、PELGE 2 mg/mL、泊洛 性关系。
沙姆188 5％）。同法制备不含DTX的PELGE-NPs。 2.3.5 精密度试验 精密量取“2.3.2（1）”项下对照品溶
2.3 DTX的含量测定 液，加甲醇稀释，制得 DTX 质量浓度分别为 5、20、40
2.3.1 色谱条件 以 Kromasil C18 （200 mm×4.6 mm， μg/mL 的样品溶液，按“2.3.1”项下色谱条件于 1 d 内分
5 μm）为色谱柱，以乙腈-水（60 ∶ 40，V/V）为流动相；检测 别重复进样测定6次，记录峰面积，考察日内精密度；再
波长为 228 nm；流速为 1.0 mL/min；柱温为 25 ℃；进样 连续 3 d 共 6 次进样测定，记录峰面积，考察日间精密
量为20 μL。 度。结果显示，3个质量浓度样品溶液的日内RSD分别
2.3.2 溶液的制备 （1）对照品溶液：精密称取 DTX 对 为1.73％、1.56％、1.13％（n＝6），日间RSD分别为1.01％、
照品 10.15 mg，置于 100 mL 量瓶中，加入甲醇溶解并定 0.97％、1.21％（n＝6），表明仪器精密度良好。
容，制成质量浓度为 101.5 μg/mL 的对照品溶液。（2）供 2.3.6 重复性试验 取“2.2”项下 DTX-PELGE-NPs 溶
试品溶液：取“2.2”项下 DTX-PELGE-NPs 溶液 1 mL，加 液，共6份，按“2.3.2（2）”项下方法制备供试品溶液，再按
入甲醇稀释并定容至10 mL，超声处理3 min破乳后，经 “2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲
0.22 μm 微孔滤膜滤过，取滤液，即得。（3）阴性对照溶 线法计算含量。结果显示，DTX 含量的 RSD 为 1.36％
液：取“2.2”项下 PELGE-NPs 溶液 1 mL，按上述供试品 （n＝6），表明方法重复性良好。
溶液的制备方法处理，即得。 2.3.7 稳定性试验 精密量取“2.3.2（2）”项下供试品溶
2.3.3 专属性考察 分别取“2.3.2”项下对照品溶液、供 液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按“2.3.1”项
试品溶液、阴性对照溶液适量，按“2.3.1”项下色谱条件 下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，DTX 峰
进样测定，记录色谱图。结果显示，DTX 的保留时间约 面积的RSD为0.61％（n＝6），表明供试品溶液于室温条
为 5.8 min，而阴性对照溶液在对应时间点无色谱峰出 件下放置24 h内稳定性良好。
现；待测成分峰与相邻色谱峰间的分离度均大于 1.5，且 2.3.8 回收率试验 精密量取“2.3.2（1）”项下对照品溶
·2494 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20 中国药房 2021年第32卷第20期
