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0.26％，相对保留峰面积的RSD为0.30％～2.98％，均小
于3％（n＝6），表明仪器精密度良好。
404.01
2.2.5 稳定性试验 取铁线蕨药材粉末（编号S9）适量，
按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液后，分别于室温下放 302.75
mV
置 0、2、4、8、24、48 h 时，再按“2.1”项下色谱条件进样分 U，
析，记录色谱图。以12号峰为参照峰，计算各共有峰的 201.49
相对保留时间和相对峰面积。结果显示，各共有峰相对
100.23
保留时间的 RSD 为 0.01％～0.21％，相对保留峰面积的
RSD 为 1.00％～2.98％，均小于 3％（n＝6），表明供试品
0 10.87 21.74 32.61 43.48 54.35 65.22 76.09
溶液在室温下放置48 h内稳定性良好。 t，min
2.2.6 重复性试验 取铁线蕨药材粉末（编号S9）适量， 图2 铁线蕨药材的对照指纹图谱R
按“2.2.1”项下方法平行制备6份供试品溶液，再按“2.1” Fig 2 Control fingerprint R of A. capillusveneris
项下色谱条件进样分析，记录色谱图。以12号峰为参照 0.10 绿原酸
0.08 槲皮素-3-O- 山柰酚-
峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结 mV 0.06 β-D-吡喃 3-O-芸
葡糖苷酸
香糖苷
0.04
果显示，各共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.01％～ U， 0.02 0
－0.02
0.26％，相对保留峰面积的RSD为2.06％～2.99％，均小 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80
于3％（n＝6），表明该方法重复性良好。 t，min
图3 混合对照品溶液的HPLC-DAD图谱
2.2.7 铁线蕨药材指纹图谱的生成 取 19 批铁线蕨药
Fig 3 HPLC-DAD chromatogram of mixed control so-
材粉末适量，按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，再按
lution
“2.1”项色谱条件进样分析，记录色谱图。采用《中药色
谱指纹图谱相似度评价系统》（2004A 版），以样品 S8 的 2.2.9 相似度评价 将19批铁线蕨药材的HPLC-DAD
图谱为参照图谱（该图谱的色谱峰峰形较好），设定时间 指纹图谱导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》
（2004A版）进行相似度评价。结果显示，19批铁线蕨药
窗宽度为0.3 s，采用多点校正的方法和平均数图谱生成
材的相似度范围为 0.530～0.962，表明不同产地铁线蕨
法，对19批铁线蕨药材的指纹图谱进行数据整合，生成
药材间的成分存在一定差异，详见表2。
19批铁线蕨药材的叠加指纹图谱和对照指纹图谱R，详
2.3 化学计量学分析
见图1、图2。
2.3.1 聚类分析 将19批铁线蕨药材22个共有峰的相
1
20
3 896.58 对峰面积导入SPSS 26.0软件，采用组间连接法，以平方
欧氏距离作为样品的测度进行聚类分析 ，详见图4。由
[5]
17
9 12
2 3 4 5 6 7 8 10 11 13 14 15 16 18 19 21 22 图 4 可知，19 批铁线蕨药材可聚为 3 类：S7、S10 聚为一
S19
2 921.62 S18 类，S15、S18 聚为一类，S1～S6、S8、S9、S11～S14、S16、
S17
S16 S17、S19聚为一类。
S15
S14
mV 1 946.65 S13 2.3.2 主成分分析（PCA） 将19批铁线蕨药材的22个
U， S12
S11 共有峰的相对峰面积导入 SIMCA 14.1 软件中，采用非
S10
[6]
S9 监督模式识别法进行 PCA ，并绘制 PCA 得分散点图，
S8
971.68 S7 详见图 5。由图 5 可知，19 批铁线蕨药材样品可聚为 4
S6
S5 类：S7、S10 聚为一类，S15 为一类，S18 为一类，S1～S6、
S4
S3
S2 S8、S9、S11～S14、S16、S17、S19聚为一类。
－3.29 S1
0 15.93 31.86 47.79 63.72 79.65 95.58 2.3.3 正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA） 为更
t，min
好地反映 19 批铁线蕨药材的成分差异，笔者基于 PCA
图1 19批铁线蕨药材的叠加指纹图谱
结果，采用监督模式识别法进行 OPLS-DA，并绘制
Fig 1 Superimposed fingerprint of 19 batches of A.
OPLS-DA 模型得分图，详见图 6。由图 6 可知，19 批铁
capillusveneris 线蕨药材样品可聚为 4 类，与 PCA 结果一致。另外，
2
2.2.8 共有峰指认 取“2.2.3”项下混合对照品溶液，按 OPLS-DA 模型中的拟合参数 R X＝0.854，R Y＝0.918，
2
“2.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图，详见图 3。 模型预测参数（Q）＝0.776，均大于0.5，表明所建立的模
2
由图2和图3比对可知，19批铁线蕨药材共有22个共有 型稳定且预测能力较强 。以模型变量投影重要性
[6]
[6]
峰，其中 9 号峰为绿原酸、17 号峰为槲皮素-3-O-β-D-吡 （VIP）值＞1为指标筛选19批铁线蕨药材的差异成分 ，
喃葡糖苷酸、20号峰为山柰酚-3-O-芸香糖苷。 结果详见图7。由图7可知，9号峰（绿原酸）、17号峰（槲
中国药房 2021年第32卷第17期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 17 ·2087 ·