Page 63 - 《中国药房》2021年20期

故需在拟定方法时对其作出限定，限定流速为 1.0 终Ris。结果见表9。
mL/min。结果见表6。 表8 不同条件下新落新妇苷等5种成分的Ris
Tab 8 Relative retention time of 5 components as neo-
表5 不同柱温条件下新落新妇苷等5种成分的fsi
Tab 5 Relative correction factors of 5 components as astilbin under different conditions
neoastilbin under different column tempera- 相对保留时间
影响因素 条件 新落新 新异落 异落新
tures 槲皮苷 黄杞苷
妇苷 新妇苷 妇苷
柱温，℃ 新落新妇苷 新异落新妇苷 异落新妇苷 槲皮苷 黄杞苷 仪器 Agilent 1260型HPLC仪 0.907 8 1.190 9 1.275 2 1.464 8 1.640 7
30 1.278 0 1.215 0 0.942 4 0.819 8 1.160 3 Agilent 1100型HPLC仪 0.907 1 1.195 9 1.283 9 1.480 9 1.646 7
35 1.238 4 1.207 2 0.949 5 0.800 2 1.131 3 Waters 2690型HPLC仪 0.910 1 1.189 0 1.274 5 1.463 2 1.633 6
40 1.235 0 1.202 4 0.954 4 0.796 7 1.121 2 Ultimate 3000型HPLC仪 0.909 0 1.187 9 1.272 3 1.459 4 1.631 5
平均值 1.250 5 1.208 2 0.948 8 0.805 6 1.137 6 平均值 0.908 5 1.190 9 1.276 5 1.467 1 1.638 1
RSD，％ 1.91 0.53 0.64 1.55 1.78 RSD，％ 0.14 0.30 0.40 0.65 0.42
色谱柱 phenomenex SuperLu C18 0.910 1 1.189 0 1.274 5 1.463 2 1.633 6
表6 不同流速条件下新落新妇苷等5种成分的fsi
Agilent 5 TC-C18 （2） 0.908 7 1.280 8 1.379 3 1.439 1 1.605 3
Tab 6 Relative correction factors of 5 components as CAPCELL MGⅢ 0.904 5 1.205 3 1.296 0 1.477 6 1.657 1
neoastilbin under different flow rates 平均值 0.907 8 1.225 0 1.3166 1.460 0 1.632 0
RSD，％ 0.32 4.00 4.20 1.33 1.59
流速，mL/min 新落新妇苷 新异落新妇苷 异落新妇苷 槲皮苷 黄杞苷 柱温，℃ 30 0.910 1 1.189 0 1.274 5 1.463 2 1.633 6
0.8 1.320 5 1.204 2 0.919 7 0.738 2 1.118 3 35 0.914 5 1.178 3 1.261 9 1.440 4 1.675 7
1.0 1.278 0 1.215 0 0.942 4 0.819 8 1.160 3 40 0.919 4 1.166 6 1.248 1 1.415 1 1.576 8
1.2 1.182 8 1.219 7 1.045 2 0.805 4 1.230 7 平均值 0.914 7 1.177 9 1.261 5 1.439 6 1.628 7
平均值 1.260 4 1.213 0 0.969 1 0.787 8 1.169 8 RSD，％ 0.51 0.95 1.05 1.67 3.05
RSD，％ 5.60 0.65 6.90 5.53 4.86
流速，mL/min 0.8 0.909 0 1.189 1 1.274 3 1.461 9 1.634 8
2.9.6 不同检测波长对fsi的影响 取“2.2.1”项下混合对 1.0 0.910 1 1.189 0 1.274 5 1.463 2 1.633 6
1.2 0.909 4 1.185 7 1.267 5 1.467 2 1.636 5
照品溶液（Ⅰ）适量，按“2.1”项下色谱条件进样测定，分
平均值 0.909 5 1.187 9 1.272 1 1.464 1 1.635 0
别考察不同检测波长对新落新妇苷等 5 种成分 fsi的影 RSD，％ 0.06 0.16 0.31 0.19 0.09
响。结果显示，各成分fsi的RSD均小于5％，表明检测波 检测波长nm， 254、291 0.909 0 1.189 2 1.274 9 1.811 3 1.973 3
252、289 0.910 1 1.187 2 1.271 6 1.814 6 1.978 7
长对各成分fsi的影响较小。结果见表7。
254、293 0.909 8 1.188 7 1.273 7 1.815 4 1.977 8
表7 不同检测波长条件下新落新妇苷等5种成分的fsi 平均值 0.909 7 1.188 4 1.273 4 1.813 8 1.976 6
Tab 7 Relative correction factors of 5 components as RSD，％ 0.06 0.09 0.13 0.12 0.15
neoastilbin under different detection wave- 表9 新落新妇苷等5种成分的fsi和Ris
lengths Tab 9 Relative correction factors and relative reten-
tion time of 5 components as neoastilbin
检测波长，nm 新落新妇苷 新异落新妇苷 异落新妇苷 槲皮苷 黄杞苷
254、291 1.278 0 1.215 0 0.942 4 0.819 8 1.160 3 指标 新落新妇苷 新异落新妇苷 异落新妇苷 槲皮苷 黄杞苷
252、289 1.213 7 1.216 1 0.961 1 0.826 8 1.154 5 fsi 1.252 6 1.198 3 0.958 6 0.807 1 1.138 1
254、293 1.243 0 1.224 3 0.940 7 0.810 7 1.136 8 Ris 0.910 0 1.195 4 1.281 5 1.458 3 1.634 6
平均值 1.244 9 1.218 4 0.948 1 0.819 1 1.150 5 2.10 外标法与QAMS法的含量测定结果
RSD，％ 2.59 0.42 1.19 0.98 1.06
取 9 批罗汉茶样品，按“2.2.2”项下方法制备供试品
2.9.7 待测成分色谱峰的定位 对待测成分色谱峰的
溶液，以落新妇苷为内参物，通过 fsi分别计算新落新妇
准确定位是实现 QAMS 的前提。一般而言，色谱峰的
苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、槲皮苷和黄杞苷的含
定位有两种方式，即相对保留时间（Ris）和保留时间差
量。同时，采用外标法测定上述供试品溶液中新落新妇
（ΔRis ），QAMS 待测成分色谱峰一般采用前者进行定 苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、槲皮苷和黄
位 [11－15] 。在参考上述文献的基础上，本研究分别考察了
杞苷的含量。结果显示，两种方法含量测定结果的相对
不同仪器、色谱柱、柱温、流速和检测波长等条件对新落 偏差（RD）均不高于3.55％，表明两种方法的测定结果无
新妇苷等5种成分峰Ris的影响。结果显示，上述条件变 明显差异。结果见表10。
化对各成分Ris的影响较小（RSD＜5％）。结果见表8。 2.11 聚类分析
2.9.8 fsi与Ris的确定 由于流速对新落新妇苷等5种成 采用SPSS 22.0软件，以9批罗汉茶样品中6种待测
分的fsi影响较大（其中3种成分的RSD＞5％），故剔除流 成分的峰面积为变量，通过组间连接聚类法，以平方欧
速因素，取其余各影响因素下 fsi 的平均值作为最终的 氏距离为度量标准进行聚类分析。结果显示，当类间距为
fsi。由于不同色谱系统条件对 Ris均有影响，但影响均不 20时，9批罗汉茶样品可聚为两类，其中S8聚为一类、其余
大（RSD＜5％），故取各影响因素下 Ris的平均值作为最 聚为一类，表明分类结果与采集地相关。结果见图2。

中国药房 2021年第32卷第20期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20 ·2489 ·