Page 54 - 《中国药房》2021年20期
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I. japonica Thunb.的干燥头状花序。16批旋覆花药材来                 2.4 数据处理
        源信息见表1。                                                 根据旋覆花不同组分色谱峰的一级和二级质谱数
                  表1 16批旋覆花药材来源信息                           据，将误差（即实测值与理论值之间的差值）小于5 ppm、
         Tab 1 Source information of 16 batches of I. japonica  同位素分布丰度比一致且含有二级碎片信息的化合物
         药材编号           炮制品编号           采集地                 作为目标成分，把目标成分离子的精确质量导入在线高
         X1              MX1        江苏省徐州市邳州市八义集镇           分辨数据库 mzCloud（https：//www.mzcloud.org）和中药
         X2              MX2        江苏省徐州市邳州市八义集镇
         X3              MX3        江苏省徐州市睢宁县古邳镇            成分高分辨质谱本地数据库 OTCML 进行定性分析，以
         X4              MX4        江苏省徐州市睢宁县王集镇            确定化合物归属。采用 Qual Browser 4.1.39.1 软件分析
         X5              MX5        江苏省徐州市睢宁县沙集镇            旋覆花及蜜旋覆花的UPLC-MS/MS数据。
         X6              MX6        江苏省宿迁市泗阳县爱国镇
         X7              MX7        江苏省宿迁市泗阳县穿越镇            2.5 化合物的鉴定
         X8              MX8        江苏省宿迁市泗阳县王集镇                分别取“2.2”项下旋覆花及蜜旋覆花的供试品溶液，
         X9              MX9        陕西省西安市鄠邑区蒋村镇
         X10             MX10       陕西省西安市蓝田县洩湖镇            按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析，得到旋覆花及蜜
         X11             MX11       陕西省西安市鄠邑区石井镇            旋覆花的总离子流图（图 1）。结果显示，旋覆花及蜜旋
         X12             MX12       陕西省西安市鄠邑区石井镇
         X13             MX13       陕西省西安市鄠邑区蒋家村镇           覆花化学成分对应色谱峰的响应强度大多发生了变
         X14             MX14       陕西省宝鸡市陈仓区县功镇            化。通过各成分在质谱高能量扫描时所产生的碎片离
         X15             MX15       河南省开封市尉氏县朱曲镇            子，明确其元素组成，同时结合碎片离子、多级质谱裂解
         X16             MX16       河南省开封市尉氏县水坡镇
                                                            碎片种类、相对丰度等信息以及“2.4”项下的数据库和相
        2 方法与结果
                                                            关文献[11－23]，对目标成分进行鉴定。结果显示，从旋
        2.1  蜜旋覆花饮片的制备
                                                            覆花及蜜旋覆花中共鉴定出29个共有化学成分（匹配度
            取旋覆花药材，除去梗、叶及杂质，即得旋覆花饮
                                                            均不低于 80％），包括 1-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、3，5-二
        片。参照2020年版《中国药典》（一部）“蜜旋覆花”项下
                                                            咖啡酰奎宁酸等5个酚酸类成分，槲皮素、木犀草素、狭
        方法炮制 ：取蜂蜜 25 g，加适量沸水稀释后，加入至旋
                 [1]
                                                            叶依瓦菊素等 12 个黄酮类成分以及 1-O-乙酰旋覆花内
        覆花饮片（即净旋覆花）100 g 中，拌匀，闷透，置于炒制
                                                            酯、二大花旋覆花内酯 B、1-O-乙酰基-6-O-异丁酰基大
        容器内，用文火炒至不粘手时取出，放凉，即得16批蜜旋
                                                            花旋覆花内酯等12个倍半萜内酯类成分。结果见表2。
        覆花饮片（编号MX1～MX16，详见表1）。
                                                              100
        2.2  供试品溶液的制备                                         90
                                                             ％  80
            分别取旋覆花饮片及蜜旋覆花饮片样品粉末（过三                            70
                                                              60
        号筛）各约 0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加                        relative abundance，  50
                                                              40
        入 80％甲醇 25 mL，称定质量，超声（功率 300 W，频率                     30
                                                              20
        40 kHz）处理 30 min，放冷，再次称定质量，用 80％甲醇                    10
                                                               0
        补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得旋覆花及                                  5  10  15  20  25  30  35  40  45  50  55  60  65
                                                                                     t，min
        蜜旋覆花的供试品溶液。                                                             A.旋覆花（编号X1）
                                                             100
        2.3  色谱与质谱条件                                          90
                                                             ％  80
        2.3.1  色谱条件      以 Waters ACQUITY UPLC BEH C18        70
        （150 mm×2.1 mm，1.7 μm）为色谱柱，以 0.1％甲酸溶液                relative abundance，  60
                                                              50
                                                              40
        （A）- 乙 腈（B）为 流 动 相 进 行 梯 度 洗 脱（0～60 min，              30
                                                              20
        98％A→40％A；60～70 min，40％A）；流速为0.3 mL/min；              10
                                                               0
        柱温为30 ℃；进样量为5 µL。                                          5  10  15  20  25  30  35  40  45  50  55  60  65
                                                                                    t，min
        2.3.2  质谱条件      离子源为电喷雾离子源，检测模式为                                      B.蜜旋覆花（编号MX1）
        正离子模式，扫描模式为数据依赖二级扫描-未知物发                                   图1 旋覆花及蜜旋覆花的总离子流图
        现模式；一级质谱扫描范围为 m/z 70～1 050，二级质谱                     Fig 1 The total ion chromatograms of I. japonica and
        扫描范围为 m/z 50～1 050；归一化碰撞能量为 40、60                         honey-fried I. japonica
        eV；质谱图类型为峰形图；鞘气流速为35 arb；辅助气流                       2.6 化合物裂解规律及特征
        速为10 arb；喷雾电压为3.80 kV；透镜电压为50 V；加热                  2.6.1  酚酸类     本研究检测到的酚酸类成分母离子
                                                                    +
        温度为350 ℃；毛细管温度为350 ℃。                               是[M+H] 。以保留时间 6.41 min 的化合物 1 为例：在正

        ·2480 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20                                 中国药房    2021年第32卷第20期
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