Page 60 - 《中国药房》2021年20期

astilbin，neoisoastilbin，isoastilbin，quercitrin and engeletin were 0.367 2-1.925 3，46.361 1-126.342 1，0.138 1-0.798 8，2.966 2-8.857 8，
4.642 5-11.523 3，0.970 6-12.641 9 mg/g，respectively. Relative errors of two methods was lower than or equal to 3.55％. The results
of cluster analysis showed that 9 batches of samples could be clustered into two categories；S8 sample was one category and others
were one category. The results of principal component analysis showed that accumulative contribution rate of former 2 principle
components was 84.745％，and the results of sample classification were consistent with those of cluster analysis. CONCLUSIONS：
The established HPLC-QAMS method is accurate，feasible and repeatable，and can be used for simultaneous determination of 6
flavonoids in E. roxburghiana，and it can provide reference for quality control.
KEYWORDS Engelhardia roxburghiana；HPLC；QAMS；Flavonoids；Content；Cluster analysis；Principle component analysis

罗汉茶即黄杞叶，为胡桃科黄杞属植物黄杞 Engel- 工作站（美国Agilent公司），2690型HPLC仪及配套的分
hardtia roxburghiana Wall.的干燥叶。该药收载于《广西 离单元、二极管阵列检测器、Empower 3 色谱工作站（美
壮族自治区壮药质量标准（第2卷）》（2011年版） 、《广 国Waters公司），Ultimate 3000型HPLC仪及配套的分离
[1]
[2]
西中药材标准（第2册）》 ，具有清热解毒、生津解渴、解 单元、二极管阵列检测器、Chromeleon 7色谱工作站（美
[3]
暑利湿的功效 。广西壮医常将罗汉茶用于治疗感冒、 国 Dionex 公司），Milli-Q Advantage A10 型纯水处理器
[1]
发热、食滞、咽炎 。以罗汉茶药材为原料的成方制剂罗 （美国 Millipore 公司），KQ-500DA 型超声清洗器（江苏
汉茶化浊颗粒具有清热化浊、通胀活血的功效，可用于 昆山市超声仪器有限公司），CP224S 型电子分析天平
高脂血症的辅助治疗，现收载于国家药品标准 WS6015 （德国 Sartorius 公司），XS205 型电子分析天平（瑞士
[4]
（B-1015）-2014Z 。现代药理研究表明，罗汉茶的药理 Mettler Toledo公司）等。
活性成分主要为黄杞叶总黄酮、黄杞苷、落新妇苷、槲皮 1.2 药品与试剂
[3]
苷等黄酮类成分 ，其中以落新妇苷、黄杞苷、槲皮苷的 落 新 妇 苷 对 照 品（批 号 111798-201504，纯 度
含量较高，均为罗汉茶的特征成分，具有显著的抗炎活 93.9％）、黄 杞 苷 对 照 品（批 号 111906-201102，纯 度
性 。罗汉茶现行质量标准包括以罗汉茶对照药材为参 93.7％）、槲 皮 苷 对 照 品（批 号 111538-201606，纯 度
[5]
照的薄层鉴别和以落新妇苷为指标的含量测定 ，虽然 90.6％）均购自中国食品药品检定研究院；新落新妇苷对
[1]
在定性和定量方面对其进行了相关规定，但对特征性成 照品（批号 DST191209-077，纯度 98％）、异落新妇苷对
分的控制较为单一，不能全面评价罗汉茶的质量。 照品（批号 DST190922-216，纯度 98％）、新异落新妇苷
传统的含量测定通常以一个或两个成分作为对象， 对照品（批号DST191025-078，纯度97％）均购自成都普
但仅以单一成分含量作为质量控制指标不能全面反映 菲德生物技术有限公司；乙腈为色谱纯，其余试剂均为
罗汉茶的优劣。有研究发现，由于落新妇苷的异构性和 分析纯，水为超纯水。
热不稳定性，易转化成新落新妇苷、异落新妇苷、新异落 罗汉茶药材样品共9批（编号S1～S9），除S8样品采
[6]
新妇苷等3个同分异构体 。因此，有必要建立多成分、 自广西桂林市外，其余样品均采自广西玉林市。经广西
多指标的罗汉茶质量控制方法 [7－10] 。多指标质量评价模 食品药品检验所中药民族药室黄清泉主管中药师鉴定
式需要有相应的对照品，但在实际应用中发现，新落新 为胡桃科黄杞属植物黄杞 E. roxburghiana Wall.的干
妇苷、异落新妇苷、新异落新妇苷等对照品价格昂贵且 燥叶。
难以获得。一测多评（QAMS）法整合了已有含量测定 2 方法与结果
方法的优势，借助待测成分内在的函数和比例关系，仅 2.1 色谱条件
以单个对照品就可以实现对多个成分的同步测定，具有 以Phenomenex SuperLu C 18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）
节约实验耗材、简化操作步骤、节省测定时间和含量测 为色谱柱，以乙腈-0.1％甲酸溶液（19 ∶ 81，V/V）为流动
定结果准确度高等优点 。基于此，本研究采用高效液 相；检测波长分别为 254 nm（新落新妇苷、落新妇苷、新
[7]
相色谱-一测多评（HPLC-QAMS）法测定罗汉茶中落新 异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷）、291 nm（槲皮苷）；流
妇苷、黄杞苷、槲皮苷、新落新妇苷、异落新妇苷、新异落 速为1.0 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。
新妇苷的含量，同时进行聚类分析和主成分分析，旨在 2.2 溶液的制备
为完善罗汉茶的质量评价提供参考。 2.2.1 混合对照品溶液 分别取新落新妇苷、落新妇
1 材料 苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷对照品
1.1 主要仪器 适量，精密称定，加甲醇溶解并稀释，制成质量浓度分别
本研究所用主要仪器有 1260 型、1100 型高效液相 为 3.628、435.696、0.995、26.068、52.729、9.998 μg/mL 的
色谱（HPLC）仪及配套的真空脱气机、四元泵、自动进样 混合对照品溶液（Ⅰ）以及质量浓度分别为 20.733、
器、柱温箱、二极管阵列检测器、Chemstation B.04.0色谱 1 212.249、7.962、83.417、146.772、154.605 μg/mL的混合

·2486 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20 中国药房 2021年第32卷第20期