Page 105 - 《中国药房》2021年20期

2.5 干扰试验 温下放置24 h、反复冻融（－70 ℃～室温）3次、自动进样
取临床上常与伏立康唑联用的药物美罗培南、利奈 器（20 ℃）内放置12 h、－20 ℃下冻存3个月后，按“2.3”
唑胺、多索茶碱对照品各适量，用甲醇溶解、稀释，制成 项下方法处理，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，考察
质量浓度均为 0.02 mg/mL 的单一溶液，分别按“2.1”项 稳定性。结果显示，在上述条件下，各样品实测质量浓
下色谱条件进样测定，观察出峰情况。结果显示，上述 度与理论质量浓度的偏差均在±15％内，提示其稳定性
药物的保留时间均小于 2 min，对伏立康唑和内标的出 良好。
峰均未造成干扰（图略）。 2.10 残留效应考察
2.6 线性与定量下限考察 按“2.6”项下方法配制伏立康唑高质量浓度（20
取伏立康唑贮备液适量，用甲醇稀释成系列标准溶 μg/mL）的血浆样品。将上述高质量浓度的血浆样品和
液，加入10倍体积的空白血浆，制成伏立康唑质量浓度 空白血浆按“2.3”项下方法处理后，再依次按“2.1”项下
分别为 0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的系列标 色谱条件进样测定，考察残留效应。结果显示，高质量
准血浆样品溶液，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项
浓度的血浆样品进样后再进样的空白血浆中伏立康唑
下色谱条件进样测定，记录峰面积。以伏立康唑质量浓
的残留量低于其定量下限的 1％，表明本方法几乎没有
度为横坐标（x）、伏立康唑与内标的峰面积比值为纵坐
残留。
标（y），采用最小二乘法进行线性回归，得回归方程 y＝
2.11 测定方法的应用
0.269 5x+0.019 0（r＝0.999 6）。结果表明，伏立康唑检
取 10 例使用伏立康唑 6 d 并于下次用药前 0.5 h 采
测质量浓度在 0.2～20.0 μg/mL 范围内与峰面积成良好
集的患者全血适量（所有患者伏立康唑血药浓度已达稳
的线性关系，定量下限为0.2 μg/mL。
态，给药剂量、剂型等临床资料见表2），置于含抗凝剂的
2.7 精密度与准确度试验
收集管中，37 ℃下以 3 000 r/min 离心 6 min，分离血浆。
按“2.6”项下方法配制伏立康唑定量下限和低、中、
取上述血浆适量，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项
高质量浓度（0.2、0.5、5.0、15.0 μg/mL）的质控血浆样品，
下色谱条件进样测定，记录峰面积并代入随行回归方
按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下色谱条件进样
程计算血药浓度。结果见表 2。由表 2 可知，有 8 例患
测定，同日内重复测定 6 次，连续测定 3 d，考察日内、日
者的伏立康唑血药浓度在目标质量浓度范围（1.0～5.5
间精密度（以 RSD 表示）。根据随行回归方程计算各质
μg/mL ）内，有 2 例患者低于目标质量浓度下限。临床
[2]
控血浆样品中伏立康唑的实测质量浓度，以实测质量浓
药师建议上述2例低血药浓度患者增加伏立康唑给药剂
度与理论质量浓度比较，考察准确度。结果见表1。
量。另外，有1例重症医学科患者的伏立康唑血药浓度
2.8 提取回收率考察
虽然内在目标质量浓度范围内，但已接近上限，临床药
按“2.6”项下方法配制伏立康唑低、中、高质量浓度
（0.5、5.0、15.0 μg/mL）的质控血浆样品各6份，按“2.3”项 师考虑到该患者近期肝药酶水平较治疗前升高，建议降
下方法处理后，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录 低伏立康唑给药剂量。医师均采纳临床药师建议。
峰面积 A1。另取空白血浆，按“2.3”项下方法处理后，加 3 讨论
入伏立康唑对照品溶液，使其最终质量浓度与前者对 近年来，医疗机构开始普及伏立康唑的TDM，已有
应，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积 A2。 部分国内医院开展了相关监测，监测量在抗菌药物大类
[5]
按如下公式计算提取回收率：提取回收率（％）＝A1/A2× 中仅次于万古霉素 。伏立康唑血药浓度测定方法主要
[6]
100％。结果见表1。 包括 HPLC 法、液质联用（LC-MS）法和生物分析法 。
2.9 稳定性试验 但由于 LC-MS 法仪器昂贵且操作复杂，生物分析法敏
按“2.6”项下方法配制伏立康唑低、中、高质量浓度 感性和特异性较低 ，HPLC法成为医疗机构开展伏立康
[6]
（0.5、5.0、15.0 μg/mL）的质控血浆样品各6份，分别于室 唑TDM的理想选择。
表1 伏立康唑血药浓度测定的精密度与准确度试验结果
Tab 1 Results of precision and accuracy tests for the concentration determination of voriconazole
理论质量浓度， 日内（n＝6） 日间（n＝18） 提取回收率（n＝6）
μg/mL 实测质量浓度（x±s），μg/mL RSD，％ 准确度（x±s），％ 实测质量浓度（x±s），μg/mL RSD，％ 准确度（x±s），％ 结果（x±s），％ RSD，％
0.2 0.202±0.010 4.95 101.18±4.80 0.198±0.013 6.57 99.00±6.63
0.5 0.531±0.007 1.32 106.12±1.34 0.530±0.019 3.58 106.18±3.89 86.77±3.21 3.70
5.0 4.929±0.049 0.99 98.59±0.98 5.019±0.117 2.33 100.37±2.34 87.10±1.44 1.65
15.0 15.170±0.284 1.87 101.12±1.89 15.140±0.367 2.42 100.93±2.45 89.86±1.54 1.71

中国药房 2021年第32卷第20期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20 ·2527 ·