Page 35 - 2021年17期
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p53                                  53 kDa
                                                                                                     21 kDa
          caspase-3                               32 kDa        p21

            Bcl-2                                 26 kDa       CDK2                                  33 kDa

             Bax                                  21 kDa      cyclin E                               48 kDa

           β-actin                                43 kDa       β-actin                               43 kDa
                 空白对照组  COS低浓度组  COS中浓度组  COS高浓度组                   空白对照组   COS低浓度组  COS中浓度组  COS高浓度组
                      A. p53、caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白                         B. p21、CDK2、cyclinE蛋白
                            图3 COS对SK-BR-3细胞凋亡及周期相关蛋白表达影响的电泳图
        Fig 3 Electrophoretograms of the effects of COS on the expression apoptosis and cycle related proteins in
               SK-BR-3 cells

                     表4 各组SK-BR-3细胞中凋亡及周期相关蛋白相对表达量的检测结果（x±±s，n＝3）
        Tab 4 Results of relative expression of apoptosis and cycle related proteins in SK-BR-3 cells in each group（x±±s，
               n＝3）
         组别            p53/β-actin  caspase-3/β-actin  Bcl-2/β-actin  Bax/β-actin  p21/β-actin  CDK2/β-actin  cyclinE/β-actin
         空白对照组         0.544±0.040  0.619±0.048  1.244±0.071  0.424±0.056  0.294±0.016  0.866±0.014  0.838±0.040
         COS低浓度组       0.957±0.049 ＊  0.785±0.056 ＊  1.106±0.048 ＊＊  0.706±0.076 ＊  0.647±0.025 ＊＊  0.391±0.015 ＊＊  0.581±0.027 ＊＊
         COS中浓度组       1.164±0.032 ＊＊  1.094±0.054 ＊＊  0.838±0.093 ＊＊  1.073±0.054 ＊＊  0.848±0.056 ＊＊  0.199±0.026 ＊＊  0.413±0.055 ＊＊
         COS高浓度组       1.408±0.061 ＊＊  1.614±0.061 ＊＊  0.554±0.037 ＊＊  1.270±0.028 ＊＊  0.999±0.057 ＊＊  0.175±0.035 ＊＊  0.074±0.035 ＊＊
                                  ＊＊
                           ＊
           注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
                               ＊
           Note：vs. blank control group，P＜0.05， P＜0.01
                                      ＊＊
        发展，例如肿瘤细胞常因上述检查点出现缺陷而导致其                           而言，其发挥抗癌作用的机制主要是通过激活并启动细
                  [16]
        无限制增殖 。许多抗肿瘤药物在特定的检测点诱导                            胞凋亡途径以达到杀死肿瘤细胞的目的                   [22－23] 。研究表
                                      [17]
        细胞周期阻滞，从而诱导细胞凋亡 。Hua 等 的研究                         明，p53是一种肿瘤抑制蛋白，可通过调节凋亡介导蛋白
                                                [18]
        显示，COS可将人肺鳞癌SK-MES-1细胞周期阻滞于G1/                     的表达来改变线粒体膜的通透性，从而触发细胞凋
        S 期，从而抑制该细胞的增殖。本研究结果显示，COS                         亡 。Bcl-2 蛋白家族是一个调节线粒体途径的凋亡调
                                                             [24]
        低、中、高浓度组G0/G1期细胞百分比均显著升高，S期细                       节蛋白大家族，其主要以 Bax（促凋亡蛋白）和 Bcl-2（抗
        胞百分比均显著降低，提示COS可阻滞SK-BR-3细胞于                       凋亡蛋白）为代表。其中，Bcl-2蛋白是由控制线粒体的
        G1/S 期，从而抑制细胞的增殖，且这种作用呈浓度依赖                        相关凋亡因子所释放的主要调节因子，可通过调节膜电
        趋势。由此推测，细胞周期G1/S期阻滞可能是COS抑制                        位而控制线粒体外膜通透性             [25－26] ；Bax 一般存在于细胞
        肿瘤细胞增殖的机制之一。                                       质中，当接收到凋亡信号时，Bax会重新定位于线粒体表
            p53是一种肿瘤抑制蛋白，在调节细胞周期进程、激                       面，在其表面构成跨线粒体膜的孔，导致膜电位降低、膜
        活检查点和促进细胞凋亡中起关键作用；p21 是 Clp 家                      通透性增加，从而释放凋亡因子、活化下游caspase，进而
        族成员之一，位于p53因子下游，也是p53最重要的下游                        激活 caspase-3、启动 caspase 级联反应，最终诱发细胞凋
        因子之一 。p21 基因编码的 p21 蛋白是目前已知的具                      亡 。因此，为进一步探讨COS诱导SK-BR-3细胞凋亡
                                                             [27]
                [19]
        有最广泛激酶抑制活性的细胞周期抑制蛋白，能抑制                            的分子机制，本研究检测了COS对其凋亡途径关键调控
        cyclinE-CDK2复合体的活性；后者会使视网膜母细胞瘤                     因子p53、Bax、Bcl-2、caspase-3表达的影响。结果显示，
        蛋白不能发生磷酸化、转录因子 E2F 不能被释放，从而                        低、中、高浓度的COS均可使p53、Bax、caspase-3蛋白的
        使细胞周期停滞在G1期         [19－20] 。本研究结果显示，低、中、          表达上调，同时使 Bcl-2 蛋白的表达下调。上述结果表
        高浓度的COS均可使p21蛋白（p53的下游靶标）表达上                       明，p53及线粒体介导的caspase激活途径在COS诱导的
        调 ，同 时 使 CDK2 和 cyclinE 蛋 白 表 达 下 调 ；而 cy-         SK-BR-3细胞凋亡中起了关键作用。
        clinE-CDK2 复合体的正常表达在细胞 G1/S 期的转折中                      综上，COS可有效抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞活性，
        起着重要作用，这些数据进一步解释了COS导致人乳腺                          加速细胞凋亡，并使细胞周期阻滞在G1/S期；其作用机制
        癌细胞G1/S期阻滞的潜在机制。                                   可能与调控p53/Bax/Bcl-2/caspase-3凋亡信号通路有关。
            细胞凋亡是细胞程序性死亡引起组织损伤的一种                          参考文献
                [21]
        生理反馈 。对于目前癌症治疗常用的绝大多数药物                            [ 1 ]  TZIKAS A K，NEMES S，LINDERHOLM B K. A compa-

        中国药房    2021年第32卷第17期                                             China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 17  ·2077 ·
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