Page 104 - 《中国药房》2021年20期

21.3％～117.4％，患者肝功能、体质量、联合用药以及 时用甲醇稀释至相应浓度，即得。
CYP2C19 基因型等因素均可影响该药物的体内过程 。 2.2.2 内标溶液 称取内标对照品 25 mg，精密称定后
[3]
因此，为了实现增效减毒，开展治疗药物监测（TDM）对 用甲醇溶解并定容至25 mL，制成质量浓度为1.0 mg/mL
于指导临床伏立康唑个体化应用显得尤为重要。本课 的贮备液，置于 4 ℃冰箱中冷藏，备用。临用时用甲醇
题组前期已建立了一种测定人血浆中伏立康唑浓度的 稀释至0.01 mg/mL，即得。
高效液相色谱（HPLC）法，并已将其用于临床 。为了进 2.3 血浆样品的处理
[4]
一步提高检测效率、缩短测定时间，本课题组更换了内 精密移取血浆样品200 μL，加入0.01 mg/mL的内标
标物质，并对样品前处理方法进行了优化，现报道如下。 溶液40 μL、乙腈400 μL，涡旋混匀1 min后，于4 ℃下以
1 材料 14 000 r/min离心6 min，取上清液20 μL进样分析。
1.1 主要仪器 2.4 专属性考察
分别取 6 份不同来源的空白血浆、空白血浆+伏立
本研究所用主要仪器包括 1260 型 HPLC 仪（美国
康唑（5.0 μg/mL）、受试血浆（使用伏立康唑6 d并在下次
Agilent 公司），Quintix125D-1CN 型电子天平[赛多利斯
用药前 0.5 h 采血），按“2.3”项下方法处理（空白血浆不
科学仪器（北京）有限公司]，MX-S 型涡旋混合器、
加内标）后，再按“2.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱
DM0412S型低速离心机（美国Scilogex公司），Centrifuge
图（图 1）。结果显示，伏立康唑与内标的色谱峰峰形良
5424 R型高速冷冻离心机（德国Eppendorf公司）等。
好，且可分离完全，保留时间分别约为4.75、5.90 min，血
1.2 主要药品与试剂
浆中的内源性物质对待测物的测定无干扰，表明本方法
伏立康唑对照品（批号 1-TTK-73-1，纯度 98％）、利
专属性良好。
奈唑胺对照品（批号1-MLM-3-1，纯度98％）均购自加拿
10
大 Toronto Research Chemicals 公司；利鲁唑对照品（内
8
标，批号 100684-200401，纯度 99.7％）、美罗培南对照品
（批号 130506-201403，纯度 86.8％）、多索茶碱对照品 mAU 6
（批号 100625-201202，纯度 99.9％）均购自中国食品药 4
2
品检定研究院；乙腈（色谱纯）、甲醇（色谱纯）均购自德
0
国Merck公司；磷酸二氢钾（分析纯）购自上海泰坦科技
1 2 3 4 5 6
股份有限公司；其余试剂均为分析纯或实验室常用规 t，min
A.空白血浆
格，水为超纯水。
10
1.3 血浆 8 1
健康人空白血浆由浙江大学医学院附属杭州市第
一人民医院血库提供；伏立康唑受试血浆采集自浙江大 mAU 6 4 2
学医学院附属杭州市第一人民医院的10例住院患者，每 2
例患者均接受伏立康唑TDM并签署知情同意书。本研 0
究方案经浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院医 1 2 3 4 5 6
t，min
学伦理委员会批准通过，伦理批件号为〔2019〕科研医伦 B.空白血浆+伏立康唑+内标
审第（040）号-01。 10
2 方法与结果 8
2.1 色谱条件 mAU 6
以Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 （100 mm×4.6 mm， 4 1 2
2
3.6 μm）为色谱柱，以乙腈-0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液
0
（38 ∶ 62，V/V）为流动相；流速为1.0 mL/min；检测波长为
1 2 3 4 5 6
255 nm；柱温为40 ℃；进样量为20 μL。 t，min
2.2 溶液的配制 C.受试血浆+内标
注：1.伏立康唑；2.内标
2.2.1 对照品溶液 称取伏立康唑对照品 25 mg，精密 Note：1. voriconazole；2. internal standard
称定后用甲醇溶解并定容至 25 mL，制成质量浓度为 图1 伏立康唑的高效液相色谱图
1.0 mg/mL的贮备液，置于4 ℃冰箱中冷藏，备用。临用 Fig 1 HPLC chromatograms of voriconazole

·2526 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 20 中国药房 2021年第32卷第20期