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[4]
900 各给药剂量均参考本课题组前期实验结果设置 。各组
850
800
750 小鼠按“2.3”项下方法灌胃给药或水，连续给药 7 d。抗
700
650
600 炎实验前小鼠禁食不禁水12 h；末次给药后45 min，滴二
550
mV 500 甲苯溶液 0.05 mL 于小鼠右耳廓致炎；15 min 后脱颈椎
450
U， 400
350 处死小鼠，沿双耳对称的耳根部剪下双耳，以6 mm 打孔
300
250
200 器在两耳相同位置打下耳片，以分析天平称耳片质量，
150
100 并计算耳肿胀度（耳肿胀度＝右耳片质量－左耳片质
50
0
量）。按“2.3”项下统计学方法处理数据。结果显示，与
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95
t，min 空白组比较，华佗豆各极性部位组小鼠耳肿胀度均显著
图3 华佗豆不同极性部位的HPLC对照图谱R 降低（P＜0.05或P＜0.01），详见表1。
Fig 3 HPLC control fingerprint R of different polar
2.5 华佗豆不同极性部位镇痛抗炎作用的谱效关系
parts of C. muricatum
分析
1.50 2.5.1 镇痛抗炎指标的数据转化 将“2.3”“2.4”项下各
1.25
1.00 组小鼠的扭体次数、耳肿胀度进行数据转化，分别计算
AU 0.75
0.50 镇痛率[镇痛率＝（空白组扭体次数－给药组扭体次数）/
0.25
0
空白组扭体次数×100％]和肿胀抑制率[肿胀抑制率＝
0 15 30 45 60 75 90
t，min （空白组肿胀度－给药组肿胀度）/空白组肿胀度×
注：3.新绿原酸；5.绿原酸；6.隐绿原酸；10.异绿原酸 A；11.异绿原 100％]，结果见表2。
酸C 表2 镇痛抗炎指标的数据转化结果
Note：3. neochlorogenic acid；5. chlorogenic acid；6. cryptochloro-
genic acid；10. isochlorogenic acid A；11. isochlorogenic acid C Tab 2 Data transformation result of analgesic and
图4 混合对照品溶液的HPLC图 anti-inflammatory indexes
Fig 4 HPLC chromatogram of mixed substance control 组别 镇痛率，％ 肿胀抑制率，％
空白组
用 SPSS 21.0 软件对数据进行统计分析，数据以 x±s 表 罗通定组/醋酸地塞米松组 61.66 65.7
示；多组间数据比较采用单因素方差分析，组间两两比 华佗豆总部位组 40.41 50.9
华佗豆乙酸乙酯部位组 52.33 52.1
较采用 LSD-t 检验；检验水准为α＝0.05。结果显示，与 华佗豆正丁醇部位组 57.51 59.6
空白组比较，华佗豆各极性部位组小鼠扭体次数均显著 华佗豆水部位组 18.54 25.6
减少（P＜0.05或P＜0.01），详见表1。 2.5.2 灰色关联度分析 灰色关联度分析是研究因素
表 1 华佗豆不同极性部位的镇痛、抗炎作用考察结果 间发展趋势的相似或相异程度、衡量不同因素间关联程
（x±±s，n＝10） 度的方法，适用于评价中药化学成分与药效之间的关联
[6]
Tab 1 Analgesic and anti-inflammatory effects of dif- 程度 。本研究以镇痛率和肿胀抑制率为参考序列，以
ferent polar parts of C. muricatum（x±±s，n＝ 华佗豆各极性部位HPLC指纹图谱的共有峰峰面积为比
10） 较序列，计算参考序列与比较序列的灰色关联系数（即
组别 扭体次数，次 耳肿胀度，mg 关联度），并对关联度大小进行排序。若关联度＞0.6，则
空白组 38.6±6.48 7.37±1.26 表明该共有峰与药效指标呈相关性；若关联度＞0.8，则
罗通定组/醋酸地塞米松组 14.8±2.60 ＊＊ 2.53±0.85 ＊＊
[7]
华佗豆总部位组 23.0±4.73 ＊ 3.62±1.48 ＊ 表明该共有峰与药效指标呈高度相关性 。结果显示，
华佗豆乙酸乙酯部位组 18.4±4.76 ＊ 3.53±2.17 ＊ 除了6号峰外，其余10个共有峰与镇痛作用的关联度均
华佗豆正丁醇部位组 16.4±5.99 ＊＊ 2.98±0.79 ＊＊
华佗豆水部位组 31.4±4.22 ＊ 5.48±1.79 ＊ 大于 0.6，且对镇痛作用影响大小的排序为 3 号峰（新绿
原酸）＞7 号峰＞10 号峰（异绿原酸 A）＞9 号峰＞11 号
注：与空白组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊
＊＊
＊
＊＊
Note：vs. blank group，P＜0.05， P＜0.01 峰（异绿原酸 C）＞1 号峰＞4 号峰＞2 号峰＞8 号峰＞5
2.4 华佗豆不同极性部位的抗炎作用考察 号峰（绿原酸）＞6号峰。所有共有峰与抗炎作用的关联
将 60 只小鼠分为空白组、醋酸地塞米松组（ 0.006 度均大于 0.6，且对抗炎作用影响大小的排序为 3 号峰
g/kg）、华佗豆总部位组（25 g/kg，以生药量计，下同）、华 （新绿原酸）＞10 号峰＞7 号峰＞5 号峰（绿原酸）＞9 号
佗豆乙酸乙酯部位组（25 g/kg）、华佗豆正丁醇部位组 峰＞11号峰（异绿酸C）＞1号峰＞4号峰＝6号峰＞8号
（25 g/kg）、华佗豆水部位组（25 g/kg），每组 10 只。上述 峰＞2 号峰。其中，3 号峰（新绿原酸）、7 号峰、10 号峰

·2082 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 17 中国药房 2021年第32卷第17期