Page 70 - 《中国药房》2021年20期

2.6.2 形态观察 按“2.5.4”项下最优处方制备 DTX-
90 90
88 88
％ 86 ％ 86 PELGE-NPs，取 1 mL，加水稀释 50 倍后，滴加在覆盖碳
包封率， 84 包封率， 84 膜的铜网上，静态吸附 10 min，用 2％磷钨酸溶液染色
82
82
80
78 80 40 s，用滤纸吸干多余液体后，采用透射电镜观察其形
78
0.10 50.00 0.10 5.00
0.08 32.00 41.00 0.08 4.10 态。结果显示，DTX-PELGE-NPs 呈类球形，大小均一，
0.06 23.00 0.06 2.30 3.20
0.03
C， ％ 14.00 B， mg C， ％ 0.03 1.40 A， mg 表面光滑，且粒度在80 nm左右，与“2.6.1”项下粒度测定
0.01 5.00 0.01 0.50
A.因素B与因素C B.因素A与因素C
结果基本一致。结果见图4C。
90 2.6.3 体外释放度的考察 采用离心超滤法进行考
88
％ 86 察。取 DTX 注射液和按“2.5.4”项下最优处方制备的
包封率， 84 DTX-PELGE-NPs 各1 mL，分别置于透析袋中并扎紧袋
82
80
78
子两端，将透析袋置于含有 0.5％且浓度为 1 mol/mL 吐
50.00 5.00
41.00 4.10 温-80的磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4）400 mL中，于37 ℃
32.00 3.20
23.00 2.30
B， mg 14.00 1.40 A， mg
5.00 0.50 条件下持续振荡（100 r/min），分别于 0、0.5、1、2、4、6、8、
C.因素A与因素B
12、24、36、48 h 时取透析液 1 mL（同时补加同温等量上
图3 各影响因素交互作用对包封率的三维响应图
述PBS）。实验重复3次，按“2.3.1”项下色谱条件进样测
Fig 3 Three-dimensional response plots of influential
factors interaction to entrapped efficiency 定，记录峰面积并按公式计算累积释放率：累积释放率
n－1
最优处方制备3批DTX-PELGE-NPs进行验证。结果显 （％）＝[cn×V+∑ci×V i]/WDTX×100％。式中，WDTX表示透析
i＝1
示 ，DTX-PELGE-NPs 的 包 封 率 为（86.79 ± 1.32）％
袋中DTX的总含量；V i表示每次吸取透析液的体积；V表
（RSD＝1.52％，n＝3），载药量为（10.21±0.78）％。与模
示缓冲液的总体积；ci、cn表示DTX的浓度，其中i、n为取
型包封率预测值的偏差较小（0.36％），表明所得最优处
样次数。结果显示，DTX-PELGE-NPs 的释放速率比
方稳定、可行。
DTX注射液慢：DTX注射液在4 h时的累积释放率约为
2.6 DTX-PELGE-NPs的体外评价
92.3％，已接近完全释放；DTX-PELGE-NPs 在 36 h 时的
2.6.1 粒度和 Zeta 电位的测定 按“2.5.4”项下最优处
累积释放率约为78.6％，趋近完全释放，之后逐渐到达稳
方制备DTX-PELGE-NPs，加水稀释，采用激光粒度分析
定。可见，两者的释药行为存在明显差异，DTX-PELGE-
仪于 25 ℃、测量角 90 °条件下测定粒度和 Zeta 电位，重
NPs 的释放曲线平缓，无突然释放现象；相比于 DTX 注
复测定 3 次，并通过多分散性指数（PDI）分析粒度的均
射液，DTX-PELGE-NPs 显示出了明显的缓慢释放效
匀程度。结果显示，DTX-PELGE-NPs 的平均粒度为
果。结果见图5。
（78.4±2.9）nm，PDI为（0.187±0.018），Zeta电位（－20.6±
1.5）mV（n＝3）。粒度和 Zeta 电位分布图形均为对称单 120 DTX注射液
DTX-PELGE-NPs
100
峰，峰形较窄，且PDI值较低，表明纳米粒的粒度和电位 ％ 80
分布均匀。结果见图4A、图4B。 累积释放率， 60
14 200 000 40
12 20
10 150 000
％
％ 8
强度， 6 强度， 100 000 0
4 50 000 0 10 20 30 40 50
2
0 0 时间，h
0.1 1 10 100 1 000 10 000 －200 －100 0 100 200 图 5 DTX 注 射 液 和 DTX-PELGE-NPs 的 体 外 释 放
粒度，nm Zeta电位，mV
A.粒度分布 B. Zeta电位图 曲线
Fig 5 Release curves of DTX injection and DTX-
PELGE-NPs in vitro
2.7 体外抗肿瘤活性的评价
50 nm 采 用 MTT 法 考 察 DTX 注 射 液 、PELGE-NPs 和
C.透射电镜图（×20 000） DTX-PELGE-NPs 对人乳腺癌细胞 MCF-7 的细胞毒性
图4 DTX -PELGE-NPs的表征 作用。选取处于对数生长期的人乳腺癌细胞MCF-7，用
Fig 4 Characterization of DTX-PELGE-NPs 含 10％胎牛血清和 1％青霉素的 RPMI 1640 培养基（以

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